生长相关癌基因α与趋化素样因子超家族2在胃癌组织的表达

阮正英 陈 豪 罗 斌 浙江省台州市中西医结合医院 台州317523

范广民 浙江省台州市中心医院 应香岚 浙江省台州市肿瘤医院

生长相关癌基因α与趋化素样因子超家族2在胃癌组织的表达

阮正英 陈 豪 罗 斌 浙江省台州市中西医结合医院 台州317523

范广民 浙江省台州市中心医院 应香岚 浙江省台州市肿瘤医院

胃癌 趋化因子 生长相关癌基因α 趋化素样因子超家族2

研究表明，趋化因子及其受体可能在肿瘤生长、浸润和转移等生物学行为中起着重要的作用[1-2]。趋化因子生长相关癌基因（growth-related oncogene，GRO）和趋化素样因子超家族（chemokine-like factor superfamily member，CKLFSF）可能参与了肿瘤的生物学行为[3]，但与胃癌的关系目前尚不清楚。本研究通过检测胃癌组织GROα和CKLFSF2表达，探讨其与胃癌的发病机制的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2010年3月—2012年8月在台州市中西医结合医院、台州市肿瘤医院和台州市中心医院住院、术后经病理确诊胃癌患者63例，男40例，女23例，年龄48～89岁，平均（67.6±7.1）岁；其中低分化腺癌18例，乳头状腺癌13例，黏液腺癌和腺鳞癌各8例，管状腺癌5例，未分化癌4例，鳞癌3例，印戒细胞癌和类癌各2例。取胃癌组织为观察组，癌旁正常胃黏膜组织为正常对照组。

1.2 试剂和方法 兔抗人免疫组化试剂GROα多克隆抗体购自美国Biomedical Technologies公司，抗人CKLFSF2多克隆抗体购自上海天鸿生物科技有限公司，二抗山羊抗兔免疫组化试剂盒和DAB染色试剂均购自福州迈新生物技术开发有限公司。免疫组化技术测定GROα和CKLFSF2表达，具体步骤参考文献[4]方法。GROα和CKLFSF2的抗体稀释浓度分别为1∶100和1∶25。

1.3 结果判定 胞浆呈现棕黄色表达判定为阳性细胞，结构清晰，着色明显高于背景。每高倍视野阳性细胞数＜5%为阴性，≥5%为阳性；～25%为（+），～50%为（++），～100%为（+++）。

1.4 统计学方法 应用SPSS16.0软件进行统计分析，率的比较采用χ2检验，GROα与CKLFSF2蛋白表达的相关性采用spearman等级相关分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 胃癌组织和正常胃黏膜组织GROα表达 GROα蛋白主要表达于胃癌组织和正常胃黏膜组织的细胞浆内，呈棕黄色。胃癌组GROα阳性率显著高于对照组（P＜0.01），见表1。伴有腹腔淋巴结转移的胃癌组GROα阳性率显著高于不伴有转移者（P＜0.05)；其阳性率与性别、年龄、肿块大小、分化程度和临床分期无明显关系（P均＞0.05），见表2，图1～2（封二）。

2.2 胃癌组织和正常胃黏膜组织CKLFSF2蛋白表达 CKLFSF2蛋白主要表达于胃癌组织和正常胃组织的细胞浆内，呈棕黄色。胃癌组CKLFSF2阳性率显著低于对照组（P＜0.05），见表1。其阳性率与性别、年龄、肿块大小、分化程度、临床分期和淋巴结转移的生物学特性无明显关系（P均＞0.05），见表2，图3～4（封二）。

2.3 胃癌组织GROα与CKLFSF2表达的相关性胃癌组 GROα与 CKLFSF2表达均为阳性者占30.16%，其中CKLFSF2表达阴性组GROα的阳性率78.79%，CKLFSF2表达阳性组 GROα的阳性率63.33%，GROα表达阴性组 CKLFSF2的阳性率61.11%，GROα表达阳性组 CKLFSF2的阳性率33.33%。spearman等级相关分析显示，两者表达强度呈负相关（r=-0.480，P＜0.01），见表3。

表1 两组胃黏膜组织GROα和CKLFSF2表达比较 例

表2 胃癌组GROα和CKLFSF2阳性率与临床病理特点的关系 例

表3 胃癌组GROα和CKLFSF2的等级相关性

3 讨论

胃癌与幽门螺杆菌感染有关，趋化因子在此可能起到一定的作用，有证据显示，胃癌患者血清中白细胞介素6与幽门螺杆菌感染相关[5]。趋化因子是一种小分子量的促炎症因子，涉及到炎症细胞的浸润、血管发生、血细胞生成、肿瘤及自身免疫性疾病。在肿瘤的生物学行为中，趋化因子及其受体表现出双向调节作用，涉及到肿瘤的发生、发展和转移。不同的趋化因子所起的作用不同，有的趋化因子促进肿瘤细胞的生长[6-7]，有的却起着相反的作用[8]。

GROα属于CXC趋化因子超家族成员，具有广泛的促炎作用，还可能是一些慢性自身免疫性疾病新的治疗靶点[9]。随着研究的深入，越来越多的证据显示其与恶性肿瘤存在一定的相关性，可能促进肿瘤的发生、发展、侵袭和转移[10-11]。本研究发现，胃癌组织GROα蛋白阳性率明显高于肿瘤周围未受影响的正常黏膜组织，与胃癌淋巴结转移相关，而与性别、年龄、肿块大小、临床分期和分化程度的生物学特性无相关性。提示GROα在胃癌组织表达增强，对肿瘤的生长可能有促进作用，还可能与肿瘤的转移有关。

CKLFSF作为一种新型的细胞因子，位于人16号染色体上，其表达谱较广。该家族包括CKLF和CKLFSF1-8共9个基因，在免疫、生殖、造血、肿瘤的发生等发挥重要作用[10-11]。目前研究主要集中在CKLF-1的生物学特性方面，认为它能通过下调Bax和Caspase-3及上调Bcl-2的途径诱导血管平滑肌细胞增殖及抑制凋亡[10]，促进癌组织的生长。相反，CKLFSF则可能起着抑制肿瘤生长的作用。食管、贲门癌黏膜组织CMTM4和CMTM8蛋白阳性表达率均低于癌旁正常黏膜组织[11]。以上说明CKLFSF可能是潜在的抑癌因子，但CKLFSF2在胃癌的发生和发展中所起作用如何，则鲜见报道。本研究发现，胃癌组CKLFSF2阳性率明显低于癌旁正常黏膜组织，提示其可能具有抑癌作用。研究还发现，CKLFSF2与患者的性别、年龄、肿块大小、临床分期、分化程度、淋巴结转移的生物学特性无相关性。

综上所述，胃癌组织GROα表达增加，可能对胃癌组织的生长有促进作用，还与肿瘤细胞转移有关；而CKLFSF2表达下降，可能有抑制胃癌组织生长作用。本研究显示，趋化因子影响肿瘤的生长及远处转移等生物学特性，检测胃癌组织趋化因子GROα和CKLFSF2有助于判断患者病情和预后。随着研究的深入，以趋化因子及其受体为靶点可能有望成为一种新的治疗方法。但其机制仍然不清，是否与组织学分型和幽门螺杆菌感染有关等，尚有待于进一步研究。

［1］Xing YN，Xu XY，Nie XC，et al.Role and clinicopathologic significance of CXC chemokine ligand 16 and chemokine（C-X-C motif）receptor 6 expression in gastric carcinomas［J］.Hum Pathol，2012，43（12）：2299-2307.

［2］ Yasumoto K，Yamada T，Kawashima A，et al.The EGFR ligands amphiregulin and heparin-binding egf-like growth factorpromote peritonealcarcinomatosisin CXCR4-expressing gastric cancer［J］.Clin Cancer Res，2011，17（11）：3619-3630.

［3］Doll D，Keller L，Maak M，et al.Differential expression of the chemokines GRO-2，GRO-3,and interleukin-8 in colon cancer and their impact on metastatic disease and survival［J］.Int J Colorectal Dis，2010，25（5）：573-581.

［4］罗斌，王世夫，应香岚，等.趋化因子在结肠癌发病中的作

用［J］.中国中西医结合外科杂志，2011，17（4）：346-348.

［5］ Hui-Lee Wong，Charles S.Rabkin，Xiao-Ou Shu，et al. Systemic Cytokine Levels and Subsequent Risk of Gastric Cancer in Chinese Women［J］.Cancer Sci，2011，102（10）：1911-1915.

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［7］ Mukherjee D，Zhao J.The Role of chemokine receptor CXCR4 in breast cancer metastasis［J］.Am J Cancer Res，2013，3（1）：46-57.

［8］Meijer J，Ogink J，Kreike B，et al.The chemokine receptor CXCR6 and its ligand CXCL16 are expressed in carcinomas and inhibit proliferation［J］.Cancer Res，2008，68（12）：4701-4708.

［9］Lisi S，Sisto M，Lofrumento DD，et al.A potential role of the GRO-α/CXCR2 system in Sjögren's syndrome:regulatory effects of pro-inflammatory cytokines［J］.Histochem Cell Biol，2013，139（2）：371-379.

［10］Zhang T，Xiong J，Shen CY，et al.Effects of chemokinelike factor 1 on the proliferation and apoptosis of human vascular smooth muscle cell［J］.中华医学杂志（英文版），2012，92（29）：2069-2074.

［11］查鹏，姜冠潮，王俊.食管、贲门癌组织中CMTM4、8的表达及意义［J］.山东医药，2009，49（6）：21-22.

2013-04-11

浙江省温岭市科技局基金资助项目（No.2011-1-82）

通迅作者：罗斌，E-mail:luobinzg@163.com