粉针无菌分装过程中影响粉针剂质量的因素

陈娥，吴育利

(海南海药实业发展股份有限公司，海南海口570204)

·药物与临床·

粉针无菌分装过程中影响粉针剂质量的因素

陈娥，吴育利

(海南海药实业发展股份有限公司，海南海口570204)

目的严格控制无菌分装的整个环境过程，确保药品产品质量。方法针对影响抗生素粉针剂质量的几个环境因素包括压差、温湿度、微生物污染、尘埃粒子数、包装材料进行实验分析，总结这几个因素对粉针剂质量有何影响。结果超出所规定的指标的各环境因素都会导致粉针半成品、成品质量检测不合格。结论应该严格控制各项规定指标，使其符合GMP要求。

粉针剂；压差；温湿度；微生物污染；包装材料

注射用无菌粉末又称粉针。临床前用灭菌注射用水溶解后注射，是一种较常用的注射剂，适用于在水中不稳定的药物，特别是对湿热敏感的抗生素及生物技术药物，本实验以注射用头孢西丁钠为例。

1 粉针质量的环境因素分析

1.1 压差、温湿度、微生物污染、尘埃粒子、包装材料对粉针的影响在亚洁净状态下做10批小样对注射用头孢西丁钠粉针成品进行考察，见表1。从表1中可看出所列举的5个环境因素对粉针质量都有影响，在亚洁净状态下做的10批小样不合格率都超过了10%，检测各因素对粉针质量到底有何影响，将做如下的实验进行具体分析。

表1 影响粉针成品不合格因素统计表

2 压差对粉针质量的影响

2.1 仪器与试剂微压差表，GWF-5J微粒分析仪；注射用头孢西丁钠，硫酸肼，乌洛托品。

2.2 方法

2.2.1 标准溶液的配制称取硫酸肼1.00 g，置于100 ml量瓶中，加水适量使溶解，并用水稀释至刻度，摇匀，放置4～6 h；取此溶液与等容量的10%乌洛托品溶液混合，摇匀，于25℃避光静置24 h，取该溶液15.0 ml放100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，见表2。

表2 标准溶液的配制(ml)

2.2.2 压差对粉针成品相关检测结果的影响在风量测定之后，将待测区域的所有门都关闭并开启房间中的排风机或除尘机，通过墙壁上安装的微压差表读出房间之间的压差，然后再通过5次风速、风量的改变再重新测定压差，将5次不同压差条件下生产的粉针小样进行溶液澄清度、可见异物和成品不容性微粒检测[1]，结果见表3。从以上6组数据可看出压差处于5.2 Pa以上的各项相关检测均符合国家药典标准，压差在5.2 Pa以下的成品质量不合格。

表3 压差对粉针成品相关检测结果的影响

3 温湿度对粉针质量的影响

3.1 仪器与试剂仪器：湿度计、温度计；试剂：注射用头孢西丁钠。

3.2 方法通过空调系统调整洁净室内温度，将在不同温度下生产的粉针小样作澄清度与粉末色泽检查，结果见表4。通过车间空调净化系统在洁净生产区进行6次调整，在风量、风压调整后，在待测的房间有代表性的工作区或中心点，用湿度计读出室内相对湿度值，然后在6次不同湿度条件下，按照我国医药工业洁净室(区)浮游菌的测试方法GB/ T16293-1996、医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法GB/T16294-1996规定的方法测定。分别取胶塞、西林瓶(10 ml)5个按干燥失重法进行检查[2]，结果见表5。分装半成品澄清度：溶液应澄清，如混浊，应小于1号标准浊度液。由实验数据可看出，温度为28℃以上时粉针半成品溶液澄清度已经大于1号标准浊度液，粉末色泽开始变黄；相对湿度为65%时，沉降菌已超出标准，胶塞、西林瓶水份及成品外观检测均不合格；温度28℃以下，相对湿度为65%下时，成品检测均合格。

表4 洁净室温度变化对粉针的影响

表5 洁净室(区)相对湿度对粉针的影响

4 微生物污染对粉针质量的影响

4.1 培养基无菌性实验材料：TSB/SCDM培养基(即胰酶咯胨大豆培养基)、西林瓶。方法：将灭菌后的TSB/SCDM培养基分装于50支西林瓶中，盖塞、封口后在30℃～35℃恒温培养一周。结果：西林瓶TSB/SCDM培养基中无任何微生物生长，可用于培养基模拟粉针分装试验。

4.2 培养基模拟粉针分装试验为了使模拟分装试验结果与实际生产状况更接近，将模拟分装试验的时间选择在一次正常的批分装生产后、区域熏蒸消毒之前。材料：乳糖(作模拟分装用无菌粉末)、TSB/ SCDM培养基(经无菌性试验检验合格)、10 ml注射器、西林瓶、分装样品3 000瓶。方法：将1.0 g乳糖分装到无菌西林瓶中，在用注射器将TSB/SCDM培养基8 ml注入瓶中，盖胶塞，封铝盖，在30℃～35℃恒温下进行微生物培养一周。结果及计算：在实际工作中可根据模拟分装中发现的污染瓶数、95%可信限控制上限进行计算，见表6。根据统计学概率计算方法，污染率计算公式为[3]：污染率%＝(95%可信限的控制上限/模拟分装的瓶数)×100%经检验，此次模拟分装实验污染瓶数为1，查表得95%可信限的控制上限为4.743 9，因此(4.743 9/3 000)×100%＝0.16%＞0.1%。

4.3 结论此次模拟分装并不符合污染率的可接受标准，证明微生物污染水平已超标，则应立即停止生产，对洁净室进行消毒灭菌。

表6 模拟分装污染瓶数、95%可信限控制上限、至少分装的瓶数的关系

5 尘埃粒子对粉针质量的影响

将在某一万级洁净生产区内在六次不同状态下测定尘埃粒子粒数[4]，然后将6种不同状态下的小样成品、半成品作抽样检查。

5.1 仪器与试剂尘埃粒子计数器试剂：注射用头孢西丁钠(1 g/瓶)、1号液、2号液。

5.2 方法在某一洁净室内，静态。洁净室温度为25℃，洁净室级别为万级，相对温度为47%，静压差为14 Pa下进行检测尘埃粒子对粉针的影响。结果见表7。

表7 不同尘埃粒子数时粉针相关检测结果

5.3 结论当≥0.5 μm的尘埃粒子个数达到286 902个/m3时，出现西林瓶可见异物检测不合格，而当≥0.5 μm和≥5 μm的粒子都超出检测标准时，成品质量都不合格。

6 包装材料对粉针质量的影响

用天然胶塞、丁基胶塞作为瓶塞对头孢西丁钠等4种抗生素粉针剂质量的影响进行了研究。

6.1 胶塞的透气性对粉针剂质量的影响[5-6]注射用粉末多采用天然橡胶塞，如果胶塞不紧则水分透过胶塞，而导致产品吸潮变质。近年来，人工合成的丁基胶塞开始在市场出现，其透气性比天然橡胶塞小十几倍。实验在相同条件下，不同种胶塞密封性不同对粉针剂质量的影响；用同一条件下洗涤、干燥灭菌的西林瓶，分装同一批注射用头孢西丁钠，再分别盖上丁基胶塞、天然胶塞压盖后不封蜡，放置在温度40℃，相对湿度为75%～90%的环境中进行对比实验，结果见表8。在相同条件下生产和贮存的粉针剂，使用天然胶塞的粉针剂外观、水分、色级及含量四项指标远远低于使用丁基胶塞的粉针剂，所以现在一些厂家已用丁基胶塞代替天然橡胶塞。

表8 不同胶塞对粉针质量的影响

6.2 胶塞、瓶子所含的水分程度对粉针剂质量的影响以10批理化性质较稳定的天然胶塞做实验，测其吸水性，测试情况见表9。由表9对比分析，天然胶塞的吸水率明显高于丁基胶塞，抗生素钠盐与钾盐均有吸湿性，入水后致使药品失效，因此天然胶塞对粉针严密性有很大影响，以丁基胶塞替代天然胶塞已成为迫在眉睫的问题。

表9 丁基胶塞和天然胶塞吸水率情况统计表(%)

6.3 压盖及封蜡严密性对粉针剂质量的影响取相同条件下分装的80万U注射用抗生素钠为样品，分铝盖不松动沾蜡、铝盖松动沾蜡、铝盖不松动不沾蜡、铝盖松动不沾蜡4种情况进行考察(都使用天然胶塞)，每种情况取300支，放置在温度40℃，相对湿度75%～90%的环境中，保存6个月，结果见表10。由表10可以看出，样品在高温、高湿的实验条件下贮存6个月，压盖及沾蜡严密度对粉针剂质量有很大影响，铝盖松动及不沾蜡(在生产过程中主要表现为漏蜡)都会引起粉针剂的结块、变黄，并且使用天然胶塞时，不沾蜡比铝盖松动对粉针剂质量的影响更大。

表10 压盖及粘蜡严密度对粉针剂质量的影响

7 讨论

洁净室内相邻不同的房间内都存在压差，因为压差隔离是防止洁净室内受到污染的一个重要手段，人员与物品的流动都会造成污染。根据GMP规定，相邻不同级别房间的压差绝对值应大于等于5 Pa(0.5 mm水柱)，由实验看出，压差大于5 Pa时，相关检测都符合中国药典规定，但压差＜6 Pa时，超出了本厂内控标准(≥10 μm的粒子应≥2 000个，≥25 μm的粒子应少于等于200个)，所以为了提高粉针的质量，压差维持在6.0 Pa以上能较好的控制成品的不溶性微粒。

无菌室温度、湿度的控制不仅应考虑防止微生物的生长，而且还应虑无菌室内操作者工作条件的舒适状况等。由实验结果可知，温度过高药粉容易变黄，稀释后溶液混浊，且人体易感闷热，出汗，造成环境的污染。温度过低人体易感寒冷。洁净室相对湿度(HR)的高低同样对药品与人体两方面都有影响，过低易产生静电，人体舒适感差；过高易长菌。所以，根据我国实际，冬夏温、湿度要求都应降低，全年温、湿度应在18℃～26℃与45%～60%范围内变化较合适，确保符合GMP要求。

评价无菌模拟分装试验结果的主要指标之一就是微生物污染水平，发达国家GMP一般明确要求控制生产各步的微生物污染水平，尤其对无菌制剂，产品最终灭菌或除菌过滤前的微生物水平必须严格控制。而微生物的特点是在一定的环境条件下会迅速繁殖，数量急剧增加，而且空气中存在的微生物能通过各种途径污染已清洁的设备。因此，为防止污染或降低污染发生的概率，在无菌室设计时应该注意提供方便有效的无菌室消毒条件，而且每个无菌粉针剂生产企业均应指定其无菌模拟分装验证制度，以保证无菌粉针剂分装工艺过程符合无菌粉针剂分装要求。

洁净室尘埃粒子数的多少对粉针成品不溶性微粒检测结果有很大的影响，人员的数量、动作幅度、走路的快慢等都会影响洁净室的尘埃粒子数，因此，洁净室应控制热源数量，且操作热源的动作应缓慢、平稳，应尽量避免不必的动作，减少产尘量。

在粉针生产过程中，胶塞的吸湿性及透气性、压盖及沾蜡的严密度对粉针剂质量的影响非常大，是引起粉针剂在有效期内结块、变黄的主要因素。如胶塞.瓶子水分偏高，其直接接触药粉而吸潮结块，一般生产条件，应控制胶塞水分≤0.05%，瓶子水分≤0.5 mg/只，另外包装加纸盒，以保证药品质量。因此，为了保证产品质量，保证人民用药安全，我们必须严格控制生产过程中对产品质量有影响的各种因素。为了减少粉针剂有效期内结块、变黄情况的发生，应保证生产中使用的胶塞弹性好，胶塞与西林瓶密封严，铝盖不松动，封蜡均匀、严密。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[Z].北京：化学工业出版社.2005

[2]国家医药管理局推行GMP,GSP委员会.药品生产验证指南[M].北京：中国医药科技出版社.2003

[3]张宏吉,张明贤.制药设备与工程设计[M].北京：化学工业出版社,2004：6

[4]杜滨,董艳峰.洁净室内尘埃粒子的影响因素[J].黑龙江医药, 2004,17(1)：31-32

[5]唐杰.抗生素粉针质量影响因素及解决办法[J].中国药业, 1999,8(4)：40.

[6]严幼达,顾惠敏.胶塞对抗生素粉针剂质量的影响[J].中国医药工业杂志,2003,34(4)：190-191

R944.1+1

B

1003—6350（2012）18—086—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.18.041

2012-06-26)

陈娥(1964—)，女，海南省东方市人，制药工程师，本科。