固本止哮方防治支气管哮喘的实验研究

谢晓书， 张士卿

支气管哮喘是一种常见的、多发的慢性呼吸系统疾病，患病率有逐年上升趋势，严重威胁人类身体健康。根据全球哮喘防治创议统计数字，全世界有1.5亿人患有哮喘，每年死于哮喘的人有18万之多。国外人群哮喘患病率为5%～10%，国内约为1%，儿童可达3%左右［1］。因此，哮喘的防治已引起全世界的重视，世界卫生组织已将其列入全球防治战略。发挥中医未病先防，整体观念，辨证论治，发时治标，防时治本，多环节，多角度，多靶点调治等优势，是支气管哮喘防治的研究方向之一。

1 材料与方法

1.1 实验动物 选取SPF级SD幼龄大鼠100只，体质量（70±10）g，雌雄各半，由甘肃中医学院实验动物中心提供（合格证号：SCXK（甘）2004－0006）。整个实验过程在SPF级动物实验室（动物实验设施使用证号：SCXK（甘）2004－0006－0000916）中实施。

1.2 实验药品 卵白蛋白粉剂（上海升正生物技术有限公司，批号：100108）；固本咳喘胶囊（合肥今越制药有限公司，批号：090730）；磷酸组胺（上海中秦化学试剂有限公司，批号：100410）；氯化乙酰胆碱（兰州爱华化工有限责任公司，批号：081020）；固本止哮方（甘肃中医学院药剂教研室）。

1.3 实验动物筛选 100只大鼠放入雾化装置箱内，待其安静后启动超声雾化仪，向箱内喷入2%乙酰胆碱和1%磷酸组胺1∶1混合液，喷雾时间为30s，观察并记录大鼠出现二级哮喘时间（参照哮喘症状评分［2］，1级为呼吸困难，2级为呼吸困难＋咳嗽，3级为呼吸困难＋咳嗽＋跌倒，4级为死亡），即引喘潜伏期，超过60s为不敏感弃之，筛选出60只，雌雄各半备用。

1.4 分组 将60只大鼠按随机数字法分为5组（空白组、模型组、固本止哮方高剂量组、固本止哮方低剂量组、固本咳喘胶囊对照组），每组12只。

1.5 模型制备 除空白组外，各组制备哮喘模型。第1、6、11天对实验大鼠行腹腔注射10%卵白蛋白生理盐水1mL致敏（含卵白蛋白100mg，氢氧化铝干粉100mg）；第14天，将大鼠置于雾化箱中，以3%卵白蛋白生理盐水行超声雾化吸入诱发哮喘发作，每日激发1次，每次30min，每次激发至3级哮喘状态，即大鼠出现咳嗽、呼吸急促、腹肌紧张、点头运动等哮喘症状。连续激发7d。

1.6 干预方法 空白组、模型组分别连续生理盐水灌胃，固本咳喘胶囊对照组按0.13g／kg剂量灌胃，固本止哮方高、低剂量组分别按生药20、5g／kg剂量灌胃，各组连续灌药28d。各组于灌药7d后制备哮喘模型，空白组腹腔注射相同剂量的生理盐水，给予相同剂量的生理盐水雾化。

1.7 观察指标 对各大鼠引喘潜伏期的影响，大鼠首次与1%卵白蛋白气雾接触哮喘等级变化情况及激发后各组诱发哮喘（3级）发生率。

1.8 统计学方法 所有数据采用SPSS 17.0统计软件包作统计分析，计量资料采用珚±s表示，组间比较采用方差分析，等级资料采用Ridit分析，计数资料采用 Mann－Whitney U 检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对各组大鼠引喘潜伏期的影响 见表1。

表1 各组大鼠引喘潜伏期比较（珚±s，n＝12，s）

表1 各组大鼠引喘潜伏期比较（珚±s，n＝12，s）

注：与模型组比较，aP＜0.05。

组别 第1天 第14天40.69±0.36 －模型组 40.50±3.60 44.11±1.33固本止哮方高剂量组 40.90±1.78 87.33±1.64a固本止哮方低剂量组 41.10±2.38 80.51±1.01a固本咳喘胶囊对照组 40.80±3.04 81.99±0.64a F 0.98 5.86 P＞0.05 ＜空白组0.05

表1结果表明，在第1天筛选过程中各组大鼠的引喘潜伏期差异无统计学意义（P＞0.05）；用药灌胃预防14d后，除空白组未做引喘潜伏期测定外，余各组大鼠引喘潜伏期均延长，组间比较差异有统计学意义（P＜0.05），固本止哮方高、低剂量组、固本咳喘胶囊对照组引喘潜伏期均长于模型组，差异有统计学意义（P＜0.05）。固本止哮方高、低剂量组、固本咳喘胶囊对照组3组两两比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.2 大鼠首次与1%卵白蛋白气雾接触哮喘等级变化情况 见表2。

表2 各组大鼠哮喘等级变化情况（n）

表2结果表明，空白组未与1%卵白蛋白气雾接触，未发生哮喘，余4组均发生哮喘；与模型组比较，固本止哮方高、低剂量组、固本咳喘胶囊对照组哮喘等级明显有减轻趋势，差异有统计学意义（P＜0.05）；与固本咳喘胶囊对照组比较，固本止哮方高、低剂量组哮喘等级有减轻趋势，差异无统计学意义（P＞0.05）。固本止哮方高、低剂量组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.3 激发后各组诱发3级哮喘发生率的比较 在激发第4、7天，与空白组比较，其余各组的3级哮喘发生率明显增高，差异有统计学意义（P＜0.01）；固本止哮方高、低剂量组、固本咳喘胶囊对照组的3级哮喘发生率明显低于模型组，差异有统计学意义（P＜0.05）；固本止哮方高、低剂量组的3级哮喘发生率低于固本咳喘胶囊对照组，差异无统计学意义（P＞0.05）。固本止哮方高、低剂量组3级哮喘发生率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3。

表3 激发后各组诱发3级哮喘发生率的比较［n（%），n＝12］

3 讨论

固本止哮方由黄芪、五味子、炒白术、乌梅、防风、银柴胡、补骨脂、女贞子、何首乌、炙甘草等组成，是导师张士卿根据中医基础理论在玉屏风散和过敏煎的基础上，结合现代药理研究和多年临床经验，精心筛选其相关药物化裁而成。导师认为：哮喘的病变部位主要在肺、脾、肾三脏，小儿肺脏娇嫩，脾常不足，肾常虚，而人体水液的正常代谢由肺脾肾三脏完成，肺为水之上源，通调水道，脾胃为水谷之海主运化水谷精微，肾者水脏，主津液，若三脏功能失调，则水液代谢障碍，痰浊内生（与现代过敏学说有关），成为哮喘之夙根。其病机主要为正虚痰伏，邪阻肺络，遇感外邪而触发。治疗上主张扶正为主，兼以祛邪。

玉屏风散由黄芪、白术、防风3味中药组成，主治表虚卫阳不固所致的体虚易感风邪者，前两味药，以扶正为主，而防风则以祛邪为主，它可以提升患儿的“正气”以抵御外邪，补脾实卫，益气固表止汗，被称为“中药免疫调节剂”。现代药理研究证实：黄芪、白术能提高免疫球蛋白，促进抗体产生，促进体液免疫，对B淋巴细胞免疫功能具有明显的增强作用且对多种细菌有抑制作用。防风大分子多糖为水提液的主要成分，具有明显增强机体免疫功能的作用。

过敏煎是祝谌予名老中医之验方，由银柴胡、防风、乌梅、五味子、甘草5味药组成。该方具有御卫固表、抗过敏的功效。银柴胡、防风发散表邪，祛风解痉，乌梅、五味子收敛肺气，止咳平喘，一散一收，调节肺气，颇合肺的呼吸出入功能。现代药理研究证实：银柴胡具有抗炎解热作用，五味子能抑制肥大细胞脱颗粒，有拮抗炎性介质，抗变态反应，止咳祛痰作用。乌梅有增强机体免疫力，抗过敏作用，甘草能预防支气管哮喘的发作。

补骨脂、女贞子、何首乌：滋补肝肾，强壮腰膝，纳气平喘。现代药理研究证实：补骨脂能提高巨噬细胞的吞噬能力，提高机体非特异性免疫的能力。女贞子能增强免疫功能对炎症有明显的抑制作用。何首乌中提取的大黄酚，能促进肠管的运动，并能骤减神经的时值，促使神经兴奋，增加肌肉时值，使肌肉麻痹，起到解痉作用。无论从药物配伍还是从单味药性上研究，固本止哮方都具有提高机体免疫力，参与免疫调节、抵抗变态反应的作用，故可防治过敏性哮喘。

本实验结果表明：（1）用药灌胃预防后，大鼠引喘潜伏期均延长，且固本止哮方高、低剂量组与哮喘模型组比较均有意义。（2）大鼠首次与1%卵白蛋白气雾接触：固本止哮方高、低剂量组与哮喘模型组比较哮喘等级明显降低。（3）在激发第4、7天，固本止哮方高、低剂量组与哮喘模型组比较3级哮喘发生率明显减低。故通过对固本止哮方实验研究发现：固本止哮方具有延长大鼠引喘潜伏期，降低哮喘发生率及哮喘程度作用，能够较好的防治幼龄大鼠哮喘。

［1］陈撅珠.实用内科学［M］.11版.北京：人民卫生出版社，2002：1556.

［2］Shimojo N，Kohno Y，Katsuki T，et al.Diminished interferon－gamma（IFN－gamma）production by bacterial antigen－specific T cells in atopic patients［J］.Clin Exp Immunol，1996，106（1）：62－66.