跌打消肿止痛灵的皮肤用药安全性研究

吕 鹏 何巧玲 罗 秀 陈兆霓 焦 杨 黄仁彬 张士军*

（广西南宁医科大学，广西 南宁 530021）

跌打消肿止痛灵是扁藤、骨碎补、田七、血竭、大罗伞组成的复方酊剂，有舒筋活络、消肿止痛、活血化淤的功效，民间使用对跌打损伤、腰腿痛、风湿痛、软组织损伤等有极好的疗效。本课题组前期研究发现跌打消肿止痛灵经口服给药具有良好的抗炎镇痛作用，但是口服给药在肝脏中存在“首过效应 ”，也容易在胃肠道中受到破坏[1]。为了延长跌打消肿止痛灵有效作用时间，减少作用次数，避免肝脏的和胃肠道的破坏，减少胃肠给药的副作用，本课题组考虑采用皮肤用药、皮肤用药与口服给药联合等不同给药途径来维持跌打消肿止痛灵恒定的最佳血药浓度或生理效应。为了确保跌打消肿止痛灵临床皮肤用药的安全性，本次试验进行了跌打消肿止痛灵皮肤用药的毒性试验研究，从而为跌打消肿止痛灵的开发和临床应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 动物

健康白色豚鼠，雌雄各半，普通级，体质量（250±20）g，由广西医科大学实验动物中心提供。试验动物生产许可证 SCXK（桂）2003-0003，试验动物使用许可证 SYXK（桂）2003 -0005。常规兔饲料喂养，自由饮水。

1.2 试验药物及试剂

跌打消肿止痛灵：由本实验室自行提取配制；2，4-二硝基氯苯（sigma公司，批号：Lot# MKAA0924V）。

1.3 方法

1.3.1 皮肤急性毒性试验[2]

取白色豚鼠50只，雌雄各半，于给药前24h，将背部脊柱两侧剃毛，去毛面积约40cm2，去毛后24h检查去毛皮肤是否因去毛而受伤，受伤的皮肤不宜做完好皮肤的毒性试验。破损皮肤的制作：采用400#细砂纸在豚鼠脱毛区皮肤上擦伤，以渗血为度。将剃毛豚鼠分为5组：空白对照组，完整皮肤高、低剂量组（16，4mL/kg），破损皮肤高、低剂量组（16，4mL/kg），每组10只，给药体积 4mL，空白对照组给予等体积蒸馏水，采用多次重复皮肤给药，将受试药物均匀涂于脱毛区，每只动物分笼饲养。给受试药物24h后，用温水洗去残留受试药物，去除受试药物后1、24、48、72h至第7日，每日观察并记录动物体质量、皮肤毛发、眼和结膜的变化、呼吸、中枢神经系统、四肢活动等及其他中毒表现，若遇有死亡动物，应及时进行尸检和肉眼观察，当有肉眼可见病变时，应进行病例组织学检查。

1.3.2 皮肤刺激性试验[2]

取白色豚鼠20只，雌雄各半，去毛及破损皮肤制作同上。试验采用同体左右侧自身对比，分完整皮肤组和破损皮肤组，每组10只，左侧去毛区涂受试药物1mL，右侧涂蒸馏水1mL作为对照。每只动物分笼饲养，给受试药物24h后，用温水洗去残留受试药物，去除受试药物后1、24、48、72h观察并记录涂抹部位有无红斑和水肿等情况，按《皮肤刺激性反应评分标准》[2]进行评分，计算各组动物反应平均分值。根据《皮肤刺激性强度评价标准》[2]对皮肤刺激性强度进行评价。

1.3.3 多次给药皮肤刺激性试验[2]

取白色豚鼠20只，分组及给药同上，连续涂药7d，停药后再观察7d，每日观察并记录红斑及水肿情况并评分，并观察涂抹部位是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄等情况。

1.3.4 皮肤过敏试验[2]

白色豚鼠30只，雌雄各半，于给受试药物24h前将背部两侧剃毛，去毛区范围每侧约3cm×3cm。将豚鼠按性别随机分为3组：空白对照组、受试药物组及阳性对照组，每组10只。受试药物组给予跌打消肿止痛灵0.1mL，空白对照组给予等体积蒸馏水，阳性对照组给予等体积1% 2，4-二硝基氯苯。①致敏接触：受试药物组取跌打消肿止痛灵0.1mL，均匀涂于左侧脱毛区，涂好后动物分笼饲养，于第7天和第14天以同样的方式重复1次，共计3次。空白对照组与阳性对照组方法同上。②激发接触：于末次给药后14 d，将相应药物0.1 ml涂于豚鼠背部右侧脱毛区，阳性对照用0.1 % 2，4-二硝基氯苯，6h后去掉受试药物，即刻观察，然后于24、48、72h再次观察皮肤过敏反应情况。按《皮肤过敏反应程度的评分标准》[2]进行评分，计算各组动物反应平均分值。同时注意观察动物是否有哮喘、站立不稳或休克等严重的全身变态反应。根据《皮肤致敏性评价标准》[2]按致敏发生率推断致敏性。

1.3.5 统计学处理

2 结 果

2.1 跌打消肿止痛灵的皮肤急性毒性试验

跌打消肿止痛灵在低剂量和高剂量用药时对完整皮肤豚鼠与破损皮肤豚鼠的行为、活动、饮食、皮毛光泽、眼和结膜、呼吸，体质量等均无任何影响，涂抹部位无红斑和水肿现象，先后观察7天内无豚鼠死亡，未出现任何急性毒性反应。与空白对照组比较完整皮肤组和±s，n=10 ）破损皮肤组的豚鼠体质量增加差异不显著（P＞0.05）。结果表明，跌打消肿止痛灵经皮肤给药无急性毒性反应，安全度较大。见表1。

表1 跌打消肿止痛灵皮肤急性毒性试验对豚鼠体质量的影响 （χ—

表2 跌打消肿止痛灵对豚鼠皮肤刺激试验（n=10 ）

表3 跌打消肿止痛灵对豚鼠皮肤致敏性试验 （ n=10 ）

2.2 跌打消肿止痛灵的皮肤刺激性试验

用温水洗去残留受试药物后1、24、48、72h观察涂抹部位，个别豚鼠有勉强可见红斑，各组豚鼠均未见水肿情况。连续给药 1周后，观察发现个别豚鼠有勉强可见的红斑，能够很快自行消失，其余豚鼠未见水肿、色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄等情况。皮肤刺激程度平均反应分值均＜0.49，为无刺激性。结果表明，跌打消肿止痛灵对皮肤无刺激性。见表2。

2.3 跌打消肿止痛灵的皮肤过敏反应试验

受试药物组和空白对照组于0、24、48、72h观察未见红斑、水肿等皮肤变态反应情况；阳性对照组出现明显的红斑、水肿等皮肤致敏反应情况，平均分值较高，致敏率达到100%。各组豚鼠均未出现哮喘、站立不稳或休克等严重的全身变态反应。结果表明，跌打消肿止痛灵对皮肤无致敏性。见表3。

3 讨 论

口服给药是最常用的给药途径，药物经过消化道，主要通过小肠进行吸收。药物吸收后通过门静脉进入肝脏，有些药物进入肝脏后发生首过效应，从而减少了进入体循环的药量。虽然口服用药方便快捷，但是其吸收慢，欠完全，对在胃肠破坏的、胃肠刺激大的、首关消除多的药物不适宜性的缺点也是显而易见的[1]。皮肤给药则避免了首关消除的缺点，用药方便。药物通过皮肤，进入体内循环，还能够促进神经体液调节，改善各组织器官的免疫功能等，增强自身抗病修复能力[3]。

对于跌打损伤、腰腿痛、风湿痛、软组织损伤等，通过皮肤途径给药，能够更快捷的到达病灶，进入体内循环发挥药效，保持较长时间的生理效应。皮肤途径中的皮肤毒性、刺激性、致敏性是皮肤用药安全性的重要保证。跌打消肿止痛灵是本课题组依托广西特色中草药材料，根据民间用药经验，提取配制的复方酊剂，其中扁藤祛风燥湿；骨碎补补肾强骨，续伤止痛；田七止血抗炎、活血化瘀，能够扩张血管，改善微循环，增强机体免疫功能；血竭活血散瘀，止血生肌；大罗伞活血化瘀、消肿解毒。采用酊剂可以增加活血功效，有利于药物吸收与药效发挥。为研究其抗炎镇痛的作用及其机制，首先必须确定跌打消肿止痛灵的皮肤用药安全性。本课题组通过试验研究发现跌打消肿止痛灵具有良好的皮肤用药安全性，对皮肤无不良反应，下一步本课题组将通过不同的炎症模型，进一步研究确定其通过皮肤给药发挥药效的作用机理，发挥药物最大功效，以期望能够开发出一种新的有效的抗炎镇痛外用制剂，为临床用药提供试验依据，为广西地区特色中草药开发研究利用奠定基础。

[1]金有豫.药理学[M].北京:人民卫生出版社,2001:18.

[2]中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药研究指南[S].1995:209-212.

[3]陈文贵.对中药皮肤给药途径的探讨[J].黑龙江中医药,1995,4(1):41-44.