载脂蛋白E与抗精神病药致脂代谢紊乱的相关性研究

孔德荣 张小明 赵星梅 张岩滨 王体宾 李 峥 张丽霞 胡海涛 霍 军 周梦煜 赵青霞 宋春联 高新立 李恒芬

1）郑州市第八人民医院 郑州 450006 2）新乡医学院 新乡 453003 3）郑州大学第一附属医院 郑州 450052

近年来，非典型抗精神病药所引起的体重增加和脂代谢紊乱问题已受到普遍重视，它不仅影响患者治疗的依从性，还可引发糖尿病、高血压和冠心病等相关疾病［1－3］，但对其作用机制目前的研究尚不完全清楚，载脂蛋白E（APOE）是人体内一种非常重要的糖蛋白，基因定位于19号染色体，有3个主要等位基因，ε2、ε3、ε4，由此产生6种基因型，E2／2、E2／3、E2／4、E3／3、E3／4和E4／4，载脂蛋白 E组成脂蛋白，是乳糜微粒、极低密度脂蛋白、中间密度脂蛋白和部分高密度脂蛋白的结构蛋白［4－5］，在血脂代谢中起重要调节作用，与肥胖、高脂血症、冠心病、脑卒中等脂代谢紊乱相关性疾病关系密切［6－7］。本研究旨在探讨载脂蛋白E与抗精神病药致脂代谢紊乱的关系。

1 对象和方法

1.1 对象 研究组：均来自2009－01—2010－09到郑州市第八人民医院就诊的精神分裂症患者，入组标准：（1）精神分裂症的诊断符合《国际疾病和相关健康问题统计分类第10版》（ICD－10）；（2）年龄18～60岁；（3）病程1月～5a；（4）首发且入组前至少一个月未服用抗精神病药物；（5）血常规、肝肾功能及血脂水平均在正常范围，体质量指数（BMI）在正常范围18.5～25.0kg／m2。排除标准：（1）有重大躯体疾病、内分泌代谢疾病或有其他神经精神疾病患者；（2）有酒精或精神活性物质滥用者；（3）妊娠或哺乳期女性。符合条件187例，男105例，女82例，平均年龄（29.11±6.02）岁，平均BMI（18.7±3）kg／m2，治疗药物有氯氮平（湖南洞庭制药厂）、利培酮（西安杨森制药有限公司生产，商品名维思通）和齐拉西酮（江苏恩华药业集团公司生产），每个患者按常规进行单一药物治疗，平均用药剂量：氯氮平（261±47.6）mg／d，利培酮（4.5±1.3）mg／d，齐拉西酮（100±20）mg／d，治疗过程中如出现不良反应则常规对症处理。研究组：均为郑州市第八人民医院职工，年龄21～53岁，要求既往体健，无神经精神系统疾病，未服用过神经精神类药物，无心血管系统疾病和内分泌代谢性疾病，血常规、肝肾功能及血脂水平均在正常范围，体质量指数BMI在正常范围（18.5～25.0）kg／m2。符合条件120例，男67例，女53例，平均年龄（31.04±5.36）岁，平均BMI（18.8±2）kg／m2。

该研究经医院伦理委员会专家论证同意，患者监护人和健康对照者均知情同意并签订知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 各项指标血清水平的测定：研究组分别于治疗前、治疗12周末晨起空腹取肘静脉血5mL，分离血清，－80℃保存待测载脂蛋白 E（APOE）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白 （HDL）浓度，同时测量身高和体质量，计算体质量指数（BMI）（BMI＝身高／体质量（kg／m2））。健康对照组于入组的次日晨起空腹取肘静脉血5mL，分离血清，－40℃保存待测各项指标，同时测身高和体质量，计算体质量指数。血脂水平使用奥林巴斯AU640全自动生化仪测定。APOE血清浓度的测定采用双抗体酶联免疫吸附法，使用ASSAYPRO生产的AssayMax Human Apolipoprotein E ELISA Kit试剂盒，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.2.2 基因多态性的测定：分别收集研究组与健康对照组晨起空腹肘静脉血3mL，－80℃保存待测，全血DNA的提取采用美国QIAGEN公司提供的FlexiGene DNA试剂盒，严格按照试剂盒说明书进行操作。APOE基因的扩增采用聚合酶链反应（PCR）技术，上游引物为5＇－TAA GCT TG G CAC GGC TGT CCA AGG A3＇，下游引物为 5＇－ACA GAA TTC GCC CCG GCC TGG TAC AC 3＇［8］，反应体系25μl，内含2×GCbufferⅠ12.5μl，dNTP 4μl，上下游引物各0.6 μl，LA TaqE0.3μl，DNA 模板1μl，其余用ddH2O补足至25μl。PCR反应条件：95℃预变性5min，94℃变性50s，60℃退火50s，72℃延伸50s，35个循环，72℃延迟10min。取10μl PCR产物在37℃恒温水浴箱中经过2μl Hhal限制性内切酶酶切4h，酶切产物行15%聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳（120V120min），银染后进行基因型分析。

1.3 统计方法 采用SPSS 17.0统计软件包，计量资料采用t检验，计数资料采用卡方检验，P＜0.05表示有统计学意义。

2 结果

2.1 载脂蛋白E PCR产物 大小为246bp（如图1），酶切后银染观察到5种酶切结果，分别为E3／4：bp91、72、60、48、38、35六条带；E3／3：bp91、60、48、38、35五条带；E2／4：bp91、83、72、60、48、38、35七条带；E2／3：bp 91、83、60、48、38、35六条带；E4／4：bp72、60、48、38、35五条带。未检测到 E2／2基因型（如图2）。

2.2 未治疗前研究组与健康对照组间各指标的比较 如表1，未治疗前研究组与健康对照组间BMI、血脂和APOE血清水平均无显著性差异（P＞0.05）。

表1 未治疗前研究组与健康对照组间各指标的比较

2.3 研究组药物治疗前后各指标间的比较 如表2，研究组在抗精神病药物治疗12周后，BMI、TG和LDL较治疗前均显著增高（P＜0.01），TC也显著增加（P＜0.05），而 HDL和APOE血清水平较治疗前无显著变化（P＞0.05）。

表2 研究组药物治疗前后各指标间的比较

2.4 研究组治疗前后不同APOE基因型者各指标变化的比较 如表3，在给予抗精神病药物治疗后，E4／X基因型者BMI、TC、TG和LDL较治疗前均显著升高（P＜0.01，P＜0.05），而E2／X基因型者和E3／X基因型者各指标在治疗后也有所升高，但未达到统计学意义（P＞0.05）。

表3 研究组治疗前后不同APOE基因型者各指标变化的比较

3 讨论

长期服用抗精神病药物的病人，其体质量增加及血脂代谢异常的发生率明显高于普通人群［9］。抗精神病药物对体重及脂代谢等方面的副反应已经越来越多的引起大家的关注［10－12］。通过本项研究发现，治疗前精神分裂症患者的体重、血脂、载脂蛋白E血清水平与健康对照无明显差异，服用氯氮平等抗精神病药12周后，血清载脂蛋白E水平无明显变化，但体重和血脂多项指标却显著增高，这种变化在ε4基因携带者表现突出，而ε2基因携带者和ε3基因携带者在治疗前后则无显著变化。有研究发现，载脂蛋白ε4基因者更容易引起胰岛素抵抗［13］，使机体代偿性分泌胰岛素增多，胰岛素受体数目下调，胰岛素敏感性下降，血中升高的胰岛素能直接抑制脂肪代谢，而非典型抗精神病药物可直接作用于胰岛素受体，使其数目下调，胰岛素对血糖的敏感性下降，增加胰岛素抵抗［14］，两者协同作用，使载脂蛋白Eε4基因者在抗精神病药物治疗后更容易发生肥胖和脂代谢紊乱的问题。

综上，通过本研究发现载脂蛋白Eε4基因是引起抗精神病药物致脂代谢紊乱的危险因素，携带有载脂蛋白Eε4基因的患者在服用抗精神病药物治疗后，更容易发生肥胖和脂代谢紊乱的问题。精神科临床中，载脂蛋白ε4基因可作为抗精神病药物致肥胖和脂代谢紊乱的风险预测指标。但由于本研究样本量较小，未检测到E2／2基因型，尚需要进一步大样本的研究。

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