熟地黄多糖提取技术及药理作用研究进展

张副兴 裘生梁 祝雨田 浙江中医药大学 杭州 310053

陈培丰 浙江省中医院肿瘤科

地黄始见于《神农本草经》，为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch的新鲜或干燥块根，临床分鲜地黄、生地黄、熟地黄三种。熟地黄具有补血滋阴、填精益髓之功效，治疗血虚、肝肾阴虚诸症。熟地黄多糖是熟地黄的主要作用成分，作为一类重要的天然大分子化合物，具有增强免疫、抗氧化、抗突变等多种作用，对此国内学者进行了深入的研究，现就熟地黄多糖的研究进展综述如下。

1 提取技术

1.1 水提醇沉法 崔瑛等[1]用正交实验法，以加水量、提取时间、提取次数作为三个因素，以干膏收率和多糖含量为指标，采用单因素实验，筛选醇沉浓度和氯化钙脱蛋白最佳浓度。结果发现各因素对多糖含量和收膏率综合评分并没有显著性影响，醇沉浓度以80%最优，氯化钙脱蛋白最佳浓度为7%。熟地黄粗多糖最佳提取工艺为加8倍量水，提取2次，每次4h。

1.2 超声波提取法 林春燕等[2]探讨熟地黄的水溶性多糖超声提取的最佳工艺条件，采用正交设计优化，以多糖得率和多糖含量为指标，考察料液比、提取时间、提取温度、提取次数及其交互作用对多糖提取的影响。以葡萄糖做标准曲线，测定水溶性熟地黄多糖含量。得出熟地黄的水溶性多糖最佳提取工艺条件为:以蒸馏水为提取溶剂，提取时间60min，料液比为1：30，提取温度为60℃，提取3次。该法工艺简单，提取效率高，适合提取熟地黄中水溶性多糖。

1.3 超声波提取法与加热提取法比较 陈传福等[3]研究在不同的实验条件下，对超声波和加热提取法进行比较，结果表明前者有较高的提取效率。在超声波作用下，熟地黄粉碎的粒度为40目，最佳提取条件为：料液比=1g:56mL，提取温度64.5℃，提取时间3.1min。实验重复性较好。

1.4 微波提取法 陈韩英等[4]采用微波法提取、硫酸-苯酚法测定熟地黄中多糖的含量，测得熟地黄多糖含量为9.27%，称微波法提取熟地黄中的多糖，时间短，提取率高。

2 药理作用

2.1 增强机体造血 黄霞等[5]观察熟地黄水煎剂（RGD）、熟地黄多糖（RGP）、熟地黄非多糖（RGNP）对小鼠外周血象的影响，发现熟地黄多糖为其补血作用有效部位。进一步观察熟地黄多糖对模型小鼠外周血象、骨髓造血干细胞、骨髓有核细胞的影响。发现熟地黄多糖对不同血虚模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞下降均有拮抗作用，对小鼠造血干细胞具有促进增殖、分化作用[6]。

苗明三等[7]以放血与环磷酰胺并用所致血虚模型大鼠为研究对象，探讨怀熟地黄多糖补血作用机制，发现怀熟地黄多糖可显著提高此血虚模型大鼠的血象，提高模型大鼠血白介素-2（IL-2）、白介素-6（IL-6）、促红细胞生成素（EPO）的水平。

2.2 增强机体的免疫力 黄霞等[8]用熟地黄多糖灌服小鼠，可促进小鼠血清溶血素的生成，明显增强小鼠2，4-二硝基氯苯（DNCB）诱导的迟发型超敏反应，提高小鼠巨噬细胞吞噬指数，而对吞噬系数无明显影响，说明熟地黄多糖具有提高小鼠免疫功能的作用。

李发胜等[9]分别用绵羊红细胞（SRBC）和卵清蛋白为抗原注射小鼠后，将熟地黄多糖分为3个剂量灌服小鼠7天加强免疫，结果显示中剂量实验组小鼠SRBC抗体水平、卵清蛋白抗体、IL-2激发水平显著高于对照组，显示熟地黄多糖对小鼠机体免疫有增强作用。

2.3 抗氧化作用 苗明三等[10]应用D-半乳糖复制小鼠衰老模型，观察（怀）熟地黄多糖的抗氧化作用，结果发现（怀）熟地黄多糖能显著提高该模型小鼠血超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活力，降低血浆、脑匀浆及肝匀浆过氧化脂（LPO）水平，显示熟地黄多糖有较好的抗氧化作用。

2.4 抗突变作用 梁颖等[11]采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、骨髓细胞染色体畸变试验、骨髓细胞姐妹染色单体交换试验方法评价熟地黄多糖的抗突变作用，结果发现熟地黄多糖对环磷酰胺诱导的小鼠微核率、染色体畸变率、姐妹染色单体交换率具有抑制作用，说明熟地黄多糖具有抗突变活性，并推测熟地黄多糖可以通过抵抗诱变剂对染色体造成的损伤，达到对机体遗传物质的保护作用，避免突变发生，最终起到抗肿瘤作用。

2.5 中枢抑制作用 崔豪等[12]在研究熟地黄及其多糖的中枢抑制作用时，发现熟地黄煎液、熟地黄多糖均能抑制小鼠的自发活动；缩短阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠潜伏期，延长睡眠时间；延缓异烟肼所致惊厥的发作潜伏期，减少动物死亡数。说明熟地黄煎液、熟地黄多糖对中枢神经系统具有抑制作用。

2.6 逆转肿瘤多药耐药 沈朋等[13]研究四物合剂逆转人红白血病细胞株K562/ADM多药耐药作用的药效活性组分时，发现熟地黄粗多糖对K562/ADM的耐药性有明显的逆转作用，其逆转倍数与对照组（无逆转剂）相比有显著差异，并且与主要活性部位的逆转作用无明显差异。说明熟地黄粗多糖能逆转K562/ADM细胞的多药耐药性，是四物合剂逆转K562/ADM多药耐药性的主要活性组分之一。

3 临床研究

赵小娟等[14]用小剂量环孢素A及熟地黄多糖口服液联合康力龙治疗慢性再生障碍性贫血，发现治疗组疗效好于对照组，并有显著性差异，治疗中未发现熟地黄多糖有任何毒副作用。

许颖富等[15]观察熟地黄多糖口服液对化疗药物致外周血象的影响，将48例患者随机分为熟地黄多糖口服液治疗组及对照组，分别在化疗期14天内每周查血象一次，结果显示RGP可对抗临床化疗时白细胞下降，对骨髓有明显保护作用。

刘超等[16]应用熟地黄多糖口服液治疗中晚期食道癌化疗损伤30例，并与贞芪扶正冲剂治疗15例比较，对外周血象的保护作用治疗组优于对照组。提示熟地黄多糖口服液对中晚期食道癌化疗损伤具有一定的防护作用，对骨髓造血系统有明显保护作用。

4 问题与展望

综上所述，熟地黄多糖的提取技术逐渐完善。经研究，其功能较多，能够治疗多种疾病，应用前景十分广阔。但现有研究对熟地黄多糖的提取与纯化工艺、药理活性与毒性、活性成分、分子结构等研究尚不够深入。如能进一步深入研究，解决以上诸多问题，一定有更开阔的开发和应用前景，带来更好的经济和社会效益。

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［3］陈传福，张培正.两种不同提取熟地黄多糖工艺研究［J］.中国食物与营养，2008，（11）:42-44.

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［5］黄霞，庆慧，王惠森，等.熟地水煎剂及其提取物对小鼠外周血象影响的比较研究［J］.中成药，2002，24（2）:111-113.

［6］黄霞，刘杰，刘惠霞.熟地黄多糖对血虚模型小鼠的影响［J］.中国中药杂志，2004，29（12）:1168-1170.

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