便潜血试验酶联法与联苯胺法做对比分析

刘晓雯

（河南省漯河市郾城区人民医院，河南 漯河 462300）

便潜血试验酶联法与联苯胺法做对比分析

刘晓雯

（河南省漯河市郾城区人民医院，河南 漯河 462300）

目的 探讨便潜血试验酶联法与联苯胺法结果。方法 本次医学研究选择我院2010年1月至2012年1月之间收治的60例便潜血试验患者为观察对象，所有患者均同时接受酶联法与联苯胺法检测，对比两种方法临床检查结果。结果 联苯胺法便潜血试验阳性检出率为40%，酶联法为23.4%；联苯胺法对于动物和人的血红蛋白检测结果均为阳性，酶联法仅对人类检测结果为阳性，两种方法试验结果对比具有明显的统计学差异（P＜0.05）。结论 由本次临床研究结果可知，联苯胺法便潜血试验，尽管敏感性较好，但假阳性率较高，且特异性较差；而酶联法可作为人类便潜血试验首选方法，因而具有较高的临床推广和应用价值。

便潜血试验；酶联法；联苯胺法

便潜血试验是的是肉眼无法见到血色，消化道出血量较少，显微镜检查无法发现，且仅含有少量被破坏红细胞的一种出血症状。便潜血试验是临床上较为常用的消化道出血临床检查依据。便潜血检查的方法较多，但最为常用的主要包括免疫方法和化学方法两类，其中，前者具有不收还原性药物和饮食结构影响和限制等显著优势，而后者则会受到较多因素的影响，因而假阳性检出率较高，特异性较差。酶联法是近年来出现的一种便潜血临床试验方法，该方法具有不受饮食和药物因素影响，操作方法便捷、准确、简单、快速等显著优势，因而受到了临床医学工作者和医学理论研究人员的一种认可。本次临床研究对便潜血试验酶联法与联苯胺法的检查结果进行了分析，现将本次临床研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 试剂

联苯胺法便潜血试验，选用3%的过氧化氢溶液和联苯胺冰醋酸溶液10g/U作为试验试剂；酶联法便潜血试验，选用万华牌速而准便潜血条形试纸（万华普曼工程有限公司生产，批号：98020303）作为试验器材。

1.2 方法

依据《临床检验基础》的相关规定，严格执行联苯胺法便潜血试验。酶联法便潜血试验方法为：依据说明书严格执行操作，粪便液混合摇匀后，将其滴入测试窗口内，静置5min，对反应区变化情况进行观察。若反应线和控制线均未出现，则视为无效，需要重新进行试验；若仅显示处控制线，则确定为阴性；若同时出现反应线和控制线，则确定为阳性。

1.3 标本来源

本次医学研究选择我院2010年1月至2012年1月之间收治的60例便潜血试验患者为观察对象，所有患者均同时接受酶联法与联苯胺法检测。同时，从鱼、鸡、羊、猪四种动物中获取用于特异性试验的血红蛋白。

1.4 统计学处理

使用SPSS17.0软件对本次医学研究数据进行统计学分析。使用（）表示计量资料，使用单因素方差分析法对数据进行比较分析，使用χ2检验方法对计数资料进行统计学分析，若P＜0.05，则表示数据之间差异具有明显的统计学意义。

2 结 果

2.1 敏感性对比

酶联法便潜血试验共有14例患者为阳性，约占23.4%，联苯胺法便潜血共有24例患者为阳性，约占40%。联苯胺法和酶联法便潜血试验结果对比具有明显的统计学差异（P＜0.05）。如表1所示。

表1 联苯胺法和酶联法便潜血试验灵敏性对比分析[n/%]

2.2 特异性对比

分别对四种动物和人类的血蛋白液的肌肉组织和血液样品进行联苯胺法和酶联法检测，检测结果证实，人血红蛋白液联苯胺法和酶联法检测结果均为阳性，而鱼、鸡、羊、猪4种动物的联苯胺法检测结果为阴性，酶联法检测结果为阳性。4种动物血液辨别血红蛋白液分别接受联苯胺法和酶联法便潜血试验，如表2所示。

2.3 抗干扰试验

将维生素C加入浓度为的3.0g/mL血红蛋白液中，从而配置成维生素C浓度分别为5.0 mg/mL和2.5mg/mL的两种血红蛋白液试验样品。分别通过酶联法和联苯胺法对两种浓度不同血红蛋白液试验样品进行检测，检测结果证实，联苯胺法检测结果会受到大剂量维生素C的影响，产生反应抑制作用，从而降低Hb含量，并提高假阳性检出率；而酶联法检测结果则全部为阴性，不会受到维生素C剂量的影响。

表2 联苯胺法与酶联法便潜血试验特异性对比分析[n/%]

3 讨 论

便潜血试验检测的主要化学依据在于：血红蛋白与过氧化物酶的基本作用相近，能够对过氧化氢氧化某些色原显色产生催化作用。联苯胺无色孔雀绿是临床上较为常用的色原。联苯胺法就是以上述作用原理为基础上，通过联苯胺为色原，进行便潜血试验的一种技术[1]。酶联法是针对便潜血试验的特异性特点而逐渐发展成熟起来的一种免疫学检测方法，其主要作用原理在于以克隆抗体和单克隆为基础上，仅仅针对人体粪便样品中血红蛋白的特异性检测，而不针对其他种类血红蛋白，因而使用酶联法进行便潜血试验时，只有在粪便样品中含有血红蛋白时，其便潜血试验结果才能够显示为阳性，而其他试验结果均为阴性[2]。临床医学研究结果表明，消化道癌症患者便潜血检测阳性率通常在95%以上，而消化道溃疡患者便潜血检测的阳性率应在40%～70%，粪便中的微量血红蛋白检测对于消化道溃疡和消化道肿块等胃肠系统出血性疾病的早期诊断和治疗过程中具有十分重要的意义。

通过联苯胺法进行粪便隐血测试会在一定程度上受到多种复杂因素的影响，通常情况下，要求首检人间在检测前3d内要避免食用维生素C、含有过氧化物酶类的新鲜蔬菜（包括木耳、油菜、芹菜、韭菜、菠菜、西红柿和胡萝卜等）以及动物肉类，但是，这一要求通常无法进行准确的界定和严格显示。由此可见，使用联苯胺法进行便潜血测定仍然存在一定的限制，具有中高敏感性、假阳性检出率较高且特异性较差，因而不能进行0.18～2g/mL的微量出血测试，而这一观点在本次临床研究中也得到了可靠的证明。粪便潜血测试在消化系统肿瘤和消化道出血的临床检查和诊断过程中具有较高的应用价值和参考意义，这就需要试验具有操作简便，特异性和灵敏度高的优势，且试验过程中应选择对操作人员无明显危害的检测试剂。由本次临床研究结果可知，试验酶联法进行便潜血测试，具有较高的准确性、特异性和灵敏程度，且检测结果与临床诊断的符合率较高，不会受到食物和药物因素的影响。

由本次临床研究结果可知，联苯胺法便潜血试验灵敏度能够达到100%，特异性为83.3%，阳性检出率为40%；酶联法便潜血试验灵敏度为93.8%，特异性为100%，阳性检出率为23.4%。可见，联苯胺法便潜血试验技术，尽管操作较为简单，且灵敏性较高，但假阳性率较高，特异性较差，同时，联苯胺法还具有一定的致癌危险，因而临床应用价值有限。而酶联法则具有较强的特异性，结果更加易于判读，且检验结果获得速度较快，操作简单易行，灵敏性和特异性较强，同时，不会受到某些药物、维生素C和铁剂等物质的影响，因而具有较高的临床推广和应用价值[3]。

[1] 卢克友.粪便隐血试验单克隆抗体法与联苯胺法的比较[J].福建医药杂志,2008,30(2):109-110.

[2] 何淑霞,张冬青.便潜血单克隆抗体法与联苯胺法特异性比较[J].宁夏医学杂志,2001,23(8):472-473.

[3] 石晶,张丽霞,于素云.粪便潜血单克隆抗体一步实验法[J].中华医学检验杂志,2009,22(3):192-193.

R446.13+3

B

1671-8194（2013）35-0145-02