肝康Ⅱ号对乙型肝炎肝硬化患者血浆硫化氢和一氧化氮水平的影响

李 芳 雷飞飞 谭华炳 李云静 李儒贵 李金科 占国清

肝康Ⅱ号是我科治疗病毒性肝病的经验方。在动物实验和临床试验中证明其在治疗慢性乙型肝炎[1,2]、慢性肝衰竭[3,4]和肝硬化方面疗效确切，但机理有待进一步明确。气体信号分子一氧化氮（Nitric oxide,NO）参与肝硬化的发生、发展过程。近年发现，硫化氢（Hydrogen sulfide，H2S）也参与了肝硬化的发病过程[5～7]。本研究试图观察肝康Ⅱ号治疗肝硬化患者对血浆H2S和NO的影响。

资料与方法

一、病例来源 选择2010年6月至2011年4月我科住院的乙型肝炎肝硬化患者64例，男46例，女18例，平均年龄47±7岁。符合《病毒性肝炎防治方案》的诊断标准[8]。排除原发性心、肺、肾疾病、肿瘤、自身免疫性肝病、药物性肝病和酒精性肝病。排除甲型、丙型、丁型和戊型肝炎。另选同期在我院体检中心健康体检的正常人（无血脂、血糖和肝功能异常，病原学检测阴性，无心、肝、肾、肺、神经系统病史）30例，男21例，女9例，平均年龄46±8岁。

二、治疗方法 本研究得到我院伦理委员会审查通过[9]。采用数字表法随机将患者分为治疗组（32例）和对照组（32例）。对照组给予阿德福韦酯（代丁，天津药物研究院药业有限责任公司）10mg，每日1次。还原性谷胱甘肽（阿拓莫兰，重庆药友制药有限责任公司）1.8克加入5%葡萄糖注射液150ml中静脉滴注，复方甘草酸苷单胺S 160mg加入5%葡萄糖注射液150ml中静脉滴注，每日1次。治疗组在对照组治疗的基础上，给予肝康Ⅱ号（基础方：赤芍60g，丹参30g，郁金 20g，葛根 20g，全括篓 30g，三棱 20g，获术 20g，红花 20g，炙黄芪 20g，大黄 10g（后下），重楼 10g。胁痛加延胡索，腹胀加枳壳，纳差加神曲，水肿加大腹皮、泽泻）每日1剂，采用自动煎药机煎煮，200ml口服，每日3次。两组疗程均为4周。

三、血清检测 采用硝酸还原法检测NO水平（试剂购自南京建成科技有限公司）；采用去蛋白法[10]检测H2S水平（检测的相关设备及试剂由北京大学生理学系提供）；采用自动生化分析仪检测血生化指标；采用法国STA compact全自动血凝仪检测凝血酶原活动度（PTA）。

四、统计学处理 应用SPSS10.0 for windows软件，计量资料以表示，组间均数比较采用t检验，P＜0.05认为有统计学意义。

结果

一、治疗4周后各组患者肝功能的变化 见表1。

表1 两组患者治疗前后肝功能指标（）变化的比较

表1 两组患者治疗前后肝功能指标（）变化的比较

与对照组比，①P＜0.01

ALT（U/L） TBIL（μmol/L） ALB（g/L） PTA（%）治疗组（n=32） 治疗前 112.67±12.22 59.98±12.11 28.45±2.38 65.26±7.25治疗后 59.77±8.84 32.34±7.22① 32.14±2.80① 73.85±8.56对照组（n=32） 治疗前 115.45±16.25 61.24±11.65 29.06±2.56 64.92±7.65治疗后 65.89±7.22 40.99±6.34 30.25±2.72 68.15±8.02

二、治疗4周后两组患者血清H2S和NO的变化 见表2。

表2 各组人群血清H2S和NO（）的比较

表2 各组人群血清H2S和NO（）的比较

与对照组比，①P＜0.05

H2S（μmmol/L） NO（μmmol/L）治疗组（n=32） 治疗前 15.45±2.43 62.22±6.09治疗后 22.12±3.12① 44.78±5.12①对照组（n=32） 治疗前 15.66±2.50 62.45±6.23治疗后 19.01±2.98 49.23±3.97正常组（n=30） 29.13±4.47 29.23±3.97

讨论

内源性H2S是体内含硫氨基酸如蛋氨酸、半胱氨酸、同型半胱氨酸等在5'-磷酸吡哆醛依赖酶[包括胱硫醚 -β- 合成酶（cystathionine-β-synthase，CBS）、胱硫醚 -γ- 裂解酶（cystathioniniyase，CSE）]作用下产生的代谢产物[11]。肝脏是体内H2S生成的主要部位，H2S能调节肝脏微循环功能。肝内主要由肝星状细胞（HSC）和肝细胞产生内源性H2S。肝硬化时激活的HSC降低了CSE的表达活性，从而减少了H2S的合成[12]。本研究发现肝硬化患者H2S水平显著下降，治疗后H2S水平上升，说明肝康Ⅱ号治疗后H2S水平得到恢复，肝组织微循环可能得到改善。

NO在一氧化氮合成酶（Nitrogen monoxide synzyme，NOS）的作用下形成，主要在肝实质细胞和Kupffer细胞中产生。NOS依据是否需要钙元素分为结构型一氧化氮合成酶和诱导型一氧化氮合成酶（i-NOS）[13]。内皮型一氧化氮合成酶形成的NO对肝脏有有益作用，而iNOS合成的NO对肝脏有毒性作用[14～16]。肝硬化患者血清NO水平明显升高，且随Child-Pugh分级水平的进展呈递增性变化，说明血清NO水平与患者肝功能状态有关[17]，在肝硬化时肝脏解毒功能下降和侧支循环形成引起的肠源性内毒素血症，及其刺激产生的细胞因子如肿瘤坏死因子等可激活iNOS，可能是导致全身或局部NO水平升高的原因。本研究发现通过肝康Ⅱ号治疗，患者血浆NO水平下降，肝功能得到改善。

NO在肝硬化大鼠中对H2S/CSE体系表现为抑制作用，它使机体可以在病理状态下达到一种新的平衡，避免气体信号分子之间呈现同向变化，是机体的一种自我保护的调节机制[18]。NO浓度的升高也是导致H2S/CSE抑制，并导致H2S浓度下降的原因之一。本研究发现通过肝康Ⅱ号治疗，可以在升高H2S、降低NO的基础上使H2S/CSE达到新的平衡。

肝康Ⅱ号重用赤芍为君药，旨在清除血中瘀热，使血脉通利，瘀热得清。赤芍含芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷、苯甲酰芍药苷等单萜类化合物，总称赤芍总苷[19]，赤芍能促进肝细胞DNA合成，促进肝细胞再生[20]。赤芍总苷具有一定的退黄降酶作用，其作用机制可能与增加胆汁分泌量，增强肝微粒体氧化酶的活力，增加肝脏解毒的能力，提高尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UDPG-T）的活性，促进胆红素代谢等有关[21]。丹参为臣药，养血活血而不助热，祛瘀滞瘀血。郁金行气解郁，凉血破瘀；葛根生津液，防止活血药物伤阴；全瓜萎，生津、清热、润肠通便、通畅腑气，利于中焦肝脾气机调达；三棱、莪术、红花，破血行气，瘀滞得解；炙黄芪，益气补中，调肝健脾，促肝脾功能恢复；大黄苦寒，入血分，即可清湿热，又散瘀结。重楼为使，归肝经，清热、凉肝。全方针对肝硬化的病机，取得有效提升H2S和降低NO浓度的治疗效果。

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