金华市RhD阴性献血者Rh血型表型库的建立及应用

蔡隽(金华市中心血站，浙江金华 321000)

Rh血型系统是最具多态性的红细胞血型系统，在我国汉族人群中RhD阴性血型所占比例仅为0.2% ～0.5%，属于稀有血型，了解本地区Rh血型表现型分布情况，掌握分布规律，建立完善稀有血型数据库，有利于为临床及时提供合适的RhD阴性血液，我们调查了近2年来所做的RhD阴性血样239份，对其Rh血型抗原表型进行分型，建立RhD阴性血型档案，从而为保证临床应急供应稀有血型提供参考价值，同时也对献血者的科学管理提供了依据，现将调查报道如下。

1 材料与方法

1.1 对象 对2011年1月～2012年11月，金华市50 480名经体检合格后参加献血的自愿无偿献血者，年龄:18～55岁，标本采用EDTA-K2抗凝，5 mL/份。50 480名无偿献血者中，共筛选确认RhD阴性为239名。

1.2 检测试剂 抗A、抗B标准血清(长春博德生物技术有限责任公司、上海血液生物医药有限责任公司);ABO试剂红细胞由金华市中心血站自制;IgM抗D、IgG抗D、多特异性抗球蛋白(抗 IgG+C3d)、抗-C、抗-c、抗-E、、抗-e及筛选红细胞均为上海血液生物医药有限公司生产，且均在有效期内使用。

1.3 仪器 瑞士TECAN RSP 150全自动加样器、北京雷勃尔久离心机、TECAN酶标仪。

1.4 方法 采用全自动微板法检测ABO血型及RhD血型，RhD阴性确认分别用3个不同批号的单克隆抗血清进行抗人球蛋白试验，以排除Du型，筛查出RhD阴性标本采用试管法进行Rh血型抗原表型进行分型，所有实验均设有阴、阳性对照。

1.5 RhD阴性血型表型库建立 采用BIS2.0计算机管理软件，录入239名RhD阴性供血者的个人资料及ABO血型、RhD阴性表型、不规则抗体等结果，建立RhD阴性供血者信息库。当临床需要RhD阴性血液，可以通过机算机及时检索查找到相配合的血液，并将有关资料提供给相关科室，及时满足临床用血的需要。

2 结果(表1，2)

表1 RhD阴性与RhD阳性献血者在ABO血型中的分布

表2 239名RhD阴性献血者Rh血型抗原表型分布

3 讨论

本次调查显示，在金华地区RhD阴性血型占0.47%，符合中国人RhD阴性0.2% ～0.5%的分布特点［1］，与本省宁波地区报道的0.53%、温州地区报道的0.43%［2，3］汉族献血者RhD阴性群体分布相符。从表1结果显示:RhD阴性与RhD阳性血型人群在AB0血型中分布基本吻合，表明RhD阴性表型在ABO血型中呈均匀分布，两个血型系统不具备相关性，在遗传上相互独立。本文统计的RhD阴性血液在AB0血型中分布为 A∶B∶O∶AB 为3.0∶2.4∶3.8∶0.7，可指导血站和各临床医院充分了解不同血型血液用量的比例，提示各型血液的库存比例是否在适合的范围之内。

Rh血型系统是最复杂的遗传多态性红细胞血型系统之一，其临床意义仅次于ABO血型系统，Rh系统内由45个抗原组成［4］，与临床密切相关的主要是 D、E、C、c、e，以 D 抗原性最强，RhD阴性患者输注了RhD阳性血液后，大多数人可以产生免疫性RhD抗体，当再次输注RhD阳性血液后，多出现严重的溶血性输血反应，所以目前临床工作中把RhD列为输血前常规检查项目。然而近年来，即使是RhD配合相符，由C、c、E、e抗原配合不符引起的配血困难或输血反应的报道越来越多，抗Rh通常由于输血及妊娠等免疫作用产生，当再次输入不相合血液时，轻者发生迟发性变态反应，重者可引起严重的输血反应，甚至死亡，对于长期需要输血维持和治疗的RhD阴性患者，输血时不仅仅满足配血要求，还需要考虑Rh表型因素，尽量输入Rh表型相同的血液，以减少输血反应的发生。RhD阴性血型的患者本来存在供血较为困难的情况，如有Rh血型系统抗体的存在，会使供血更为困难，所以Rh血型系统配合输注越来越受到临床的重视。本组调查中在金华地区RhD阴性献血者中共检出6种表型，以ccdee 为主，由高到低依次为 dccee、dCcee、dCCee、dccEe、dC-cEe、dccEE，未检出 dCCEe及dCcEE。经从表2可以看出，RhD阴性Rh血型表型频率特点为dccee(50.62%)＞dCcee(32.21%)＞dCCee(8.78%)＞dccEe(5.02%)＞dCcEe(2.51%)＞dccE(0.84%)，这反映出金华地区Rh血型系统中各表型所占的比例特点，可以指导稀有血型库的库存比例，保证患者同型输注，满足临床需要。近年来我站通过建立稀有血型QQ群，实现RhD阴性者互助献血，通过RhD阴性献血者进行Rh表型抗原谱查，建立实用型稀有血型库指导血型库中各型血液的库存比例，并采用深低温(-80℃)冰冻保存RhD阴性血液技术，血液保存期延长至10年，使RhD阴性血液得以调剂使用，通过以上措施，从金华市供血状况来看，日常RhD阴性红细胞的供应能够满足临床需求。综上所述，掌握金华市无偿献血者RhD阴性抗原表型分布规律，完善稀有血型数据库，推广应用红细胞甘油冻存技术，建立稀有血型血液品种储备库，对稀有血型患者的紧急用血及降低免疫性输血反应具有非常重要的作用。

［1］ 赵桐茂.人类血型遗传学.北京:科学出版社，1987:103-109.

［2］ 邬丽芳，张奕琴.宁波地区无偿献血者ABO、RH血型分布调查.现代实用医学，2012，24(6):696-697.

［3］ 林碧，陈筱华，陈荣仓，等.温州市无偿献血者ABO、Rh血型分布特征的调查分析.浙江医学，2008，30(5):518-520.

［4］ 刘达庄.免疫血液学.上海:上海科学技术出版社，2002:58-68.