豫南茶树种质资源籽实脂肪含量及脂肪酸组成分析

常亚丽，黄晓兵，蒋双丰，黄双杰，孙慕芳，刘威，郭桂义*

豫南茶树种质资源籽实脂肪含量及脂肪酸组成分析

常亚丽1，黄晓兵2，蒋双丰3*，黄双杰1，孙慕芳1，刘威1，郭桂义1*

1. 信阳农林学院茶学院，河南省豫南茶树资源综合开发重点实验室，河南省茶叶加工与检测工程技术研究中心，河南 信阳 464000；2. 中国热带农业科学院农产品加工研究所，广东 湛江 524000；3. 信阳市农业科学院/河南省茶叶工程技术中心，河南 信阳 464000

以豫南地区42份茶树种质资源的茶籽为研究对象，分析了茶籽含仁率及茶籽仁的脂肪含量，范围分别在33.53%~71.60%、17.77%~38.39%。利用气-质联用技术（GC-MS）检测了茶籽仁中的脂肪酸组成和含量，共检测到21种脂肪酸，其中主要成分棕榈酸、硬脂酸、顺-油酸、亚油酸和-亚麻酸的含量分别在2.64%~5.70%、0.21%~1.11%、7.33%~17.29%、0.09%~8.44%和0.01%~0.15%；相关性分析显示，顺-油酸与十三碳酸、十四碳酸和顺-二十碳二烯酸的含量呈极显著负相关，亚油酸与反-油酸、顺-二十二碳六烯酸含量呈极显著负相关；除了水仙7202茶籽仁中的饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸含量比值为3.08∶12.16∶1，其余茶树种质资源茶籽仁中，这三类脂肪酸的比值均约为1∶2.69∶1.37。中黄1号、农抗早、迎霜、鄂茶11号、龙井43、中选8号、崂山3号和黄金叶8个茶树品种，不仅含仁率和脂肪含量较高，而且茶籽仁脂肪酸的组分和含量丰富、均衡，可初步筛选出来作为豫南地区叶籽两用茶园的候选品种。

茶树；茶籽；脂肪；脂肪酸；组成；含量

茶树[(L.) O. Kuntze]是多年生木本经济作物，叶片一直以来都是其开发利用的主要对象；茶树的种子称为茶籽，富含15%~35%油脂，提取可得品质与橄榄油类似的高级食用油[1]。因茶籽油比大豆油、山茶籽油的脂肪酸组成更均衡，生理活性成分含量更高，越来越多研究人员和消费者开始关注这一新兴木本植物油脂[2]。近年来，国内外学者采用气相色谱法先后对日本、印度、土耳其和中国的茶籽油脂肪酸组成展开分析工作，一致认为茶籽油主要包含油酸、亚油酸、棕榈酸、硬脂酸和亚麻酸等5种脂肪酸，但因品种、取样时间、地点和检测方法不同，各报道数据间存在较大差异[3]。本文收集了豫南地区42份茶树种质资源的茶籽，采用气相色谱-质谱联用法（GC-MS）比较了这些茶籽仁中脂肪酸组分和含量的差异，旨在为豫南地区茶树种质资源茶籽的加工利用提供参考，并结合茶籽含仁率和脂肪含量，初步筛选出一批适宜在豫南推广的，含仁率和脂肪含量高，脂肪酸组成均衡的叶籽两用茶树品种。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试材料于2018年11月份完成收集整理工作。由河南省信阳市农业科学院/茶叶工程技术中心提供样品33份，灵山茶叶有限公司提供样品3份，光山县净居寺茶场提供样品3份，仙居乡杏山茶园、祥云茶业有限公司和申林茶业有限公司各提供样品1份（表1）。此外，由浙江省丽水市莲都区农业局提供了浙农21号的茶籽，该品种是构建当地叶籽两用茶园的优良候选品种之一。为考察不同栽培管理模式对茶籽性状的影响，在两个采样点均收集了白叶1号茶籽。采用荫蔽风干方式使样品干燥至恒重后开展各项指标检测工作。

1.2 仪器与试剂

Trace1310 ISQ气相色谱质谱联用仪（赛默飞世尔科技公司，美国）。37种脂肪酸混合标准品和内标十九烷酸甲酯购于美国Sigma公司，其余试剂如浓盐酸、甲醇、二氯甲烷等均购自国药集团化学试剂有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 茶籽含仁率测定

茶籽含仁率测定参考恽卓婷等[4]的方法。

1.3.2 茶籽脂肪含量测定

采用GB 5009.6—2016《食品安全国家标准食品中脂肪的测定》中索氏提取法测定。

1.3.3 茶籽脂肪酸组成测定

采用甲酯化气相色谱质谱法测定茶籽中的脂肪酸组成[5]，具体方法如下：茶籽仁充分粉碎后取0.200 g加入到20 mL带盖取样瓶中，继续加入5 mL 5%盐酸甲醇溶液，10 mL二氯甲烷-甲醇溶液（体积比1∶1），于80℃水浴锅中水浴1 h。水浴完成后，冷却至室温，用甲醇定容至20 mL，作为样品待测液。取样品待测液1 mL，加入1 mL内标液和1 mL 5%氨水溶液，混合后离心分离。取二氯甲烷相用0.22 μm滤膜过膜后上机测试。采用色谱柱TGA-MAX MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；升温程序：50℃保持3 min，以10℃·min-1的速率升温至160℃，继续以2℃·min-1的速率升温至250℃，保持1 min；进样口温度250℃；载气流速1.0 mL·min-1；分流进样50∶1；质谱条件：离子源温度200℃，传输线温度250℃，溶剂延迟时间3.00 min，扫描范围：30~500 amu，离子源：EI源、70 eV。茶籽仁中各脂肪酸的绝对含量按下式计算：

表1 供试样品及采集地信息

注：白茶1号a茶籽收集于河南省信阳市农业科学院；白茶1号b茶籽采集于光山县净居寺附近茶园

Note: Baiye 1asample was supplied by Xinyang Academy of Agricultural Sciences of Henan Province. Baiye 1bsample was supplied from Jingju Temple Tea-making House of Guangshan Country

式中：i，试样中各脂肪酸的含量；i，试样测定液中个脂肪酸的峰面积；c19，内标液浓度（g·mL-1）；c19，加入内标液体积（mL）；i，脂肪酸甲酯的响应因子，每一种脂肪酸甲酯对应一个常量；c19，样品中加入内标的峰面积；，试样的称样质量（g）；FAMEi-Fai，每种脂肪酸甲酯转换为对应脂肪酸的转换系数（图1）。

1.4 数据分析方法

采用SPSS 20.0软件进行数据分析和相关性分析。

2 结果与分析

2.1 茶籽含仁率及脂肪含量比较

调查显示，43份茶树种质资源的茶籽含仁率和脂肪含量有明显差异（表2）。大多数种质资源茶籽的含仁率在50%~70%，白毫早茶籽的含仁率最高，为71.60%；茶农98茶籽的含仁率最低，仅为33.53%。如表2所示，共有30份茶籽的籽仁检测了脂肪含量，平均值为28.13%；29份采集于豫南地区茶籽籽仁的平均脂肪含量达到了28.19%，高于刘国艳等[6]报道的河南桐柏5份茶籽仁粗脂肪平均值26.50%，本试验研究结果更能代表河南省茶籽的脂肪含量水平。在这些材料中，木荷201的脂肪含量较低，为17.77%；含量较高的为中黄1号、农抗早、迎霜、鄂茶11号、龙井43和中选8号，均在31.00%以上。

2.2 茶籽脂肪、脂肪酸组成及含量

43份茶籽中脂肪酸的组成和含量存在较大差异（表3）。分析中共检测到21种脂肪酸组分，迎霜、黄金叶、中茶108、浙农21号所含种类最多，有17种；中选8号、黟选1号、TRI-19、豫研-06、陕茶1号所含种类最少，有14种。顺-9-十六碳一烯酸、二十一碳酸、顺-11,14,17-二十碳三烯酸、顺-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸、二十三碳酸仅在1~2份茶籽中检测到，且含量多在0.01%~0.05%，故略去不做统计。选择十三碳酸、十四碳酸、十六碳酸（棕榈酸）、十八碳酸（硬脂酸）、顺-9-十八碳一烯酸（顺-油酸）、反-9-十八碳一烯酸（反-油酸）、顺-9,12-十八碳二烯酸（亚油酸）、顺-6,9,12-十八碳三烯酸（-亚麻酸）、顺-9,12,15-十八碳三烯酸（-亚麻酸）、二十碳酸（花生酸）、顺-11-二十碳一烯酸（花生烯酸）、顺-二十碳二烯酸、顺-8,11,14-二十碳三烯酸、芥酸、顺-13,16-二十二碳二烯酸、顺-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸（DHA）等16种在参试茶籽中大量检测到的组分进行统计分析（表3）和相关性分析（表4）。

注：脂肪酸组分及其保留时间：丁酸3.39，己酸 7.16，辛酸11.30，癸酸 15.08，十一碳酸16.83，十二碳酸18.49，十三碳酸 20.25，十四碳酸22.58，顺-9-十四碳一烯酸 23.64，十五碳酸25.85，顺-10-十五碳一烯酸 27.36，十六碳酸30.58，顺-9-十六碳一烯酸31.97，十七碳酸37.43，顺-10-十七碳一烯酸40.09，十八碳酸39.41，顺-9-十八碳一烯酸46.13，反-9-十八碳一烯酸47.56，顺-9,12-十八碳二烯酸 50.91，反-9,12-十八碳二烯酸51.34，顺-6,9,12-十八碳三烯酸52.72，内标物 53.01，顺-9,12,15-十八碳三烯酸 54.37，二十碳酸58.58，顺-11-二十碳一烯酸59.7，顺-11,14-二十碳二烯酸61.82，顺-8,11,14-二十碳三烯酸63.22，二十一碳酸63.51，顺-5,8,11,14-二十碳四烯酸64.19，顺-11,14,17-二十碳三烯酸64.73，顺-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸67.14，二十二碳酸67.94，顺-13-二十二碳一烯酸68.66，顺-13,16-二十二碳二烯酸70.9，二十三碳酸 72.03，二十四碳酸 75.58，顺-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸76.28，二十四碳酸 76.61

所有供试材料中茶籽的脂肪酸总量在14.87%~33.12%，饱和脂肪酸（Saturated fatty acid，SFA）含量在2.96%~6.87%，单不饱和脂肪酸（Monounsaturated fatty acid，MUFA）含量7.47%~17.62%，多不饱和脂肪酸（Polyunsaturated fatty acid，PFA）含量1.18%~8.63%。其中，褚群选2号茶籽仁的SFA和MUFA含量最低，水仙7202茶籽仁的PFA含量最低，而中黄1号3个指标含量均最高，总量为33.12%。此外，崂山3号和鄂茶11号茶籽仁的脂肪酸总量也较高，分别达到了27.52%和30.26%。除了水仙7202，其他样品饱和脂肪酸SFA、MUFA、PFA含量的平均比值为1∶2.69∶1.37，与江南地区、湖南岳阳及福建地区茶籽油中这三类脂肪酸的比值相似[4,7-8]。

表2 茶籽含仁率和脂肪含量

注：白茶1号a和白茶1号b与表1相同

Note: Baiye 1aand Baiye 1bis same as Table 1

表3 茶籽脂肪酸组分绝对含量

注：a 十三碳酸（C13:0），b 十四碳酸（C14:0），c棕榈酸（C16:0），d 硬脂酸（C18:0），e 顺-油酸（C18:1c），f反-油酸（C18:1t），g亚油酸（C18:2c），h-亚麻酸（C18:3n6），i-亚麻酸（C18:3n3），j 二十碳酸（C20:0），k 顺-11-二十碳一烯酸（C20:1），l 顺-二十碳二烯酸（C20:2），m 顺-8,11,14-二十碳三烯酸（C20:3），n 顺-13-二十二碳一烯酸（C22:1），o 顺-13,16-二十二碳二烯酸（C22:2），p 顺-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸（C22:6），q 饱和脂肪酸酸，r 单不饱和脂肪酸，s 多不饱和脂肪酸；白叶1号a和白叶1号b注释信息同表1

Note: a tridecanoic acid (C13:0), b myristic acid (C14:0), c palmitic acid (C16:0), d stearic acid (C18:0), e cis-oleic acid (C18:1c), f 9-trans-oleic acid (C18:1t), g cis-9,12-linoleic acid (C18:2c), h-linolenic acid (C18:3n6), i-linolenic acid (C18:3n3), j arachidic acid (C20:0), k arachidonic acid (C20:1), l cis-11,14-eicosadienoic acid (C20:2), m cis-8,11,14-eicosatrienoic acid (C20:3), n cis-13-docosenoic acid (C22:1), o docosadienoic acid (C22:2), p cis-4,7,10,13,16,19-docosahexaenoic (DHA) acid (C22:6), q saturated fatty acid, r monosaturated fatty acid, s polyunsaturated fatty acid. Baiye 1aand Baiye 1bare same as Table 1

续表3