恩替卡韦口腔崩解片的制备及质量研究*

2013-04-18黄晶晶

天津药学 2013年4期

陆军，黄晶晶，郑绯，徐伟

(1.南京优科生物医药有限公司，南京 210009； 2.江苏省中国科学院植物研究所，南京 210014 ； 3.南京工业大学药学院，南京 211816； 4.中国人民解放军第302医院，北京 100039； 5.福建中医药大学药学院，福州 350003)

恩替卡韦(entecavir) 能够高效抑制乙肝病毒复制,抗乙肝病毒活性比其他核苷类药物强300倍以上,能非常显著地降低乙肝病毒DNA水平，在组织学、病毒学、生化学等各项指标的改善上较拉米夫定等核苷类似物有明显优势。恩替卡韦可以凭着对乙肝病毒的高效抑制能力,将成为抗病毒药物中的新的一线用药[1]。近些年,口腔崩解片 (口崩片,orally disintegrating tablet)是一种新型口服固体制剂，在临床上有很多的应用,其优点为不需要饮水服用,在口腔中可快速崩解[2]。将恩替卡韦制成口崩片,能解决吞咽困难的老年人和小孩吃药问题。采用直压法,效应面图和等高线图优化处方,生产恩替卡韦口腔崩解片,并对其口腔崩解时间、体外溶出度进行了研究。

1 仪器与材料

DP30A单冲压片机(北京国药龙立科技有限公司)，ZS-2E振实仪(天津天大天发科技有限公司)，YD-2片剂硬度仪(天津市鑫洲科技有限公司)，TT-2000AE脆碎度检测仪(天津天大天发科技有限公司)，ZB-2E智能崩解仪(天津天大天发科技有限公司)，ZRS-8G智能溶出试验仪(天津天大天发科技有限公司) , 粒度检测仪(英国马尔文公司)，电子天平(梅特勒-托利多)，LC-2010AT高效液相色谱仪(岛津),KQ5200E超声波清洗器仪(昆山市超声仪器有限公司)，秒表(上海秒表厂)。恩替卡韦原料、对照品(江苏省药物研究所)，甘露醇( man,江苏正大丰海制药有限公司)，微晶纤维素(MCC PH101,安徽山河药用辅料股份有限公司)，交联羧甲基纤维素钠(Ac-Di-Sol美国 FMC公司)，苹果香精(泰兴市三华食品添加剂厂)，硬脂酸镁(上海药用辅料厂)。

2 方法

2.1恩替卡韦口腔崩解片的制备取处方量的恩替卡韦、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、甘露醇、苹果香精、硬脂酸镁,先将恩替卡韦、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠过60目筛混合，用等量递加法，Φ8 mm冲头压片,即得。

2.2崩解时间测定依照文献方法[2，3]自制了相应的实验装置(见图1)。连续测定6片均应符合规定。

图1 自制口腔崩解片崩解实验装置

2.3口腔崩解片溶出度考察

2.3.1检测波长的选择称取处方量的恩替卡韦原料药和辅料,放在50 ml量瓶中,用甲醇溶解，定容后用0.45 μm微孔滤膜过滤,在200～400 nm波长范围扫描。结果表明, 恩替卡韦原料在254 nm处有最大吸光度,在此处辅料无吸收。故254 nm定为检测波长。

2.3.2体外溶出度精密称取恩替卡韦对照品10.69 mg，置100 ml量瓶中，加溶出介质超声溶解并稀释至刻度，精密移取1.0 ml，置100 ml量瓶中，加溶出介质稀释至刻度，作为贮备液。分别精密量取1、3、5、7、9 ml置10 ml量瓶中，加溶出介质稀释至刻度，摇匀，照高效液相色谱法(《中国药典》2010版二部附录Ⅴ D)测定。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以水-乙腈(92∶8)为流动相，流速为1.0 ml/min，检测波长为254 nm，并以进样浓度(C)为横坐标，恩替卡韦的峰面积(A)为纵坐标进行线性回归,得回归方程为：A=2.9313×103+9.3159×105C(r=0.9999)，线性范围：0.1006～0.9005 μg/ml。照溶出度测定法(《中国药典》2010年版二部附录X C第二法)，以0.05 mol/L 磷酸二氢钾溶液(用1 mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为6.8)1000 ml为溶出介质，温度为(37±0.5) ℃，转速为50 r/min，依法操作，分别在2、4、6、8、10、15、20、30和45 min时，依照文献方法[2]绘制溶出曲线，口腔崩解片比普通片释药快速。见图2。

2.3.3含量均匀度取恩替卡韦口崩片10片,分别置50 ml量瓶中, 加入约80%的稀释剂[0.01 mol/L盐酸溶液：0.1 mol/L盐酸稀释10倍或浓盐酸(约12 mol/L)用纯水稀释(2.5→3000)], 超声30 min使溶解，放置室温，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，取溶液适量，在3000 r/min条件下离心10 min，取上清液，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取恩替卡韦对照品适量，精密称定，用稀释剂配制约10 μg/ml的溶液作为对照品溶液，照高效液相色谱法(《中国药典》2010版二部附录Ⅴ D)测定。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以水-乙腈-三氟乙酯(990∶10∶1)为流动相A，以水-乙腈-三氟乙酯(700∶300∶1)为流动相B，按表1进行线性梯度洗脱，流速为1.0 ml/min，检测波长为254 nm，柱温为30 ℃。计算方法参考文献[2],三批A+1.80S值分别为5.87、6.43和5.15，均符合《中国药典》规定。

图2 恩替卡韦口崩片与普通片的溶出比较 (n=6)

时间(min)流动相组成A(%)B(%)0．01～3．510003．5～21100～690～3121～2469～5131～4924～2751～049～10027～280～100100～028～351000

2.4处方筛选与优化依据文献方法[2],考察处方中MCC和Man的重量比、片剂的硬度、孔隙大小和交联羧甲基纤维素钠的用量,实验中对上述因素进行删选以判定最好处方和工艺。

2.4.1辅料对处方的流动性影响考察方法见参考文献[2],结果见表2。

2.4.2崩解剂用量的选择方法见参考文献[2],结果见图3。Ac-Di-Sol的最佳质量分数为10%，所以选择处方中的质量分数为10%。

表2 粉末流动性影响考察

图3 AcDiSol的使用量对崩解时间的影响(n=6)

2.4.3处方优化方法见相关文献[2]，分别作三维效应面图(图4)和等高线图(图5),考察孔隙大小和微晶纤维素/甘露醇值对口腔崩解时间的影响，处方优化见表3。结果显示，微晶纤维素/甘露醇值在0.70～0.90 (即处方M3、M4、M5)且孔隙大小在0.18～0.28内,均能使崩解时间取得理想效果(小于30 s)。

图4 口崩片崩解时间的三维效应面图(n=30)

表3 口腔崩解片处方 mg/片

2.4.4硬度范围的选择方法见文献[2]，结果见图6。由图6可知,硬度对孔隙大小的影响很大。各处方片剂的孔隙均随硬度的增大而减小,考察3个处方,硬度可选定为0.3～0.6 MPa。参考处方选择和硬度选择,采用M4处方进行优化,压片硬度定为0.4 MPa。

硬度/MPa

2.5确定处方工艺经处方筛选及优化，可确定最好处方：恩替卡韦 0.5 mg、微晶纤维素PH 101 77 mg,甘露醇97 mg、交联羧甲基纤维素钠 20 mg、苹果香精 5 mg、硬脂酸镁0.5 mg,按照“2.1”项下方法生产。取处方量500倍的恩替卡韦、微晶纤维素PH 101、甘露醇、交联羧甲基纤维素钠、苹果香精、硬脂酸镁依照“2.1”项下方法制备,并依法测定含量、崩解时间、溶出度,结果含量为97.4%，崩解时间为27.4 s，溶出度为98.6%，均符合规定,说明本处方和工艺是可行的。