生活饮用水细菌总数检测不确定度评估报告

王悦，郑琳琳，佟永薇，王人悦

（1.谱尼测试科技（天津）有限公司，天津300100；2.天津市食品研究有限公司，天津301609）

生活饮用水中细菌总数一直是备受公众关注的指标，是影响人们身体健康和生活品质的重要方面，本研究对饮用水中的菌落总数进行了不确定度分析，以期找出影响测量结果不确定度的各种因素，进行逐项分析及评定，为评定测量结果质量提供依据。

1 材料与方法

1.1 仪器和试剂

测定仪器：DHP-600S 电热恒温培养箱：天津中环试验电炉有限公司。

试剂：氯化钠（分析纯）；营养琼脂（BR）。

1.2 检测方法

检验依据：GB/T 5750.12—2006《生活饮用水标准检测方法微生物指标》[1]。

1.3 样品的制备

以无菌操作取样品原液及充分混匀后经10 倍和100 倍稀释的稀释液作检测，每个稀释度做2 个平衡样，各取生活饮用水原液及稀释液1 mL，分别注入平皿中，立即倾注15 mL～20 mL 冷却到45 ℃～50 ℃的营养琼脂培养基，旋转平板，将培养基与样液充分混合，待琼脂凝固后，翻转平皿，置36 ℃的培养箱中培养48 h，并做平行样。计数菌落总数并报告。

2 结果与讨论

2.1 数学模型

由于测量结果具有发散性，与之相比其他不确定度来源均可以忽略不计[2]，仅考虑由测量结果散发引入的不确定度分量。此次检测数学模型可以简单地写为：

设菌落总数为A，检测结果为X，则A=X cfu/mL

2.2 原因分析

在微生物检验中，样品中细菌分布的均匀性和重复测量带来的不确定度是影响检验结果准确度的主要原因[3]。而B 类不确定度分量对合成不确定度影响较少。按GB/T 5750.12-2006《生活饮用水标准检测方法微生物指标中细菌总数测定》中方法，同一样品每个稀释度做两个平行样，因此可采用合并样本标准差来求得检测结果的不确定度，见表1。

从检验结果可知，根据贝赛尔公式计算检测结果对数值的合并样品标准差：

P 代表平均值；n 为测定次数。

表1 实验室检测结果记录Table 1 Laboratory test results recorded

2.3 扩展不确定度评定

扩展不确定度为：u=kuc，取置信水平p=95%，自由度为19，查t 表分布得：t95（19）=2.093，故u=2.093×0.016 2=0.033 9。

3 测量不确定度报告

X 为测试结果，X1，X2为重复测试的结果，所以在95%置信水平，此测试方法之不确定度为0.033 9。当检查结果以平衡样结果取对数值的平均值表示时，其取值区间分布于X±0.033 9 之间。当检测结果以平衡样结果平均值表示时，相对于对数值的取值再取反对数得其取值区间。这个取值区间适合于任何一次检测。

4 结论

通过对饮用水中菌落总数含量的不确定度来源进行分析，并对其不确定度分量进行评定，得出该分析方法的相对扩展不确定度为0.033 9，其取值区间分布于X±0.033 9 之间。因此，在测定时，必须严格控制试验条件，在测试样品时，必须严格按照操作规范，并且使用合格的计量器具，尽量减小测量结果的不确定度，保证检测结果的质量。

[1] 食品卫生检验方法编委会.GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法微生物指标[S].北京:中国标准出版社,2003:89-92

[2] 张涛,赵明.食物成分表[J].北京大学学报:食品科学版,1999,35(1):101-106

[3] 国家质量监督检验检疫总局.JJF 1059—1999 测量不确定度评定与表示[S].北京:中国计量出版社,1999:1-31