叶酸干预小鼠卡马西平致畸作用的试验研究

郑丽娜，李云霞，阚淑娟

(河北省唐山市妇幼保健院，河北 唐山 063000)

卡马西平(CBZ)是临床常用的一线抗癫痫药物[1]，疗效确切，但对胎儿有一定的致畸危险性。国内外研究结果表明，CBZ可引起胎儿脊柱裂、尿道下裂及小头等畸形，其致畸性可能与其干扰叶酸代谢，使机体血清叶酸水平下降或缺乏有关[2]。本试验以小鼠为研究对象，观察CBZ的致畸作用及叶酸是否有拮抗其致畸的作用，为上述学说提供试验依据。

1 材料与方法

1．1 材料

卡马西平(上海复旦复华药业有限公司，批号为080116，规格为每片100 mg)，叶酸(北京北大药业有限公司，批号为S090528，规格为每片0．4 mg)，均用蒸馏水配制成所需浓度。SPF级昆明种小鼠，雌雄比例2∶1，雌性鼠体重(22±2)g，雄性鼠体重(23±3)g，均由北京华阜康生物科技股份有限公司实验动物中心提供，合格证号:SCXK(京)2009-0004。

1．2 方法

健康昆明种小鼠，分笼饲养。适应性饲养1周后，随机分为3组，每组30只，雌性20只，雄性10只。空白对照组:给予经口灌胃蒸馏水10 mL/(kg·d);卡马西平(CBZ)组:给予卡马西平66．7 mg/(kg·d)经口灌胃(给药剂量相当于成人等效剂量的10倍);卡马西平与叶酸联合用药(CBZ＋FA)组:上午卡马西平经口灌胃剂量同CBZ组，下午叶酸0．07 mg/(kg·d)经口灌胃(给药剂量相当于成人等效剂量的10倍)。上述各组小鼠于分组后次日，雌鼠开始经口灌胃各药物，直至妊娠结束。

1．3 观察指标

每日清晨定时检查雌鼠阴栓，以阴栓出现日为妊娠零天。检出阴道栓的雌鼠单笼饲养，并密切观察腹部增大情况、妊娠期体重，是否有流产、死胎、畸形及活胎数等指标。对未分娩者于妊娠第22天处死，检查子宫内胚胎数及其发育状况。

1．4 统计学处理

所有试验数据均采用Instat软件处理，结果以X±s表示，采用单因素方差分析，计数资料采用 χ2检验。

2 结果

结果见表1至表3。

表1 CBZ对孕鼠生殖能力的影响

表2 CBZ对胎鼠生长发育的影响

3 讨论

卡马西平对孕鼠生殖能力、胎鼠生长发育、畸形方面均有明显的影响，而叶酸能有效拮抗CBZ对孕鼠生殖能力及致胎鼠畸形的毒性作用，而对胎鼠体重的影响无明显拮抗作用。

癫痫妇女的妊娠问题受到广泛关注，绝大多数服用抗癫痫药物的孕妇能生育正常的后代，但孕期服药妇女后代的致畸率为未服药者的2～3倍，致叶酸缺乏是致畸的重要原因之一[3]。叶酸是由蝶啶、对氨基苯甲酸和谷氨酸组成的一种B族维生素，是细胞生长和分裂所必需的物质。妊娠期妇女叶酸摄入不足和低血清叶酸浓度会对妊娠期妇女及胎儿造成多种不良影响[4]。CBZ具有拮抗叶酸代谢的药理作用，诱导胚胎甲酰四氢叶酸水平下降，引起胚胎细胞分裂障碍，导致胚胎细胞分裂异常，发育畸形，及时补充足量叶酸可以促进胚胎生长、减少畸形[5]。妊娠期及时补充足量叶酸能有效地减小CBZ的毒性作用。由于存在种间差异，同一致畸物在不同物种和同一物种的不同品系动物的代谢过程有一定差异，不同物种动物胚胎构造也不尽相同[6]。因此，对小鼠的试验研究结果不能说明对人体的等同作用，需进一步深入研究和人群流行病学调查。

[1]冯惠平，吴佳滨，李碧峰，等．反相高效液相色谱法同时测定苯妥英钠、卡马西平的血药浓度[J]．中国药业，2008，17(7):54-55．

[2]Kishi T，Tujita N，Eguchi T，et al．Mechanism for reduction of serum folate by antiepileptic drugs during prolonges therapy[J]．J Neurol Sci，1997，145:109-112．

[3]林 玳．抗癫痫药物的几个安全性问题[J]．中国药业，2009，18(6):62-63．

[4]曾 艳，褚燕琦，王育琴．抗癫痫药致胎儿畸形的研究进展[J]．药物不良反应杂志，2007，9(5):305-310．

[5]赵 军．938例妊娠中期孕妇血清叶酸水平调查分析[J]．中国当代医药，2009，16(23):48．

[6]刘毓谷．卫生毒理学基础[M]．北京:人民卫生出版社，1997:53-81．