紫英颗粒对慢性盆腔炎大鼠模型治疗作用的研究

邱赛红，尹胭脂，余 娜，曾小艳，李富元，孙必强

（1.湖南中医药大学，湖南 长沙410208；2.湖南中医药大学2012级硕士研究生班，湖南 长沙410208；3.湖南中医药高等专科学校，湖南 株洲412012）

慢性盆腔炎指女性生殖器官、周围结缔组织及盆腔腹膜所发生的慢性炎症。是育龄期妇女最常见的生殖器宫炎症之一。20～49岁已婚育龄妇女中，其发病率为4.87%，约占妇科疾病的15%[1-2]。现代医学主要以对症治疗和抗菌、抗炎为主。大量的资料表明，中医药对慢性盆腔炎的治疗具有较好的疗效，在缓解症状、清除病灶、控制病情发展等方面均表现出了良好的作用趋势[3-4]。紫英颗粒为北京著名妇科专家柴松岩教授的临床经验方，由紫花地丁、蒲公英等9味药物组成。初步的临床观察证实，该方对慢性盆腔炎的治疗具有良好的疗效。本文报告采用大鼠制备子宫内膜炎症模型后实验性治疗的药理作用观察。现将试验方法和结果报道如下。

1 实验材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验药物与试剂 紫英颗粒干膏粉由长沙华源医药科技公司提供，相当于生药量5.045 g/g，批号：20060530；盐酸左氧氟沙星片，重庆刻尔康制药有限公司生产，批号：060501；白介素-6（IL-6）放射免疫试验盒，北京科美东雅生物技术有限公司生产，批号：20061025。

1.1.2 主要仪器 GC1500型γ-放射自动免疫计数器（科大创新股份有限公司）；LEICA DM LB2型双目显微镜（德国LEICA公司）；MIAS医学图像分析系统（北京航空航天大学科学仪器厂）。

1.1.3 菌种及来源 大肠埃希菌、乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌，均由湖南中医药大学微生物教研室临床微生物检验室从湖南中医药大学附属一医院门诊妇科病人宫颈分泌物标本中分离，经鉴定确认后用于实验。实验前用相应培养基增菌培养后稀释至所需浓度。

1.1.4 动物 成年SD雌性大鼠85只。购自上海西普尔—必凯实验动物有限公司，生产许可证号SCXK(沪)2003-0002号。实验动物使用许可证号：SYXK（湘）2003-0001号。

1.2 方法

1.2.1 动物模型 参照文献[5]方法，取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌，以常规方法增菌培养后，按2∶1∶1的比例混合成含菌浓度为3×109/mL供造模用。200～220 g雌性大鼠，除正常组外，其余以2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉。仰位固定，腹中线切口找到子宫。注射器抽取混合菌液0.2 mL，针头刺入一侧子宫，沿子宫壁划拔后推入一半的菌液，再向前推进后同法注入另一半菌液。完毕缝合腹腔。正常组动物不做手术处理。假手术组只打开腹腔、暴露子宫，不进行宫内注射。

1.2.2 分组与给药 造模后2周，将模型动物随机分为模型组、紫英颗粒高、中、低剂量组、左氧氟沙星组。分别给予紫英颗粒24、12、6 g/kg和左氧氟沙星80 mg/kg灌胃给药。每天1次，连续4周。模型组、假手术组和正常组给服等体积蒸馏水。末次给药后1 h，以2%戊巴比妥钠麻醉大鼠后进行相关检测。

1.2.3 观察指标 （1）子宫输卵管的外观及肿胀程度：肉眼观察各动物子宫的外观和肿胀、粘连情况。取下左、右两侧子宫分别称质量。按下式计算各动物子宫的肿胀度、肿胀率。

肿胀度=造模侧子宫质量-对照侧子宫质量

肿胀率=（造模侧子宫质量-对照侧子宫质量）/对照侧子宫质量×100%

（2）子宫组织IL-6测定 剪取造模侧子宫一段，称质量后与生理盐水按1∶9制成组织匀浆。匀浆经4℃、3 000 r/min离心15 min，取上清液-15℃保存。按试剂盒要求用放免方法测定匀浆IL-6含量。（3）子宫组织病理学检查 取造模侧子宫约1 cm用4%甲醛固定。常规包埋、切片。HE后光镜下观察组织形态与结构。参照文献方法[6]，观察子宫组织的上皮损伤、内膜中炎细胞浸润、充血水肿及成纤维细胞增生情况。按无“-”、轻度“+”、明显“++”、严重“+++”分别记录病变程度。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 子宫组织炎症肿胀情况

正常组和假手术组动物子宫柔软、平整。模型组动物造模侧子宫较对照侧明显增粗，部分形成包块并与周围组织粘连，浆膜面可见充血。质量分析显示造模侧子宫均明显大于未造模对照侧。紫英颗粒和左氧氟沙星组造模侧子宫的增粗、肿胀和充血程度均较模型组不同程度减轻，肿胀度与肿胀率与模型组比较均有显著性差异。紫英颗粒的作用随剂量加大而增强。见表1。

2.2 子宫组织IL-6含量测定

检测显示，造模动物子宫组织内IL-6水平较对照组明显增加。紫英颗粒各组的IL-6水平均明显降低，且作用较左氧氟沙星明显。见表1。

2.3 子宫组织病理学检查

光镜下，模型组可见子宫上皮细胞变性坏死、脱落明显，有较多的炎性细胞浸润和充血水肿，成纤维细胞增生显著，个别管腔内还有积脓。紫英颗粒和左氧氟沙星组上述病变程度均减轻。12 g/kg以上剂量的紫英颗粒组较模型组差异有统计学意义。见表2～3。

表1 紫英颗粒对混合菌液致大鼠盆腔炎模型子宫炎症的影响 （±s）

表1 紫英颗粒对混合菌液致大鼠盆腔炎模型子宫炎症的影响 （±s）

注：与假手术组比较★★P＜0.01；与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与左氧氟沙星比较△P＜0.05，△△P＜0.01；以下表同。

组 别正常组假手术组模型组紫英颗粒高组紫英颗粒中组紫英颗粒低组左氧氟沙星组剂量（g/kg）n——24 12 6 0.08 10 11 12 12 12 12 12肿胀度0.02±0.01 0.02±0.01 0.20±0.07★★0.11±0.04**0.11±0.04**0.13±0.06*0.14±0.04*肿胀率（%）8.35±4.69 9.0±5.88 68.62±26.28★★36.13±13.07**38.40±13.07**45.43±23.91*47.69±16.74*IL-6(pg/mL)27.65±6.84 28.21±6.54 64.03±22.42★★39.49±14.87**△△42.08±17.79*△△49.67±12.51△60.09±12.27

表2 紫英颗粒对子宫组织病理学上皮、炎性细胞的影响（只）

表3 紫英颗粒对子宫组织病理学内膜、成纤维细胞的影响（只）

3 讨论

慢性盆腔炎的发病多为混合菌感染。且宫腔操作也是造成内膜炎症的常见原因之一。机械损伤加混合菌液感染的方法制备子宫内膜炎模型比较接近临床实际，已在相关研究中被证实稳定和可靠[6]。故本文研究采用了该法制备病理模型。

中医理论认为，有关慢性盆腔炎相类疾病的病因及病机，不外寒、热、湿、瘀、虚”[4，7-8]。柴松岩教授在总结多年治疗慢性盆腔炎临床经验的基础上，结合《傅青主女科》关于“夫带下俱是湿证”的论述，认为慢性盆腔炎在症状明显期的病理机制主要与热、湿、瘀有关。由于湿、热、瘀互结积于胞宫，致气血失调、冲任受阻，故成带下、腹痛等症。治疗宜清热、化湿、祛瘀并举。紫英颗粒即以此为原则组方。研究证实，紫英颗粒对子宫内膜炎有较好的治疗作用，可减轻模型大鼠的子宫肿胀，对子宫组织的病理学改变有明显的改善。表明这种立法、组方的原则是非常有效的。

在慢性盆腔炎病变过程中，IL-6作为炎症反应的免疫效应分子有着重要影响，在组织的炎性反应中起着诱导和传递的作用[9]。研究显示紫英颗粒可降低子宫组织中IL-6的水平。我们在前期的研究报道中证实，紫英颗粒具有较广谱的抑菌作用，对引起妇科炎症的10种常见致病菌均有较好的抑制作用，且抑菌作用较稳定[10]。故由此推测，紫英颗粒治疗子宫内膜炎有效的作用机制，有可能与具有较广谱的抑菌作用及抑制子宫组织中炎性细胞因子IL-6的表达有关。

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