炒制东北苍耳子Xanthium mongolicum化学成分研究

白玉华，张秀花，于 辉，韩成花，刘金成，于春月，康艳萍

哈尔滨医科大学大庆校区，黑龙江大庆 163319

苍耳属Xanthium L.植物全世界有20 多种，主要分布在北美州及中国各地，我国有三种及一个变种。苍耳属在民间主要用于散风除湿、通鼻窍、风寒头痛、鼻渊流涕、风疹瘙痒、湿痹拘挛等症[1]，苍耳子为植物苍耳的成熟带总苞的果实，用于利尿、催吐、前列腺疾病、肝炎和癌症[2]，收载于《中国药典》2010年版[3]。苍耳子的化学成分比较复杂，许多种类的化合物如苍耳苷、羧基苍耳苷、噻唑酮、倍半萜内酯、苍耳素等被报道存在于苍耳的茎、叶及果实中[4]。苍耳子的种子和仔苗有毒，可引起麻痹，大剂量使用苍耳子会引起致死性的肾病及肝功能衰竭，严重者甚至死亡[5]，故临床应用时常将苍耳子进行炮制以减小毒性[3]。炮制过程通常会影响化学成分及其组成，因此研究炮制后苍耳子的化学成分显得尤为重要。

1 仪器与试药

柱色谱用硅胶为青岛海洋化工生产（200～300 目），制备薄层色谱板为青岛海洋化工生产 （GF254 目）；核磁共振仪（BrukerAM400 型，瑞士）；所用有机溶剂为分析纯。

苍耳子于2009年9月采摘于哈尔滨医科大学校园内，经魏东华教授鉴定为东北苍耳Xanthium mongolicum，标本存放于中药标本馆，批号：20091115。

2 方法与结果

2.1 方法

2.1.1 炮制方法 取药材5 kg，置炒制用的铁锅中，用文火加热并不断翻炒至微黄色时，取出，放凉。将炒制好的药材经中药粉碎机粉碎成粗粉后待用。

2.1.2 提取方法 药材粗粉用40 L甲醇进行超声提取3次，每次1 h，过滤，合并滤液，经减压浓缩得黏稠的膏状物450 g，用少量水悬浮，依次用正己烷（450 ml×3 次）、氯仿（450 ml×3次）和甲醇（400 ml×3次）萃取，经浓缩分别得到正己烷提取物280.7 g、氯仿提取物78.9 g和甲醇提取物18.9 g。

2.1.3 分离方法 将氯仿提取物反复用开放柱色谱进行分离，用正己烷-氯仿、氯仿-甲醇溶剂系统梯度洗分别得到化合Ⅰ～Ⅳ。

2.2 结果

从炒制后东北苍耳子的氯仿提取物中共分离得到4个化合物，其结构鉴定数据如下：

化合物1：白色针状结晶，mp.137.8～138.3℃，Libermann-Burchard 反应阳性。 氢谱中显示 δ：5.36（1H，H-6），3.53（1H，m，H-3），其余氢谱数据及碳谱数据均与文献[6]报道的一致；与β-谷甾醇对照品共薄层展开，不同溶剂系统下Rf值完全一致，故可确定该化合物为β-谷甾醇。结构见图1。

化合物2：白色针状结晶，mp.150～151℃，Libermann-Burchard 反应阳性。 氢谱 δ：5.36（1H，H-6），3.53（1H，m，H-3），碳谱数据 δ：138.3（C-22），129.3（C-23），均与文献[7]报道的一致；与豆甾醇对照品共薄层展开，不同溶剂系统下Rf值完全一致，故可确定该化合物为豆甾醇。结构见图2。

图2 豆甾醇

化合物 3： 白色针状结晶，mp.302～304℃，Libermann-Burchard 反应阳性。1HNMR（CD3OD）δ：5.25（1H，br，s，H-12），3.60 （1H，dd，J=2.5，415 Hz，H-3），0.83～2.06（24H，m），1.18（3H，s，CH3），1.02 （3H，s，CH3），1.00 （3H，s，CH3），0.94 （3H，s，CH3），0.91 （3H，s，CH3），0.83 （3H，s，CH3），0.80（3H，s，CH3）共有 7 个甲基信号；13C NMR（CD3OD）δ：40.4（C-1），28.8（C-2），84.5（C-3），40.4（C-4），69.5（C-5），19.7（C-6），33.9（C-7），40.6（C-8），56.8（C-9），39.2（C-10），24.7（C-11），123.5（C-12），145.4 （C-13），43.0 （C-14），29.3 （C-15），24.0 （C-16），49.8（C-17），42.7（C-18），48.0（C-19），31.7（C-20），34.8（C-21），33.9（C-22），29.3（C-23），17.5（C-24），17.1（C-25），17.7（C-26），26.2（C-27），181.8（C-28），33.7（C-29），23.9（C-30），均与文献[8]报道的一致；与齐墩果酸对照品共薄层展开，不同溶剂系统下Rf值完全一致，故可确定该化合物为齐墩果酸。结构见图3。

图3 齐墩果酸

化合物 4：淡黄色粉末，1HNMR（CDCl3）：δ2.10（2H，S，H-2），2.34（1H，m），6.24（1H，DD，J=9.0，3.0 Hz，H-5），2.20（1H，ddd，J=14.0，3.0，3.0，H-6），2，70 （1H，d，J=8.0 Hz，H-7），4.40（1H，m，H-8），1.70 （1H，m，H-9），2.20 （1H，m，H-10），3.00（1H，m，H-11），1.23（3H，d，J=7.5Hz，H-13），1.06（3H，d，J=7.5 Hz，H-14），2.29（3H，s，H-15）。13NMR （CDCl3）144.5（C-1），147.2（C-2），124.4（C-3），197.7（C-4），139.1（C-5），25.7（C-6），45.8（C-7），84.7（C-8），36.7（C-8），28.9（C-10），39.8（C-11），177.9（C-12），14.1（C-13），19.3（C-14），29.3（C-15），氢谱、碳谱数据均与文献[9]报道的一致；鉴定该化合物为11-α，13-二氢苍耳亭。结构见图4。

图4 11-α，13-二氢苍耳亭

3 讨论

分离过程中谷甾醇与豆甾醇一起析出结晶，因为这两个化合物的结构只差一个双键，所以性质有些相似，从氢谱和碳谱的谱图中可以看出谷甾醇里混有没有双键的豆甾醇，故需要通过重结晶的方法将二者分离开。

另外从分离得到化合物来看，这四种物质均为首次从炮制后的东北苍耳子氯仿提取物中分离得到，β-谷甾醇、豆甾醇、齐墩果酸和11α-，13-二氢苍耳亭均存在未经炮制的苍耳属植物中，至于其他生物活性物质、毒性物质的组成还有待于进一步研究确定。

[1] 吴志瑰,褚晓兰,范崔生.苍耳的本草考证[J].中药材,2002,25(10):745.

[2] Kupchan SM,Eakin MA,Thomas AM.Tumor inhibitors-69-Structurecytotoxicity relationships among the sesquiterpene Lactones[J].J Med Chem,1971,14(12):1147-1152.

[3] 国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京:中国医药科技出版社,2010:151.

[4] 杨小录,王瀚,何九军,等.有毒植物苍耳的研究进展[J].绵阳师范学院学报,2010,29(5):75-79.

[5] 江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海科学技术出版社,1985:1071.

[6] 刘香,杨洁,郭琳,等.九头狮子草脂溶性成分的研究[J].贵阳医学院学报,2006,31(4):368-369.

[7] Castoa V,Bighelli A,Rezzi S,et al.Composition and chemical variability ofthe triterpene fraction ofdichloromethane extracts ofIsertia Hypoleuca Leaves[J].Industrial Crops and Products,2002,15:15-22.

[8] 张前军,杨小生,朱海燕,等.连钱草化学成分研究[J].天然产物研究与开发,2006,18(1):55-57.

[9] Mahmoud A.Xanthanolides and xanthane epoxide derivatives from Xanthium strumarium[J].Planta Med,1998,64:724-727.