血清葡萄糖6-磷酸异构酶抗原、类风湿因子和第2代抗环瓜氨酸肽抗体对类风湿关节炎诊断价值的比较

吴庆军，潘　童，邓垂文，胡朝军，朱安礼，潘　峥，史艳萍，李永哲，曾小峰，唐福林

(中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院风湿免疫科，北京 100032)

ChinJAllergyClinImmunol,2013,7(2)：115-119

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种常见的以侵蚀性关节炎为主要特征的自身免疫性疾病。关节滑膜最先受累，继而累及关节软骨和软骨下骨质，最终因骨破坏及强直导致残疾，严重影响患者生活质量、缩短预期寿命。目前血清类风湿因子(rheumatoid factor，RF)和抗瓜氨酸化蛋白多肽抗体(anti-citrullinated proteinpolypeptide autoantibodies，ACPAs)阳性是RA分类标准和预后的不良因素[1]。ACPAs是一组抗体，以第2代抗环瓜氨酸肽(the second generation of anti-cyclic citrullinated peptide，抗CCP2)抗体在临床实践中应用最多。曾有试验研究了RF和不同ACPAs对RA的诊断价值，结果提示RF与抗CCP2抗体联合检测有利于RA的诊断[2-3]。自2001年Schaller等[4]首次报道葡萄糖6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase，GPI)抗原及抗GPI抗体与RA相关后，许多学者开始对这两种指标在RA中的诊断价值进行研究，然而结果不甚一致。本研究应用酶联免疫吸附法对北京协和医院风湿免疫科门诊就诊的126例RA患者和122例均存在不同程度的外周关节痛或关节炎的非RA患者的血清标本进行了GPI、RF和抗CCP2抗体检测，探讨GPI单独及联合检测对RA的诊断价值。

对象和方法

对象及分组

RA组：126例RA患者，其中男32例，女94例，平均年龄(47.7±12.6)岁，诊断均符合1987年美国风湿病协会(American College of Rheumatology, ACR)修订的诊断标准[5]或2010年标准[1]。

非RA组：122例，男37例，女85例，平均年龄(42.6±12.4)岁。其中，系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)10例、原发性干燥综合征(primary sjoegren’s syndrome, pSS)7例、结缔组织病(connective tissue disease, CTD)15例、强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)10例、银屑病关节炎(psoriatic arthritis, PsA)3例、(未分化)关节炎4例、痛风性关节炎(gouty arthritis, GA)7例、骨关节炎(osteoarthritis, OA)10例、关节痛40例、风湿性多肌痛(polymyalgia rheumatica, PMR)4例、系统性血管炎3例、原因未明发热6例和特发性肺间质病变3例。诊断均符合相应分类诊断标准。

所有患者均为2012年1月至5月北京协和医院风湿免疫科门诊患者。

检测方法

GPI抗原检测：上海北加生化试剂有限公司生产的双抗体夹心酶联免疫吸附法GPI试剂盒，操作参考说明书，以4个标准品(0.16、0.33、1.00、2.00 mgL)及试剂空白对照绘制标准曲线，并同时做阴性和阳性对照，检测结果≥0.20 mgL为阳性。

RF检测：速率散射比浊法，试剂及标准品均由美国贝克曼公司提供，结果≥15 Uml为阳性。

抗CCP2抗体检测：试剂盒由欧洲诊断试剂公司提供，应用酶联免疫吸附法，依照说明书操作。结果判断使用标准曲线，5个标准物的浓度分别为3 200、800、200、50和25 Uml；同时做阴性和阳性对照，患者血清1∶50稀释，结果≥25 RUml为阳性。

统计学处理

采用SPSS17.0统计软件进行分析，计数资料比较应用卡方检验，计量资料比较应用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

结　　果

平均血清水平

RA组与非RA组患者血清GPI、RF和抗CCP2抗体的平均水平分别为(0.28±0.65) mgL与(0.07±0.36) mgL、(400.38±919.10) Uml与(17.69±96.04) Uml、(778.05±1012.02) RUml与(4.26±27.15) RUml，3项指标两组间的差异均有极显著统计学意义(均P<0.005)。

阳性分布

126例RA组患者GPI、RF和抗CCP2抗体的阳性例数分别为41例(32.5%)、87例(69%)和91例(72.2%)。122例非RA组患者GPI阳性13例(10.7%)，其中关节痛4例，CTD3例，GA2例，SLE、SS、系统性血管炎和原因未明发热各1例；RF阳性15例(12.3%)，其中关节痛5例，CTD3例，SLE和系统性血管炎各2例，SS、AS和特发性肺间质病变各1例；抗CCP2抗体阳性6例(4.9%)，其中SS2例，CTD、PMR、GA和关节痛各1例。GPI、RF和抗CCP2抗体在RA组患者中的阳性率均高于非RA组，差异均有极显著统计学意义(均P<0.001)。

GPI、RF和抗CCP2抗体对RA的诊断价值

GPI、RF和抗CCP2抗体对RA的诊断敏感性分别为32.5%、69.0%和72.2%，GPI与RF、GPI与抗CCP2抗体对RA的诊断敏感性比较，差异均有极显著统计学意义(均P<0.001)。GPI、RF和抗CCP2抗体对RA的诊断特异性分别为89.3%、87.7%和95.1%，RF对RA的诊断特异性低于抗CCP2抗体，差异有显著统计学意义(P<0.05)，而GPI与RF、GPI与抗CCP2抗体对RA的诊断特异性差异均无显著统计学意义(均P>0.05)(表1)。

表1　血清GPI、RF和抗CCP2抗体，以及不同组合对RA的诊断价值

GPI：6-磷酸葡萄糖异构酶；RF：类风湿因子；抗CCP2抗体：第2代抗环瓜氨酸肽抗体；RA：类风湿关节炎；*与抗CCP2抗体的诊断敏感性比较，P<0.05；#与抗CCP2抗体的诊断特异性比较，P<0.05

GPI、RF和抗CCP2抗体联合检测，GPI及RF同时阳性、GPI及抗CCP2抗体同时阳性及三者同时阳性对RA的诊断敏感性均不足30%，均低于单独检测抗CCP2抗体的诊断敏感性，差异有极显著统计学意义(均P<0.001)；对RA的诊断特异性则与抗CCP2抗体相当，差异无显著统计学意义(均P>0.05)。GPI或RF、GPI或抗CCP2抗体、RF或抗CCP2抗体、GPI或RF或抗CCP2抗体不同组合任一结果阳性时，对RA的诊断敏感性分别为73.8%、78.6%、77.0%和81.0%，与单独应用抗CCP2抗体对RA诊断敏感性比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)；上述组合对RA的诊断特异性均不足90%，低于单独应用抗CCP2抗体检测的诊断特异性，差异均有显著统计学意义(均P<0.05)(表1)。

讨　　论

RF和ACPAs(主要是抗CCP2抗体)是RA(早期)诊断、判断预后和指导治疗的重要血清学指标[1-3]。一项荟萃分析表明，抗CCP2抗体对RA的诊断特异性高于RF，其能更好地预测侵蚀性病变[6]。本研究中抗CCP2抗体对RA的诊断特异性也高于RF，且差异有统计学意义，与上述研究相似。

2001年Schaller等[4]在RA患者血浆和关节滑液中检测到高滴度的抗GPI抗体及GPI抗原。此后，GPI抗原、抗GPI抗体与RA相关性进行了广泛研究，血清GPI抗原对RA诊断价值方面的研究结果差异很大，诊断敏感性为38%～89.7%，诊断特异性为71.6%～97.9%。纵观国内较大样本的研究结果[7-32]，一些研究结果提示GPI对RA诊断有较高的特异性，但敏感性较低[7-8,11-12,27]；部分研究结果提示GPI对RA的诊断敏感性较高，但特异性不足90%[16,18-23,31]；大多数研究结果则表明GPI对RA有很高的诊断价值，敏感性(>65%)和特异性(≥90%)均较高[9-10,13-15,17,24-26,28-30,32]。上述研究结果差异较大的原因可能包括：(1)选取的研究对象不同，研究表明血清GPI与RA疾病活动度密切相关[7,11,17-18,26,28-30]，纳入活动期RA患者会提高GPI的诊断敏感性，增加健康对照有利于提高诊断特异性；(2)检测方法和结果判定标准不同。陈捷等[33]对1990至2007年相关文献进行了荟萃分析，纳入的15个研究对GPI检测异质性较大，合并诊断敏感性为38%，合并特异性为87%；5个使用相同标准品的研究合并诊断敏感性为25%，合并特异性为80%；提示GPI在RA诊断中的特异性较高而敏感性较差，建议与高敏感性的其他标志物联合检测。本研究中血清GPI对RA的诊断敏感性为32.5%，诊断特异性为89.3%，与上述荟萃分析结果一致。

本研究还对血清GPI、RF和抗CCP2抗体对RA的诊断意义进行了比较，GPI对RA的诊断敏感性仅为32.5%，低于RF(69%)和抗CCP2抗体(72.2%)，差异有显著统计学意义。联合检测血清GPI、RF和抗CCP2抗体，若包含GPI的2种或3种均阳性时，与单纯抗CCP2抗体阳性比较，诊断敏感性显著降低而特异性无显著提高；若包含GPI的2种或3种任一阳性时，与单纯抗CCP2抗体阳性比较，诊断敏感性无显著提高而特异性则显著降低。这与文献提示GPI抗原和抗CCP抗体均是RA高敏感且高特异性血清学指标不一致[9-10,15,17,25,29-30,32]。

总之，本研究结果提示血清GPI对RA的诊断特异性较高，但敏感性低；单一或与RF、抗CCP2抗体联合检测对RA的诊断价值，均不优于抗CCP2抗体。临床实践中血清GPI对RA诊断与鉴别诊断的价值需要进行统一标准、大样本、多中心、研究对象充分平衡的研究进一步明确。

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