快速生物监测仪在高压蒸汽灭菌效果监测中的应用

叶称梅，华春燕（广东省英德市人民医院供应室，广东 英德 513000）

生物监测是一种可靠的监测方法，是衡量灭菌质量的金标准，但传统的生物监测手段需要进行细菌培养48 h才能出测试结果，特别是在植入物零风险管理应用上显得时效性很差。2010年12月购置了一台3M公司生产的快速培养自动阅读器，并立即投入使用。对所有灭菌物品除进行1次/周常规传统生物监测外，对植入性手术器械，植入物，外租手术器械进行每包每锅次快速生物监测，自2010年12月～2012年5月开展253例次植入物及外租器械快速生物监测，全部合格，临床没有与植入物及灭菌后的无菌物品相关的感染报导。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：自2010年12月～2012年5月开展253例次植入物及外租器械快速生物监测，应用快速生物监测的同时，每周同时在同一标准包中放入传统的生物监测指示剂进行生物监测1次，对2台山东新华医疗器械有限公司生产的XG1.D型脉动真空压力蒸汽灭菌器进行传统生物监测分别为130次及123次。监测材料选用3M公司的3MTMAttestTM290快速生物培养监测/自动阅读器及配套使用的3MTMAttseTM1292快速生物指示剂（嗜热脂肪杆菌芽孢菌片）。灭菌器械是山东新华医疗器械有限公司生产的XG1.D型脉动真空压力蒸汽灭菌器2台，设定蒸汽压力0.21 MPa、灭菌温度132℃、脉动真空3次、灭菌时间10 min，测试包采用标准测试包。

1.2 监测方法

1.2.1 操作要求：具备医院消毒员资格，持有高压灭菌器操作上岗证，经过3M快速生物监测培养/自动阅读器知识培训。

1.2.2 标准测试包制作与器械包准备：取16条已洗涤的棉布巾（40 cm×65 cm），长边折三折，然后对折，最后将折好的棉布巾叠放在一起（折叠边左右摆放），制成15 cm×23 cm×23 cm的标准测试包，将嗜热脂肪芽孢菌片小试管及第五类化学指示卡置于标准包的中心。为了证实该锅的可靠性，在快速生物监测的同时，每周在同一标准包中放入传统的生物监测指示剂进行生物监测1次，嗜热脂肪杆菌芽胞菌片用小试管装好，芽胞菌片含量为（5×105～5×106）cfu/片，两种生物指示剂放于标准包的中央。测试包放在排气口上方的灭菌筐内。尽量将植入物或外来器械放于灭菌器上层，装载时为便于蒸汽穿透，物品不得超过柜室容积的90%或＜5%。包与包之间需相隔2.5 cm，最上层灭菌包距柜室顶部至少7.5 cm。

1.2.3 快速生物监测自动培养/阅读器准备：检查快速生物监测培养/自动阅读器性能是否良好，设置参数，并提前预热半小时。

1.2.4 培养操作：待灭菌周期结束后，取出标准包内菌片试管。戴好护目眼镜、手套，按压关闭生物指示剂帽，在压碎孔挤破含培养基的小试管，捏住指示剂帽端，在桌面上轻敲试管的底部，使培养基湿润在试管底部的芽孢片，轻轻摇混匀，再将生物指示剂放进合适的培养/阅读孔，同时设同一批次未经灭菌的嗜热脂肪杆菌芽孢片试管为阳性对照管，插入对照培养/阅读孔，关闭自动阅读器孔盖，等待绿色或红色指示灯来显示结果。放入培养/阅读孔后不要移动地方，如果不小心取出生物指示剂，必须在10 s内放回原位，否则会导致监测结果丢失。传统的生物监测嗜热脂肪杆菌芽胞菌片，送检验科在无菌操作下从试管中取出并移种菌片溴甲酚紫蛋白胨培养液中，使培养基与菌片混合在一起，置于56℃恒温箱内培养48 h，同时接种阴性和阳性对照，观察结果。

1.2.5 结果读取：快速生物监测经3 h培养，自动培养/阅读器显示灭菌后试管为“绿色”阴性，对照管显示“红灯”为阳性。传统的生物监测在48 h后观察结果，判断培养管内培养基不变色为无菌生长，培养基由紫色变为黄色时则灭菌失败，灭菌处理后菌片和阴性对照培养全部无菌生长，阳性对照有菌生长，即可判定为灭菌合格。

1.2.6 记录：植入物放行实施可追溯管理，可提高医院无菌保证水平和实施植入物零风险[1]。根据WS/310.3-2009规范要求，我院消毒供应室设计了快速生物监测记录本，内容包括手术器械名称，包内器械总件数、植入物数量、生产厂家及外租器械厂家名、灭菌器炉号、炉次、灭菌温度、压力、时间、灭菌日期、失效日期、灭菌操作者及核对者姓名、快速生物监测结果阴性标签、对照管阳性标签、第五类化学指示卡。监测完成后由观察者记录生物监测结果，张贴生物监测标签及化学指示卡，观察者及核对者签名，实行双人签名负责制。传统的生物监测结果由检验科医生监测，发放检验结果报告。每批次生物监测均归档留存，并保存B-D试验结果、灭菌过程记录、批量监测、化学监测，资料留存3年，一旦发生植入物术后感染可进行无过错举证[2]。

2 结果

253例次植入物及外租器械快速生物监测，全部合格，临床没有与植入物及灭菌后的无菌物品相关的感染报导。253管做对照的末经灭菌的快速生物指示剂均为阳性。经灭菌后的快速生物指示剂在培养3 h后即变为紫色，253次监测结果与传统培养48 h监测结果相一致。

3 小结

传统的生物监测是将生物指示剂经过一个灭菌周期，在无菌操作下从试管中取出并移种菌片溴甲酚紫蛋白胨培养液中，使培养基与菌片混合在一起，置于56℃恒温箱内培养48 h，方可人工对比判断结果。快速生物监测指示剂与传统方法相比，具有操作简单、方便，并不需无菌移种和无菌配制培养基，可避免假阳性结果，准确性高，监测效果理想，结果可靠，所需时间短，与传统生物监测方式相比，缩短了检测等待报告时间45 h，能够做到即时监测。它的使用意义在于出现不合格产品可以在4 h内召回，查找原因重新灭菌，确保灭菌物品使用安全，进而达到减少和控制感染的发生，为外科植入性手术急诊手术器械的安全使用提供更有利保障，值得推广应用。

[1] 李丽华,杜秋焕,王江滨,等.可追溯管理在消毒灭菌物品管理中的应用[J].中华感染学杂志,2009,19(7)：802.

[2] 赵香玉,邸 欣,生晶辉,等.骨科植入物器械在消毒供应室的安全管理[J].中华感染学杂志,2010,20(17)：2648.