辣椒叶醇提物的体外抗氧化活性

邱爱东，苟琳，肖红梅，王娜

（1．成都学院（成都大学）生物产业学院，四川成都 610106；2．四川农业大学，四川雅安 625014）

辣椒叶醇提物的体外抗氧化活性

邱爱东1，苟琳2，肖红梅2，王娜2

（1．成都学院（成都大学）生物产业学院，四川成都 610106；2．四川农业大学，四川雅安 625014）

摘 要：探讨辣椒叶抗氧化作用，采用乙醇提取辣椒叶醇提物，测定其总黄酮含量，并考察该提取物体外总抗氧化活性以及清除超氧阴离子自由基、羟自由基和DPPH自由基的能力。结果表明辣椒叶总黄酮含量为4.2%，醇提取物具有较强的体外抗氧化活性和清除自由基的活性。辣椒叶中含有黄酮以及抗氧化活性成分，具有明显抗氧化作用。

关键词：辣椒叶；乙醇提取物；抗氧化

辣椒为茄科辣椒属植物，目前对辣椒的研究和利用主要集中在辣椒的果实，其果实富含VC、辣椒碱和辣椒素等生物活性成分，具有很高的营养价值与保健作用，常用作蔬菜和调味品，具有抗氧化[1-2]、抗菌[3]、助消化[4]、降压[5]和降脂减肥等功能[6]。但利用辣椒果实的同时所产生的大量辣椒叶利用率却非常低，仅少量用于食用和作为饲料，绝大多数的辣椒叶则被废弃，未能充分利用，造成资源浪费。为提高辣椒的综合利用价值，我们以辣椒叶为试材，采用乙醇浸提得辣椒叶醇提取物，测定其总黄酮含量，进而研究辣椒叶醇提物的抗氧化作用，以辣椒叶醇提物总抗氧化活性和清除超氧阴离子自由基、羟自由基、DPPH自由基的能力评价其抗氧化能力，关于此方面的研究较为少见。本文旨在为辣椒叶的综合开发和利用提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 材料

辣椒叶采自四川农业大学农场，经鉴定为Caps icum.annuumL.的叶。二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）、芦丁（rutin）购自Sigma公司。乙醇，硝酸铝，亚硝酸钠，氢氧化钠和邻苯三酚等试剂均为国产分析纯。

BS210S电子分析天平：Sartorins公司；UV1240型紫外可见分光光度计：Shimadzu公司；HH-S恒温水浴锅：江苏国胜实验仪器厂；RE2000旋转蒸发器：上海亚荣生化仪器厂。

1.2 方法

1.2.1 辣椒叶乙醇提取液的制备

辣椒叶洗净，吸水后60℃烘干，粉碎并过80目筛备用。取辣椒叶粉5.0 g，按1∶40料液比加入60%乙醇溶液，在 60℃下，浸提 1 h，8 000 r/min，离心 15 min，收集上清。再重复浸提一次，合并上清液减压浓缩至一定体积，60%乙醇溶液定容至50 mL，得质量浓度为0.1 g/mL辣椒叶乙醇提取液。

1.2.2 辣椒叶乙醇提取液总黄酮测定

采用硝酸铝-亚硝酸钠法[7]测定。以芦丁为标准品，测定A510值，吸光值A为横坐标，芦丁浓度C（μg/mL）为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程。

辣椒叶乙醇提取液稀释到一定浓度，参照标准曲线的方法测定其吸光值A，由回归方程计算出辣椒叶乙醇提取液总黄酮的含量以及辣椒叶总黄酮的含量。

1.2.3 辣椒叶乙醇提取液总抗氧化活性测定

方法[8]，测定不同浓度辣椒叶乙醇提取液总抗氧化活性，以A695的值表示抗氧化活性的强弱，A695的值越大，则抗氧化活性越强；反之则越弱。

1.2.4 辣椒叶乙醇提取液对超氧阴离子自由基的清除作用

按文献方法[9]，检测不同浓度辣椒叶乙醇提取液对超氧阴离子自由基的清除能力。

1.2.5 辣椒叶乙醇提取液对羟自由基的清除作用

采用Fenton法[7]，在检测体系中加入不同浓度的辣椒叶乙醇提取液，测定A510的值，计算辣椒叶乙醇提取液对羟自由基的清除率。

1.2.6 辣椒叶乙醇提取液对DPPH自由基的清除作用

参照汪海波方法[10]，测定不同浓度辣椒叶乙醇提取液对DPPH自由基活性的影响，并计算其清除率。

2 结果与分析

2.1 辣椒叶乙醇提取液总黄酮含量

由芦丁标准标准曲线得回归方程：y=980.25x-3.854 9，R2=0.999 9，推算得知 0.1 g/mL（质量浓度）辣椒叶乙醇提取液黄酮含量为4.2 mg/mL，而辣椒叶总黄酮含量为4.2%。

2.2 辣椒叶乙醇提取液总抗氧化活性

辣椒叶乙醇提取液总抗氧化活性，结果见图1。

图1 辣椒叶乙醇提取液总抗氧化活性Fig.1 Total antioxidant activities of ethanol extracts from chili pepper leaves

由图1可见，在测定范围内，吸光度的变化随提取液浓度的增加而逐渐增加，结果显示辣椒叶总抗氧化活性随提取液浓度的加大而增强，呈明显的量效关系。

2.3 辣椒叶乙醇提取液清除超氧阴离子自由基

辣椒叶乙醇提取液清除超氧阴离子自由基，结果见图2。

图2 辣椒叶乙醇提取液对O2-·的清除Fig.2 Scavenging activities of ethanol extracts from chili pepper leaves on O2-·

图2显示，在测定范围内，辣椒叶乙醇提取液对O2-·有一定程度的清除作用，随辣椒叶乙醇提取液浓度增加清除率增加，当提取液浓度为0.125 mg/mL～0.75 mg/mL时，清除率较弱；而当浓度为0.75 mg/mL～1 mg/mL时，则有明显的清除效果。

2.4 辣椒叶乙醇提取液清除羟自由基

辣椒叶乙醇提取液清除羟自由基，结果见图3。

图3 辣椒叶乙醇提取液对·OH的清除Fig.3 Scavenging activities of ethanol extracts from chili pepper leaves on·OH

从图3可见，辣椒叶乙醇提取液对·OH有较强的清除作用，随着乙醇提取液浓度的增加，对·OH的清除能力也逐渐增强，并呈现明显量效关系，当提取液浓度为12.5mg/L时，清除率可达99%，而IC50=4.30mg/mL。

2.5 辣椒叶乙醇提取液清除DPPH自由基

辣椒叶乙醇提取液清除DPPH自由基，结果见图4。

图4 辣椒叶乙醇提取液对DPPH·的清除Fig.4 Scavenging activities of ethanol extracts from chili pepper leaves on DPPH·

图4显示，辣椒叶乙醇提取液对DPPH自由基的清除作用，随提取液浓度的增加，清除率明显增加，当提取液浓度为0.25 mg/L时，清除率可达75%，而IC50=0.21 mg/mL。

3 结论

本研究以辣椒叶为材料，经乙醇提取得辣椒叶醇提物，测定该醇提物黄酮含量，并对其体外总抗氧化活性以及清除超氧阴离子自由基、羟基自由基和DPPH自由基的能力进行了检测，这是一种体外筛选抗氧化物质的常用方法。实验结果表明，辣椒叶中含有黄酮，其含量为4.2%，而且此醇提物经总抗氧化活性测定显示较强的抗氧化能力，总抗氧化活性随醇提物浓度升高而增强，进一步研究醇提物对超氧阴离子自由基、羟基自由基和DPPH自由基的清除能力，发现对以上3种自由基均有清除作用，但强弱不同，表现为清除DPPH自由基的能力强于羟基自由基和超氧阴离子自由。这些研究结果揭示了辣椒叶中黄酮的存在，同时也预示辣椒叶中含有抗氧化活性成分。因此，这项研究将为辣椒叶的开发和利用提供有利的参考。

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[10]汪海波,肖建青,刘锡葵.核桃花抗氧化活性研究[J].食品科学,2008,29(10):140-141

Antioxidant Activities of Ethanol Extracts from Chili Pepper Leaves（ In Vitro）

QIU Ai-dong1，GOU Lin2，XIAO Hong-mei2，WANG Na2
（1.School of Bio-industry，Chengdu college（Cheng Du University），Chengdu 610106，Sichuan，China；2.Sichuan Agriculture University，Ya'an 625014，Sichuan，China）

Abstract：Antioxidant effects were investigated from leaves of chili pepper.Ethanol extracts was extracted from leaves of chili pepper with ethanol in order to measure the content of total flavonoids and analyze the total antioxidant activity，superoxide anion，hydroxyl and DPPH free radical scavenging activity.It was found that total flavonoids was 4.2%in the leaves of chili pepper and ethanol extracts exhibited strong antioxidant activity power and scavenging effect against free radicals.Pepper leaves contain flavonoids，and antioxidant components，had antioxidant effects.

Key words：chili pepper leaves；ethanol extracts；antioxidant

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2013.13.002

成都学院（成都大学）校基金2010XJ22

邱爱东（1969—），男（汉），高级工程师，博士，从事功能性食品，生物制药。

2012-10-19