犬细小病毒病的血清学诊断及治疗试验
2012-08-25温翠萍
温翠萍
(山西省晋中市平遥县南政乡畜牧兽医站,平遥 031100)
犬细小病毒感染是由犬细小病毒引起的一种急性、热性传染性疾病。自然感染潜伏期一般为5~7 d。本病以出血性肠炎或心肌炎为主要特征,可分为肠炎型和心肌炎型2种,有少数病犬表现为混合型。青年犬表现精神沉郁,厌食,先吐后泻,呕吐物清亮、胆汁样或带血。随后6~12 d开始腹泻。腹泻较严重,病犬表现出腹泻疼感,病初体温升高可达40℃,粪便呈灰色或黄色,内含多量粘液,随着病情的发展,腹泻物呈现番茄样,腥臭难闻,最后可出现血便,此时病犬精神萎靡,可视粘膜苍白,胃肠道症状出现后24~48 h表现脱水和体重减轻等症状。临死前体温下降至常温下,尾部和后腹部污染粪便,肛门括约肌松弛。幼犬无明显的临床症状,发病急,病程短,只表现出食欲废绝、心跳加快、呼吸困难、心悸等症状就发生死亡。
1 材料与方法
1.1 试验动物
试验犬为晋中市平遥县南政宠物医院的50只患细小病毒病的门诊犬,患犬表现出犬细小病毒病的临床症状,腹泻、抑郁、厌食、体温升高等症状,结合CPV检测试剂盒(韩国BIOINDIST有限公司产品)检测,当C区和T区均出现红色线者判为阳性,以此认定为犬细小病毒感染。记录试验犬年龄、性别、品种、体重及畜主地址和联系方式等,详细收集患犬临床资料,追踪治疗后的效果。
1.2 血样采集
从患犬前肢臂头静脉采血2~3 ml,进行相关血常规检查后制备血清,用于测定数项生化指标(ALT、AST、Cr、CK、LDH、CHE、TBIL、DBIL、Na+、K+、Cl-、pH值和Ca2+)。
1.3 血液检查
1.3.1 血样处理
采集的血样分为2份,一份加1滴抗凝剂,作血常规检查;另一份血样以2 000 r/min离心15 min,取血清保存于-20℃ 冰箱备用。
1.3.2 血常规测定
按实验室血常规检查步骤以血球计数板分别作红细胞、白细胞计数。加有抗凝剂的血样室温静置适当时间后,吸取血样表层细胞在洁净载玻片上作涂片,自然干燥后用瑞氏染液染色30 s,加入缓冲液轻轻混匀再染5 min,油镜下观察并作白细胞分类计数。
1.3.3 血液生化指标测定
用全自动生化分析仪(荷兰威图公司产品,SELECTRA-E型),按产品使用说明测定血清的数项生化指标。
1.4 临床治疗与分组
(1)对症治疗组。中和病毒用犬用二联王注射液12 ml/只皮下注射,1次/日,连用3天。强心补液,增强免疫用林格氏液300raL、50%葡萄糖20 ml和10%葡萄糖酸钙20 ml混合后缓慢静脉滴注,1次/d,连用3 d。抗菌消炎,清热解毒用5%糖盐水l00 ml、头孢曲松钠0.2g、病毒唑0.1 g和地塞米松5 mg混合后1次静脉滴注,1次/d,连用3 d。腹泻严重者用5%碳酸氢钠75 ml缓慢静脉滴注。呕吐剧烈时可用爱茂尔止吐,2ml/只肌肉注射,呕吐轻微者不必止呕。止血用止血敏0.25 g/只肌肉注射,2次/日。
(2)血清治疗组。注射抗CP血清是CP最有效的疗法。在患病早期使用高免血清并结合对症治疗,高免血清用量为1~2ml/kg·bw,连用3d。
(3)单抗治疗组。在患病早期采用犬细小病毒单克隆抗体并结合对症治疗法治疗,腹股沟内侧肌肉注射单抗0.5~1 ml/kg·bw,连用3 d。
1.5 数据处理
相关数据采用x2检验作统计学分析,P<0.05判为差异显著。
2 结果
2.1 病犬血常规分析
50例病犬的红细胞、白细胞计数及白细胞分类计数情况列于表1。
表1 细小病毒病病犬红细胞、白细胞数及白细胞分类变化
2.2 病犬生化指标变化
全自动生化分析仪测得病犬的血清生化指标,其平均值详见表2。
表2 细小病毒病病犬生化指标及电解质变化
表2数据显示,患犬ALT、AST、Cr、CK、LDH、CHE、TBIL、DBIL、K+和pH值这些生化指标基本处于正常水平,Na+、Cl-、Ca2+浓度略微偏高。
2.3 不同临床治疗方案的疗效
比较3组临床治疗方案的疗效,结果见表3。
表3 犬细小病毒病病犬临床治疗效果比较
3 讨论
犬细小病毒病为急性传染病,其血液学指标似乎并未表现出规律性变化。患犬的红细胞、白细胞平均数低于正常参考值,但不同病犬个体的红细胞、白细胞计数变化不一,总体上表现为炎性发展及免疫力下降的趋势。患犬的ALT、AST、Cr、CK、LDH、CHE、TBIL、DBIL、K+和pH值这些生化指标大体正常,仅Na+、Cl-、Ca2+浓度略微偏高,可能与腹泻造成的脱水有关。引起各项血液学生化指标变化原因较为复杂,由于这些指标的变化在不同病例的表现不一,因而削弱了它的诊断意义,但掌握这些指标的走向有助于了解疾病的转归,在临床上仍具有参考价值。
值得注意的是病犬患病早期红细胞、白细胞数量等血常规指标,与犬细小病毒病的治疗效果有一定的关系,红细胞数低于或高于正常值,治愈率均会下降,而白细胞数增加则会提高治愈率。在临床上,犬细小病毒病常以白细胞显著减少为特征,白细胞数下降往往代表着机体抵抗力下降、免疫系统功能减弱。因此,白细胞数增加,会有助于提高治愈率。在各类白细胞中,病犬的嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、杆状细胞和单核细胞所占比重显著增高,中性分叶核细胞和淋巴细胞所占比重降低。嗜酸性粒细胞的主要机能在于缓解过敏反应和限制炎症过程,嗜碱性粒细胞则舒张局部炎症区域的小血管,增加毛细血管的通透性。本试验检测中虽然2者都有提高,但认为是由于病毒感染而造成炎症及过敏反应所致,对机体免疫系统的抵抗作用影响不大。
4 结论
患犬的红细胞、白细胞平均数低于正常参考值,但不同个体的红细胞、白细胞计数变化不一;患犬的生化指标大体正常,仅Na+、Cl-、Ca2+离子浓度略为偏高。本试验表明,采用高免血清结合对症疗法可取得最好的犬细小病毒病治疗效果;采用单抗结合对症治疗与单纯进行对症治疗的治愈率相当,均显著低于血清治疗组。