牛奶中β-内酰胺类和四环素类抗生素检测方法

2013-08-31杜祥乐

中国乳业 2013年2期

文 / 扶胜杜祥乐

（北京勤邦生物技术有限公司）

随着奶牛养殖业的发展，抗生素在预防和治疗奶牛疾病方面得到了广泛的应用。生鲜牛奶中抗生素的来源主要有：①治疗泌乳期病牛时使用的抗生素会从奶牛内移到乳腺残留并进入牛奶中。资料表明，治疗期间的奶牛，其挤出的牛奶5 天内都有抗生素残留。②为了预防奶牛疾病并提高产量，在奶牛饲料中添加抗生素也会造成牛奶中抗生素的残留。③由于牧场管理不善，挤奶、储奶没有严格的卫生制度和配套设施，人为添加可造成牛奶抗生素的污染。

人们食用含有抗生素的牛奶，会引发过敏、机体产生耐药性等问题，所以世界各国禁止含有抗生素的奶制品在市场上流通。这样政府对企业的监控就增加了在收奶过程中抗生素的检测项目。市场上随之产生了相应的快速检测产品。快速检测产品可以分为试剂盒和试纸条两大类，其大部分都是基于免疫学中的相关原理进行研发的。试剂盒能够配合酶标仪出具相应的检测数据，适合企业监控抗生素残留，建立相应的数据库；而试纸条则在现场检测及收奶环节用得比较多。目前，我国市场上的检测产品国外生产商占据了相当大的比例，而国内一些企业也采用特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术，应用β-内酰胺类和四环素类抗生素抗体竞争结合β-内酰胺类和四环素类抗生素偶联物和样品中可能含有β-内酰胺类和/或四环素类抗生素的原理，研发出了可同时快速检测牛奶中β-内酰胺类和四环素类试纸条产品（A产品）。本文对该产品的检测项目及检测限、操作步骤、判定标准、产品优点等进行了介绍。

1 产品检测项目及检测限

试纸条产品可检测的项目和检测限如表1所示。

2 检测操作步骤

检测操作步骤如图1所示：（1）准备好牛奶样品，编好号码，并恢复到室温；（2）从原包装中取出试剂桶，打开后取出所需数量的微孔试剂和试纸条，并做好标记；（3）吸取编好号的牛奶样品溶液，滴加200 μL于微孔中；（4）缓慢抽吸5 次充分与微孔中试剂混匀，混合液颜色呈粉红色，开始计时，孵育5 min；（5）将标记好的试纸条插入微孔中，印有“max”线端朝下，使之充分浸入溶液中，室温孵育5 min；（6）取出试纸条，根据图2判定结果。

表1 产品检测项目及检测限

表2 与国内市场主流β-内酰胺类等检测产品对比

图1 检测操作步骤

图2 判定方法

判定方法如下：阴性（－）：T线和B线和C线都显色，判为阴性；β-内酰胺类阳性（＋）：C线和T线显色，B线无显色，判为阳性；四环素类阳性（＋）：C线和B线显色，T 线无显色，判为阳性；β-内酰胺类和四环素类阳性（+）：C线显色，T 、B线无显色，判为阳性。需要注意的是：如果未出现C线，表明操作过程不正确或试纸条已变质失效，应重新测试；试纸条若需记录存档，需在读数后，立即剪去试纸条“max”线端的海绵垫，晾干后存档。