MiR143和C—Myc在直肠腺癌中的表达及意义

钱小华

【摘要】 目的 研究观察MiR143和C-Myc在直肠腺癌中的表达意义，以供直肠腺癌病理诊断给予参考。方法 选择2010年9月——2012年12月我院收治的直肠腺癌30例、直肠良性病变患者30例为临床研究对象，对所有患者均取病理组织，检测MiR143和C-Myc。观察比较检测结果。结果 直肠腺癌MiR143表达明显低于直肠良性病变组，P<0.05，差异有统计学意义。直肠腺瘤组C-Myc阳性率表达高于直肠良性病变患者，组间比较，P<0.05，差异有统计学意义。结论 直肠腺癌患者有MiR143的低表达和C-Myc的高表达，有助于对直肠腺癌患者给予早期辅助诊断。

【关键词】 MiR143；C-Myc；直肠腺癌；病理诊断

直肠癌是临床常见的一种消化系统恶性肿瘤，随着我国人们生活水平的逐年提高，患者饮食结构的改变，导致直肠癌在我国发病率呈现了逐年上升的趋势，严重地威胁人类健康。而直肠癌患者早期多无明显的临床症状，因此临床诊断多被延误，一旦出现有临床症状时多已经到了癌症的中晚期。我院本次实验研究分析MiR143和C-Myc在直肠腺癌中的表达意义，报告如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 择2010年9月——2012年12月我院收治的直肠腺癌30例、直肠良性病变患者30例为临床研究对象。直肠腺癌患者30例中排出有远处转移，肿瘤管饭浸润邻近器官的患者。

直肠腺癌30例中，男16例，女14例，患者年龄在47-76岁之间，平均年龄为70.93±7.84岁。直肠良性病变患者30例中，男17例，女13例，患者年龄在48-77岁之间，平均年龄为70.41±7.04岁。两组患者的一般资料差异不明显，P>0.05，差异无统计学意义，具有可比性。

1.2 方法 在石蜡标本中提取总RNA，首先加入纯二甲苯，混匀后溶解标本的石蜡，在室温下进行高速离心，沉淀组织后弃去二甲苯，加入无水乙醇混匀，室温下进行高度离线，弃去乙醇后加入无水乙醇，重复操作2次以上[1]。随后加入缓冲液和蛋白酶，混匀后孵育，加入无水乙醇混匀后弃去管内液体，重复操作到所有液体都可以通过FilterCartridge。加入Wash Buffer等，进行核酸蛋白检测仪检测，采用实时荧光定量PCR方法。

首先对石蜡切片进行脱蜡，进行抗原修复，加入血清封闭液，吸干组织周围多余的血清，擦干PBS，使用DW清晰，在镜下控制显色的程度，使用苏木素对细胞核复染，烤干并封片。其中细胞浆为深棕色或棕褐色为阳性细胞[2]，每张切片阳性细胞的阳性程度包括：无色0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分，根据着色的面积：无色为0分，着色在1/3以下为2分，1/3-2/3为2分，3分为2/3以上，将两项之和作为判断结果，其中3分以上为阳性[3]。

1.3 数据处理 本次实验的所有数据处理均采用SPSS19.0软件包进行处理，检验水准α为0.05，以95%为可信区间，计算结果中P<0.05时，为样本差异明显且有统计学意义。

其中MiR143的检测结果为计量资料，组间对比方法为t检验；C-Myc阳性率为计数资料，组间比较使用χ2检验。

2 结 果

直肠癌标本MiR143Ct值高于直肠良性病变标本，说明直肠腺癌MiR143表达明显低于直肠良性病变组，P<0.05，差异有统计学意义。直肠腺瘤组C-Myc阳性率表达高于直肠良性病变患者，组间比较，P<0.05，差异有统计学意义，见表1。

3 讨 论

直肠癌是临床较为常见的一种恶性肿瘤，在1974年有学者提出直肠腺瘤—直肠腺癌的序贯学说，认为多数直肠癌起源于直肠腺瘤。直肠癌为多基因且多步骤的致癌过程，包括癌基因的激活及癌基因的抑制失活。

MiRNA为非小编码的RNA分子，包括18-25个核苷酸组成，在转录后水平调控基因的表达，在动物的生长发育、分化、细胞增殖及凋亡等均有租用。MiR143是定位在人类染色体5q32的基因，成熟序列为5′—UGAGAUGAAGCACUGUAGCUC-3′.我院本次实验使用实时定量检测技术PCR对直肠腺癌、直肠良性病变组的患者组织检测了MiR143，结果显示，直肠腺癌组低于直肠良性病变组，组间比较，P<0.05，差异有统计学意义，说明MiR143在直肠癌患者中有较为明确的表达，可以促进细胞的增殖，诱发癌变，对癌症起到了明显的促进作用。且大量研究还发现，MiR143为一种抑癌基因，充分地发挥了抑癌基因的作用。

C-Myc为原癌基因，为多功能基因，可以在细胞周期发生变化，并参与到细胞生长代谢，可以刺激血管的生成和细胞恶性转化，对细胞凋亡和分化均有重要的作用[4]。C-Myc编码出的蛋白可以结合靶基因的启动子，进而刺激细胞的增生，促进细胞凋亡。在直肠腺癌中C-Myc蛋白的高表达，说明C-Myc在直肠腺癌中的激活明显，对细胞凋亡产生了一定的抑制作用，并会延长肿瘤细胞的生存，增加其基因突变的机会[5]，进而对直肠腺癌的发生和发展起到了重要的作用。在癌变的过程中，C-Myc的大量表达，也会促进有癌变倾向的细胞发生明确的凋亡，且细胞增殖速度明显高于细胞凋亡速度。

综上所述，直肠癌MiRNA的发生和发展有非常重要的作用，且直肠腺癌患者有MiR143的低表达和C-Myc的高表达，有助于对直肠腺癌患者给予早期辅助诊断。

参考文献

[1] 陈少锴.研究miR-1256和miR143基因对人肾透明细胞癌的调控作用[J].中国医药指南，2012，10（21）：105-106

[2] 谢希晖，王荣，贾正平等.毛细管电泳法检测癌基因C-myc胃癌中基因点突变[J].分析化学，2011，39（11）：1695-1700.

[3] 周炳娟，张金库，赵文明等.基底细胞样乳腺癌中CIP2A及c-myc蛋白表达及意义[J].临床与实验病理学杂志，2012，28（9）：966-969.

[4] 刘香娟，李福年，姜丹丹等.非p53依赖通路c-myc基因对p14ARF基因的调控及细胞凋亡的诱导[J].中华医学杂志，2012，92（30）：2140-2143.

[5] 赵云霞，龚晓萌，崔芳芹等.乳腺癌中PTEN、Rb、C-myc的异常表达及其临床意义[J].中国老年学杂志，2012，32（12）：2531-2533.