菌尿对尿液分析仪测定尿红细胞的影响

郭瑞莹

郑州大学第三附属医院检验科，河南郑州450000

泌尿系疾病、特别是肾病诊断的诊断，尿红细胞检测是重要实验指标之一。评价肾脏浓缩稀释功能，用尿液渗透压的测定方法相对较准确，但这种方法测定不仅需要特殊的仪器，而且操作起来十分繁琐。一般情况下，检测尿液有形成分多是采取显微镜尿沉渣检查，自动尿液沉渣分析仪的出现，方便了尿常规的过筛检测，不但检测速度快，使人为的误差减小，相对安全，而且具有高精密度，同时，在实际检测过程中，菌尿在对尿液分析仪检测法和人工镜检法的结果不一致，引发尿路感染的细菌可能影响到尿红细胞的测定，本实验通过两种检测仪器和方法，采用不同的菌株分析研究。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本来源 菌尿：患者因在医院泌尿系和门诊感染而住院中，用无菌的操作原则，采集患者的新鲜正常的晨尿液标本1120份；非菌尿：同样用无菌的操作原则，随机收集非泌尿系感染患者的新鲜正常晨尿液标本1120份，经过筛查，全部为阴性。用UF－1000全自动尿沉渣分析仪采用120份样本；IQ-200全自动尿液分析仪采用1000份样本。将相对浓度、不同种类的细菌，加入到这些结果正常的部分尿液标本中，使之达到105-106个／mL细菌总数，并与不加细菌的尿液做比较。

1.1.2 试验器材UF－1000全自动尿沉渣分析仪及其配套试剂、IQ-200全自动尿液分析仪及配套试剂；显微镜、改良血细胞计数板。

2 UF－1000全自动尿沉渣分析仪的方法

1.2 方法

1.2.1 菌株 大肠杆菌（大肠埃希菌）、绿脓杆菌（铜绿假单胞菌）、金葡菌（金黄色葡萄球菌）为质控菌株 ，尿红细胞的测定：取10 mL尿液，把尿液混合均匀，依照UF－1000的说明书进行严格的操作，把试验的结果记录下来，同时把尿液用一次性滴管滴入到一次性的尿板中，10大方格的红细胞数采用显微镜计数，以红细胞平均数／μL报告，试验必须在2 h内完成。

1.2.2 尿潜血的测定 把尿液混合均匀，取4～5滴后直接滴入潜血板反应孔内，需在5 min内完成并观察结果。

1.2.3 统计处理 数据统计选用SPSS 17.0统计学软件包，t检验进行计量资料，采用χ2检验处理计数资料，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

对尿红细胞的测定，不同菌尿有不同的结果，绿脓杆菌影响最大，金葡菌影响最小，大肠杆菌比金葡菌影响较大一些，见下表1。

表1 不同各类菌尿对尿红细胞测定结果的影响

以镜检法作为标准，UF－1000检测尿红细胞比较菌尿组假阳性率高于非菌尿组，两组差异有统计学意义（P＜0．01），见表2。

表2 以镜检法为标准UF－1000检测尿红细胞假阳性率（%）

3 IQ-200全自动尿液分析仪方法

3.1 方法

3.1.1 菌株 大肠杆菌（大肠埃希菌）、绿脓杆菌（铜绿假单胞菌）、金葡菌（金黄色葡萄球菌）为质控菌株。

3.1.2 红细胞尿液的配制 尿液分200份一组，共分为4组，将留取的尿液标本混合，以5mL/管分装试管。取门诊血常规标本，根据测出的红细胞数进行稀释，以50～150/μL的浓度滴入到分装好的尿液标本中。

3.1.3 菌尿的配制 首先计数标准菌株，再把细菌加入到尿液中，使粪肠球菌、金葡菌、大肠杆菌的浓度分别为104、105、106、107cfu/mL， 白色念珠菌浓度分别为10×104、8.5×104、7×104、6.5×104cfu/mL。

3.1.6 统计学处理使用SPSS 12.0统计软件包进行分析，所有数据均以（±s）表示，显著性检验采用方差分析检验、配对t检验。

3.2 结果

白色念珠菌对IQ-200分析仪检测红细胞的影响明显，白念珠菌的浓度在6.5×104红细胞与明显差异；放置一定时间后，霉菌大部分孢子长出菌丝，可以被IQ-200的软件识别。

4 讨论

此实验用培养细菌来作成菌尿，进行测定其红细胞得出的结果，可以肯定菌尿对尿红细胞测定有一定的影响。临床中采用显微镜检测的方法居多，虽然镜检结果准确可靠，但是此方法效率低，很难满足临床检测的需要。尿液分析仪的各类较多，不同的类型设计原理也一样，所以对细菌的识别能力也会有不同程度的差别，细菌的种类对红细胞的检测影响程度也不同。此次实验结果证明，在不同菌尿的影响下，和使用不同分析仪会有不同的结果，

UF-1000的原理是采用激光流式细胞技术，及多项领域技术于一体，对单个细胞进行多参数的快速定量分析和分选，对诊断泌尿系感染方面有很大的作用。此次得到结果，绿脓杆菌影响最大，假阳性的结果中发现有大肠杆菌、肠球菌、葡萄球菌属和真菌等，原因是仪器在多种原因影响下造成漏检。

IQ-200全自动分析仪解决了尿沉渣检查不能达不到标准化的问题。此方法不用对尿液离心，对尿液分析全自动化，最适用批量样本检测。IQ-200的精密度高，携带污染率低，同时，在临床应用中也有不足之处，由其是在对红细胞进行检测时非常容易受到影响。此次试验得出，由于大肠杆菌、金葡菌和粪肠球菌的形态与红细胞的形态有差异，IQ-200的自动微粒识别软件对其识别十分准确，而对霉菌会造成误差，原因是霉菌在形态上与红细胞相似，如有这种情况，可以向标本中加入几滴冰醋酸，便能够区别开来。

综上所述，干扰尿液分析仪检测红细胞结果的原因很多，其中来自以部分细菌的影响为一种，尿液分析仪不但可以把红细胞完整检测，又能检测游离的血红蛋白，同时，由于尿液中有肌红蛋白也可呈阳性反应，使镜检与尿液分析仪测定结果不一致，出现假阳性。

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