原发性肾小球疾病患者花生四烯酸和肿瘤坏死因子α的变化*

2012-11-06傅淑霞

中国病理生理杂志 2012年7期

关键词：烯酸肾小球氧化应激

陶磊，傅淑霞

(河北医科大学第二医院肾内科，河北石家庄 050000)

1000-4718(2012)07-1338-03

2011-08-10

2012-04-09

河北医科大学第二医院院级课题资助项目(No.2h0200918)

△通讯作者 Tel:0311-66002943;E-mail:fushuxia99@163.com

原发性肾小球疾病患者花生四烯酸和肿瘤坏死因子α的变化*

陶磊，傅淑霞△

(河北医科大学第二医院肾内科，河北石家庄 050000)

原发性肾小球疾病；花生四烯酸类；肿瘤坏死因子；氧化性应激

花生四烯酸(arachidonic acid, AA)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)是2种与氧化应激关系密切的炎症因子，AA和TNF-α都能促进氧化应激[1-4]，AA还能抑制氧化应激[5-6]，然而其对原发性肾小球疾病患者氧化应激的影响却尚不清楚。丙二醛(malondialdehyde，MDA)是氧化应激的重要标志物之一，本文通过对AA、TNF-α和MDA的研究来探讨原发性肾小球疾病患者体内氧化应激的可能影响因素及变化情况。同时AA和TNF-α作为2种炎症因子，需排除炎症对其变化的影响，于是我们通过测定高敏C反应蛋白(high-sensitive C-reactive protein, hs-CRP)的浓度，排除炎症的影响。

材料和方法

1对象

对象选自2009年9月～2010年7月在本科住院经临床和肾活检确诊的原发性肾小球疾病患者55例，根据CKD-EPI公式[7]评估肾小球滤过率(glomerular filtration rate，GFR),顺序入组慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)1、2期19例，CKD3、4期14例，CKD5期22例，其中男36例，女19例。入组标准：所有研究对象均没有感染；入组前1个月未使用过糖皮质激素、免疫抑制剂、非甾体类抗炎药、静脉铁剂及螺内酯等药物；排除恶性肿瘤、全身性疾病、肝硬化、肝炎、严重的心血管疾病及免疫系统疾病。

2方法

研究对象早晨空腹抽血3 mL，收集于一次性试管中，置于室温静置2 h，分离血清，装入EP管中，保存于-70℃冰箱内待测。用酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)分别测定血清游离AA、TNF-α、MDA及hs-CRP的浓度。测定4种因子的ELISA试剂盒均购于上海西塘生物科技有限公司。

3统计学处理

结果

1一般临床资料比较

CKD1、2期中男性患者所占比例为79%，CKD3、4期为64%，CKD5期为59%。各组之间的年龄和身体质量指数(body mass index,BMI)差异无统计学意义(P>0.05)。CKD1、2期中包括：肾小球微小病变8例，IgA肾病6例，膜性肾病2例，局灶性节段性肾小球硬化2例，增生硬化性肾小球肾炎1例。CKD3、4期包括：IgA肾病12例，硬化性肾小球肾炎2例。CKD5期中包括：7例曾行肾穿，其中IgA肾病5例，硬化性肾小球肾炎2例；15例初诊即为CKD5期，未肾穿，并排除继发性原因。

2不同组AA、TNF-α、MDA和hs-CRP的比较

CKD1、2期和3、4期患者之间AA和MDA差异无统计学意义(P>0.05)，CKD5期患者的AA水平明显高于其它各组(P<0.05)，而MDA水平明显低于其它各组(P<0.05)。CKD3、4期和CKD5期之间的TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05)，但都明显低于CKD1、2期(P<0.05)。各组之间的hs-CRP水平差异无统计学意义(P>0.05),见表1。

表1 患者血清AA、TNF-α、MDA和hs-CRP含量的比较

*P<0.05vsCKD1,2;#P<0.05vsCKD3,4;△P<0.05vsCKD5.

3相关性和回归分析

表2 AA和TNF-α与MDA相关性分析

讨论

原发性肾小球疾病患者体内存在氧化应激状态已被证实，然而对于氧化应激的影响因素以及在不同CKD分期之间的变化情况却尚不清楚。在本研究中我们发现，AA与MDA呈直线负相关，TNF-α与MDA呈直线正相关，MDA作为氧化应激的公认标志物之一，说明AA和TNF-α与氧化应激具有相关性，为进一步证实AA和TNF-α对氧化应激的影响，我们进行了多元线性回归分析，结果表明MDA的变化与AA和TNF-α有线性回归关系，其中与AA呈负相关，与TNF-α呈正相关，从而证明AA和TNF-α是影响原发性肾小球疾病患者氧化应激的重要因素。并且AA具有抑制氧化应激的作用，这与一些实验中证明的AA能够通过增强抗氧化酶活性[5]，抑制氧化应激；以及通过阻止反向电子转运[8]，抑制NADPH氧化酶的活性[9]，抑制一氧化氮合酶[6]，减少ROS的生成，从而抑制氧化应激的结论相一致。多元线性回归方程示TNF-α具有促氧化应激的作用，这与在其它疾病或模型中已经证明的TNF-α通过增加活性氧的产生和降低抗氧化酶的活性[4,10-12]，诱导氧化应激产生的结论相一致。

在研究中我们还发现，CKD5期MDA显著低于其余各期，这可能与AA和TNF-α的含量有密切关系，因为CKD5期AA的含量最高，而TNF-α含量最低，这也进一步证明AA的抗氧化和TNF-α的促氧化作用。虽然目前很多实验已经证明了慢性肾脏病患者体内存在氧化应激状态，然而绝大多数实验集中在对患者与正常人进行比较得到的结论，而对患者不同分期间的氧化应激变化缺乏研究[13-16]。本实验通过分组比较证明了原发性肾小球疾病患者不同分期间氧化应激的变化情况。

AA和TNF-α作为炎症因子其含量的变化必然受到体内炎症的影响，因此为了更好地分析它们与氧化应激的关系，我们除了严格排除感染病人入组外，还选取hs-CRP作为衡量体内炎症水平的重要标志物，以排除炎症对实验结果的影响。结果显示不同CKD分期患者间的炎症水平基本相同，从而也排除了炎症对实验可能的干扰。

综上所述，AA和TNF-α是影响原发性肾小球疾病患者氧化应激的重要因素，AA具有抑制氧化应激的作用，TNF-α具有促进氧化应激作用。

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ChangesofarachidonicacidandTNF-αinprimaryglomerulardisease

TAO Lei, FU Shu-xia

(RenalDivision,TheSecondHospitalofHebeiMedicalUniversity,Shijiazhuang050000,China.E-mail:fushuxia99@163.com)