CD10蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义

粟连秀 张兆明

（广西医科大学第八附属医院 广西贵港 537100）

结直肠癌是人类常见的消化道恶性肿瘤，其发病率及死亡率在逐年上升。CD10是一种细胞表面锌依赖性金属蛋白酶，它在多种正常细胞、肿瘤细胞及一些肿瘤组织的间质细胞中表达，调控着肿瘤的浸润转移［1、2］。本研究采用免疫组织化学的方法检测CD10蛋白在结直肠癌中的表达，探讨其表达与结直肠癌的发生及其与各临床病理因素间的关系。

1 材料和方法

1.1 一般资料 收集我院病理科2010年1月至2012年12月手术切除的结直肠癌标本80例，男56例，女24例。患者年龄28～81岁，平均年龄56.4岁。其中结肠癌48例，直肠癌32例；按Dukes分期：A期14例，B期18例，C期28例，D期20例；按肿瘤的分化程度：高中分化腺癌62例，低分化腺癌18例；有脉管侵犯者24例，无脉管侵犯者56例；肿瘤浸透浆膜者66例，未浸透浆膜者14例；有淋巴结转移者48例，无淋巴结转移者32例。以同期结肠癌根治术标本中远离癌的正常结肠黏膜50例作为对照组。所有标本均经病理证实，术前均未行放、化疗。

1.2 主要试剂 鼠抗人CD10单克隆抗体、即用型快捷免疫组化MaxVisionTM试剂盒及DAB显色剂均为福州迈新生物技术公司产品。

1.3 方法 采用快捷免疫组化MaxVisionTM法。严格按照产品的操作说明。具体染色步骤：①石蜡切片脱蜡和水化后，用PBS（PH7.4）冲洗3次，每次3min。②高温高压抗原修复。③3%H2O2室温下孵育10min，以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3次，每次3min，除去PBS液。④分别滴加CD10一抗工作液，室温下孵育60min。⑤PBS冲洗3次，每次5min，除去PBS液，每张切片加1滴即用型 MaxVisionTM试剂，室温下孵育15min。PBS冲洗3次，每次3min。⑥除去PBS液，每张切片加2滴新鲜配制的DAB溶液，显微镜下观察5 min。⑦自来水冲洗，苏木素复染，自来水冲洗返蓝，梯度酒精脱水干燥，中性树胶封固。用已知子宫内膜间质细胞CD10阳性的组织切片做阳性对照，以PBS代替-抗做阴性对照。

1.4 结果判断 CD10蛋白免疫染色阳性物质呈棕黄色颗粒，在细胞质和细胞膜上着色。染色结果判定：按阳性细胞数＞5%为阳性表达。

1.5 统计学分析 用SPSS13.0统计软件包进行分析，各组之间率的比较采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 CD10蛋白表达情况 在正常结肠黏膜组织和结直肠癌组织中，CD10蛋白阳性率分别为0（0／50）和30.0%（24／80）。CD10蛋白在结直肠癌组织中的阳性率与正常结肠黏膜组相比，差异有统计学意义（P＜0.01）。

2.2 CD10蛋白的表达与结直肠癌临床病理特征的关系 结直肠癌组织中CD10蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤部位无关（P＞0.05），而与肿瘤细胞的分化程度、脉管侵犯、浸润深度、临床分期及有无淋巴结转移有关（P＜0.05）。见表1。

表1 CD10蛋白表达与结直肠癌临床病理特征的关系

3 讨 论

CD10是金属蛋白酶家族中的一员，是一种细胞表面锌依赖性金属蛋白酶，相对分子量为100kD左右，在细胞膜上发挥生物学作用。CD10常常作为急性白血病和非霍奇金淋巴瘤分类中的诊断指标之一［3］。CD10蛋白广泛表达于人类多种细胞，如前淋巴细胞、中性粒细胞、肌上皮细胞、肾小管上皮细胞、正常骨髓及子宫内膜间质细胞等。CD10蛋白结构与MMP的间质溶解素相似，肿瘤细胞产生可溶性因子诱导间质细胞分泌CD10，来促进肿瘤细胞的增殖［4］。周春辉［5］等采用原位杂交技术和体外细胞培养的方法研究CD10在胰腺癌中的表达，研究发现CD10mRNA表达与胰腺癌组织学分级及淋巴结转移存在密切关系，提示CD10在胰腺癌的发展、转移及预后中有重要作用。白冬雨［6］等研究发现CD10在乳腺UDH及ADH肌上皮中呈中重度阳性着色；在DCIS中呈轻中度阳性着色，较ADH表达水平明显降低；而在IDC中，癌巢周围未见明显的CD10着色，提示CD10对鉴别ADH和DCIS，DCIS和IDC具有一定意义，联合运用P63和calponin可以提高乳腺良恶性疾病的鉴别诊断。李守宾［7］等研究发现CD10在正常膀胱黏膜中不表达，在膀胱癌组织中高表达，而且在高级别、临床分期晚及淋巴结转移的癌组织中表达率明显升高，且差异有统计学意义。

本实验研究对正常结肠黏膜组织及结直肠癌组织进行CD10蛋白的检测，结果显示：在正常结肠黏膜组织中CD10蛋白不表达，在结直肠癌组织中存在CD10蛋白的高表达，二者差异具有统计学意义（P＜0.01），提示CD10蛋白在结直肠癌间质细胞的过度表达可能与结直肠癌的发生有关。研究结果还显示：结直肠癌中CD10蛋白的表达与患者性别、年龄、肿瘤部位无关，而与肿瘤细胞的临床分期、分化程度、浸润深度、脉管侵犯及有无淋巴结转移有关，随着肿瘤细胞分化程度下降，CD10蛋白表达升高；已浸透浆膜组织中CD10蛋白阳性率明显高于未浸透浆膜者；有脉管侵犯病例CD10蛋白阳性率明显高于无脉管侵犯病例；有淋巴结转移病例CD10蛋白阳性率明显高于无淋巴结转移病例，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。本研究提示结直肠癌组织中CD10蛋白阳性可促进结直肠癌细胞的浸润转移，CD10蛋白可以作为结直肠癌患者预后的参考指标。

［1］Chu P，Arber DA.Paraffin-section detection of CD10 in 505nonhemat opoietic neoplasms.Frequent expression in renal cell carcinoma and endometrial stromal sarcoma［J］.Am J Clin Pathol，2000，113（3）：374-382.

［2］Avery AK，Beckstead J，Renshaw AA，et al.Use of ant ibodies to RCC and CD10in the differential diagnosis of renal neoplasms［J］.Am J Surg Pathol，2000，24（2）：203-210.

［3］Greaves MF，HaririG，Newman RA，et al.Selective expression of the common acute lymphoblastic leukemia（gp100）antigen on immature lymphoid cells and their malignant counterparts［J］.Blood，1983，61（4）：628-639.

［4］Basset P，Wolf C，Rouyer N，et al.Stromelysin-3in stromal tissue as a control factor in breastcancer behavior［J］.Cancer，1994，74（3）：1045-1049.

［5］周春辉，黄世章.胰腺癌细胞中CD10mRNA的表达与肿瘤恶性程度及转移的关系［J］.广东医学，2011，32（12）：1555-1557.

［6］白冬雨，陈云新，杨秀红.CD10，p63及calponin在乳腺良恶性病变鉴别诊断中的意义［J］.中国普通外科杂志，2011，20（11）：1212-1215.

［7］李守宾，刘俊江，李连印，等.CD10在膀胱移行细胞癌中的表达及意义［J］.中国煤炭工业医学杂志，2010，13（5）：728-729.