IL-8基因多态性与幽门螺旋杆菌易感性的相关研究

王文文，吴春媛，赵蜀崖

（海南省人民医院胃镜室，海南海口571100）

IL-8基因多态性与幽门螺旋杆菌易感性的相关研究

王文文，吴春媛，赵蜀崖

（海南省人民医院胃镜室，海南海口571100）

目的探讨白细胞介素-8（IL-8）-251A/T基因多态性与幽门螺旋杆菌易感性的关系。方法收集我院消化内科2009年1月至2011年6月间的幽门螺旋杆菌阳性的慢性胃炎患者共276例作为实验组，阴性患者301例作为对照组。利用PCR-RFLP技术检测基因多态性，利用统计学方法对数据进行分析。结果AA、AT、TT三种基因型的检出例（率）在实验组中为45例(16.3%)、152例(55.1%)、79例(28.6%)，对照组中为107例(35.5%)、146例(48.5%)、48例(15.9%)，组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。等位基因A/T在实验组和对照组中的检出率分别为43.8%/56.2%和59.8%/40.2%，组间比较差异亦具有统计学意义(P<0.05)。结论白细胞介素-8基因-251A/T基因多态性与幽门螺旋杆菌的易感性具有密切关联，等位基因T可能是幽门螺旋杆菌感染的危险因素。

白细胞介素；幽门螺旋杆菌；基因多态性

幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori，Hp)是具有高感染率的慢性致病菌，其感染可引起人类发生慢性胃炎等胃慢性疾病[1]，与胃癌的发生发展具有密切关系[2]。不同人群中Hp的感染率不同，且致病机制复杂，近些年来研究的热点逐渐转向基因研究方面：一方面一系列新的致病基因逐渐被发现，另一方面是与幽门螺旋杆菌易感性有关的人类基因也被不断报道[3-4]。其中白细胞介素IL-1、IL-8、肿瘤坏死因子α等基因的多态性与幽门螺旋杆菌的感染存在相关性[3-5]。-251A/T是IL-8的启动子上的多态位点，关于该位点的多态性与幽门螺旋杆菌的感染及胃癌发生的关联性存在争议，本研究试图以海南人群为研究对象，对该课题进行深入的研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料对2009年1月至2011年6月间在我院消化内科进行治疗的慢性胃炎患者进行检测，276例幽门螺旋杆菌感染者作为实验组，病程0.5~22年，年龄34~65岁，平均44.1岁，男女比例为167:109。同期进行治疗的非幽门螺旋杆菌感染患者301例作为对照组，病程0.5~21年，年龄35~64岁，平均43.5岁，男女比例为181:120。两组患者的性别、年龄及其他基本资料差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 基因多态性的检测方法所有患者采集外周抗凝血2 ml，利用血液基因组DNA提取试剂盒（上海生工）提取基因组DNA。引物序列为：下游引物为5'-aagcttgtgtgctctgctgtctct-3'，上游引物为5'-aatgcctt-gctccaactgc-3'。扩增聚合酶链式反应(PCR)扩增体系为20µl，包括模板DNA0.2μg，引物各0.2~0.5μmol/L，4种dNTP各200 μmol/L，Taq DNA聚合酶(北京天根公司产品)1U。PCR循环参数为：首先在94℃进行酶2 min的热变性，随后进行32个循环反应。利用MunI酶对扩增产物进行酶切过夜，酶切产物在1.5%的琼脂糖凝胶中电泳，经溴化乙锭(EB)染色在UVI band凝胶成像系统(英国UVI tec公司产品)中观察结果并照相。

1.3 统计学方法应用SPSS13.0统计软件进行数据处理。基因频率采用基因计数法计算。组间基因型与等位基因频率比较用χ2检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 -251 A/T突变位点的基因型检出样本数及基因型分布频率经χ2检验，两组间TT基因型和AA基因型的基因型频率比较，差异具有统计学意义(P< 0.05)，而AT基因型在两组间则差异无统计学意义，见表1。

表1 -251A/T突变位点的基因型检出样本数及基因型分布频率

2.2 -251 A/T等位基因A和T的检出率及分布频率等位基因A/T在实验组和对照组中的检出率分别为43.8%/56.2%和59.8%/40.2%，其组间差异亦具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 -251A/T等位基因A和T的检出率及分布频率

3 讨论

研究表明，胃酸分泌的缺乏是Hp的易感因素之一[6]。白细胞介素IL-8可促进IL-1的表达，而后者具有抑制胃酸分泌的作用。因此，IL-8表达水平的高低与胃酸的分泌量密切相关。-251A/T是IL-8基因启动子区的一个多态位点，等位基因A或者T与对该基因表达的影响存在争议。如张笑添等[7]的研究认为等位基因A可提升启动子的活性，促进该基因的表达量。而Lee等[8]的研究则发现等位基因T的表达活性高于A的表达活性。因此，有必要对该课题进行深入的研究。

本研究以海南慢性胃炎患者为研究对象，对276例幽门螺旋杆菌感染者和301例非感染者进行了-251A/T多态性的分析。结果显示AA、AT、TT三种基因型的检出例（率）在实验组中为45例(16.3%)、152例(55.1%)、79例(28.6%)，对照组中为107例(35.5%)、146例(48.5%）、48例(15.9%)。对AA、AT、TT三种基因型分别进行统计学分析，结果显示，TT基因型和AA基因型在组间差异具有统计学意义，而AT基因型在两组间差无统计学意义。等位基因A/T在实验组和对照组中的检出率分别为43.8%/56.2%和59.8%/40.2%，组间差异亦具有统计学意义。从本实验结果中可以推断出等位基因T的表达水平低于A的表达水平。这与张笑添等[7]的研究结果一致。

综上所述，等位基因T可能是幽门螺旋杆菌的易感基因，而A则可能对该菌具有一定的抗性。

[1]于凌琪.幽门螺旋杆菌的研究进展[J].中国慢性病预防与控制, 2010,18(2):218-219.

[2]Sette A,Keogh E,Ishioka G,et al.Epitope identification and vaccine design for cancer immunotherapy[J].Curr Opin Investig Drugs,2002,3:132-139.

[3]Torres J,Backert S.Pathogenesis of Helicobacter pylori infection[J]. Helicobacter,2008,13(Suppl 1):13-17.

[4]Schneller R,Gupta J,Mustafa,et al.Helicobacter pylori infection is associated with a high incidence of intestinal metaliasia in the gastric mucosa of patients at inner-City hospitals in New York J[J].Digestive Discascs and Sciences,2006,51:1367-1371.

[5]Nayoung,KimSung-ⅡCho,Jeong-Yoon Yim,et al.The effects of genetic polymorphisms of IL-1 and TNF-A on Helicobacter pylori induced gastroduodenal discascs in Korea[J].Helicobacter,2006, 11:105.

[6]Omar EM,Rabkin CS,Gammon MD,et al.Increase risk of non cardia gastric cancer associated proin flammatory cytokine genepolymorphisms[J].Gastroen terology,2003,124(5):1193-1201.

[7]张笑添,任海兰.IL-8基因多态性对慢性HBV感染者血清IL-8水平的影响[J].山西医科大学学报,2012,43(1):1-3.

[8]Lee WP,Tai DI,Lan KH,et al.The-251T allele of the interleukin-8 promoter is associated with increased risk of gastric carcinoma featuring diffuse-type histopathology in Chinese population[J]. Clin Cancer Res,2005,11:6431-6441.

Correlation between-251A/T polymorphism of IL-8 and the susceptibility of Helicobacter pylori.

WANG Wen-wen,WU Chun-yuan,ZHAO Shu-ya.Gastroscopy Room,Hainan Provincial People's Hospital,Haikou 571100, Hainan,CHINA

ObjectiveTo investigate the correlation between 251A/T polymorphism of IL-8 and the susceptibility of Helicobacter pylori.MethodsA total of 276 cases with Helicobacter pylori positive were chosen as the study group,and 301 cases with Helicobacter pylori negative as the control group.The gene polymorphism was detected by PCR-RFLP and the data were statistically analyzed.ResultsThe cases(rate)of AA,AT,TT genotypes detected was 45(16.3%),152(55%),79(28.7%)in the study group and 107(35.5%),146(48.5%),48(15.9%)in the control group. Difference between the two groups has statistical significance(P<0.05).Alleles of A/T in the study group and the control group was 43.8%/56.2%and 59.3%/40.7%,respectively,and the difference was statistically significant(P<0.05). Conclusion-251A/T polymorphism of IL-8 is closely related with the susceptibility of Helicobacter pylori,and the T allele may be the risk factors of Helicobacter pylori infection.

Interleukin;Helicobacter pylori;Gene polymorphism

R378.2

A

1003—6350（2013）16—2344—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.16.0970

2013-01-24)

赵蜀崖。E-mail：zsy4444@163.com