非小细胞肺癌组织中Kindlin－2与Kiss－1表达的关系

江吕泉 高坤祥 郑 建 陈 建 吴 昊 陈林松 (武警江苏总队医院胸外科，江苏 扬州 225000)

非小细胞肺癌起源于肺泡上皮细胞和支气管黏膜柱状上皮细胞，其发展过程中机体多种基因和蛋白异常表达，并起促进作用〔1〕。Kindlin－2是黏着斑蛋白家族重要成员，在肿瘤中高表达，其可能具有调节整合素的作用，并促进细胞间黏附作用的改变〔2〕。Kiss－1是新发现的基因和蛋白，研究认为其是重要的肿瘤抑制基因〔3〕。本实验应用流式细胞术探讨非小细胞肺癌组织中Kindlin－2与Kiss－1的半定量表达，关注其相关性。

1 材料与方法

1.1 临床材料 唐都医院及本院2005年1月至2010年2月非小细胞肺癌术后留取的新鲜标本作为观察组，纳入均符合WHO关于非小细胞肺癌的诊断标准，并经病理学诊断医师确诊，患者随访资料完整。排除术前进行放、化疗的患者，共观察89例，其中男性49例，女性40例，年龄50～79岁，平均60.3岁。同时选取同期病理证实为正常的肺组织53例作为对照组，其中男性30例，女性23例，年龄49～78岁，平均60.4岁。两组在一般资料的比较中，无明显差异。

1.2 方法 Kindlin－2与Kiss－1蛋白均购自武汉博士德生物技术有限公司，应用Beckman Coulter公司生产流式细胞仪进行检测。具体步骤参照刘爱东等〔4〕应用的方法。实验均由同一主管技师完成，减少误差，严格质控。

1.3 结果判定标准 按照Mordve等提出的流式细胞学定量分析的方法，采用荧光指数(FI)表示Kindlin－2或Kiss－1蛋白表达的相对含量。计算公式为:FI=(非小细胞肺癌中蛋白Kindlin－2或Kiss－1表达的平均荧光强度 －对照样品平均荧光强度)/正常对照样品平均荧光强度。

1.4 统计学方法 应用SAS6.12统计软件，定量资料比较采用t检验，同时进行线性相关性分析。

2 结果

2.1 两组 Kindlin－2与 Kiss－1表达 Kindlin－2蛋白在观察组中的表达量明显高于对照组(P＜0.001)，Kiss－1在观察组中的表达量明显低于对照组(P＜0.01)，见表1。

表1 Kindlin-2与Kiss-1在观察组与对照组中的表达

2.2 Kindlin－2与Kiss－1蛋白的表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系 Kindlin－2与Kiss－1蛋白与非小细胞肺癌的有无淋巴结转移、胸膜侵犯及不同Ki67表达中的差别有统计学意义(P ＜0.05)，见表2。

表2 Kindlin-2与Kiss-1蛋白的表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系

2.3 非小细胞肺癌中Kindlin－2与Kiss－1蛋白表达的相关性

对观察组中Kindlin－2与Kiss－1的表达进行线性相关分析，结果显示Kindlin－2与 Kiss－1的表达具有负相关性(r= －0.46，P=0.023 5)。

3 讨论

非小细胞肺癌近年来其发病率、复发率和死亡率呈上升趋势。目前证实肿瘤的侵袭和转移与预后有关，其具体调节机制虽不明确，但是人们也发现了多种与转移相关的蛋白。Kindlin作为黏着斑蛋白家族，均与细胞内信号转导、细胞迁移、黏附及增殖有关，其中以Kindlin－2的功能最为广泛，其可能与整合素β1或转化生长因子具有内在的共同作用位点。恶性肿瘤中Kindlin－2高表达，有观点认为Kindlin－2是从整合素通路的角度促进肿瘤的进展〔5，6〕。Kiss－1作为一种抑癌基础，是应用微细胞介导技术在黑色素细胞株中发现的，定位于染色体1q32，包括4个外显子，编码产生54个氨基酸〔7〕，恶性肿瘤中Kiss－1低表达，使肿瘤从基因和蛋白水平失去了对肿瘤增殖及转移的抑制作用，肿瘤进展加速，恶性潜能升高〔8〕。

本实验提示非小细胞肺癌发生过程中，Kindlin－2与Kiss－1的改变均起着某种促进作用。实验结果显示Kindlin－2与Kiss－1的表达与肿瘤有无淋巴结转移、胸膜侵犯及不同Ki67的表达密切相关，由于以上因素均与肿瘤进展有关，同时与肿瘤的预后有关，因此提示Kindlin－2与Kiss－1蛋白不仅对肿瘤的进展有促进作用，还可能对判断预后有一定价值。本研究提示二者在肿瘤的进展中可能具有内在作用。Kiss－1可能通过调节细胞质内 NF－κB 蛋白的活性〔9，10〕，使其与 Kindlin－2 的结合降低，减少其合成，从而抑制肿瘤细胞的机动性、趋化性及侵袭性〔11〕，可这可能是二者协同作用的一个方面，但是其具体机体尚有待进一步研究。Kindlin－2还参与整合蛋白活化、肿瘤的细胞迁移和增殖，由于Ki67是当今观察增殖指数的重要标志蛋白，因此，Kindlin－2在不同Ki67表达率的差别也是Kindlin－2增殖作用的直接体现。也有观点认为Kindlin－2对肿瘤的血管新生有一定作用〔5〕，而 Kiss－1 对血管新生无明显的作用，此机制可能是Kindlin－2促进肿瘤进展的一个独立通路方向，与Kiss－1的表达无关。

1 Karapanagiotou EM，Dilana KD，Gkiozos I，et al.Metastin is not involved in metastatic potential of non－small cell lung cancer〔J〕.Med Oncol，2011;28(2):559－64.

2 熊 盈，龚小卫，姜 勇.Kindlin家族成员研究进展〔J〕.生物化学与生物物理进展，2010;37(12):1265－70.

3 Nicolle G，Comperat E，Nicolaïew N，et al.Metastin(KISS－1)and metastin－coupled receptor(GPR54)expression in transitional cell carcinoma of the bladder〔J〕.Ann Oncol，2007;18(3):605－7.

4 刘爱东，刘士生，许志萍，等.E－cadherin在胃癌中的表达及意义〔J〕.广东医学，2007;28(11):1806－7.

5 洪水翔，赖日勇，廖光宏，等.原发性肝癌中Kindlin－2蛋白对血管生成的作用〔J〕. 中国老年学杂志，2012;32(11):2229－30.

6 武文斌，张 擎，李 艳，等.急性髓系白血病Kindlins和血管生成素表达研究〔J〕.中国实验血液学杂志，2012;20(1):7－11.

7 Li N，Wang HX，Zhang J，et al.KISS－1 inhibits the proliferation and invasion of gastric carcinoma cells〔J〕.World J Gastroenterol，2012;18(15):1827－33.

8 Shengbing Z，Feng LJ，Bin W，et al.Expression of KiSS－1 gene and its role in invasion and metastasis of human hepatocellular carcinoma〔J〕.Anat Rec(Hoboken)，2009;292(8):1128－34.

9 刘爱东.Kiss－1在胃癌中的表达及意义〔J〕.现代中西医结合杂志，2011;20(19):2354－5.

10 要瑞莉，刘爱东，庞久玲.Kiss－1和基质金属蛋白酶－9蛋白在胃癌中的表达及意义〔J〕. 中国综合临床，2009;25(1):84－5.

11 Jung GY，Park YJ，Han JS.Mediation of Rac1 activation by kindlin－2:an essential function in osteoblast adhesion，spreading，and proliferation〔J〕.J Cell Biochem，2011;112(9):2541－8.