猴头菇多糖对TGF-β1抑制的T淋巴细胞增殖的影响

郭 焱，崔健丽，朱 娜

（1.长春中医药大学，吉林 长春 130117；2.吉林大学第四医院）

猴头菇多糖对TGF-β1抑制的T淋巴细胞增殖的影响

郭 焱1，崔健丽2＊，朱 娜1

（1.长春中医药大学，吉林 长春 130117；2.吉林大学第四医院）

＊通讯作者

猴头菇多糖对免疫系统的药理作用已有报道［1－4］，但多是有关动物免疫功能的研究，而对人类免疫功能影响的报道尚不多见。本实验从细胞水平研究猴头菇多糖对TGF－β1抑制的T淋巴细胞的逆转作用，为临床辅助治疗肿瘤提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 材料猴头菇多糖、TGF-β1、淋巴细胞分离液、PHA、MTT等试剂均购自百赛生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 人外周血T淋巴细胞的分离 取正常人静脉抗凝血10ml，淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞（PBMC）。PBMC经PBS洗涤3次后，加RPMI 1640完全培养液，于无菌培养皿黏附贴壁培养6 h，收集非贴壁细胞，即为淋巴细胞，用含100ml／L胎牛血清的RPMI1640培养液调整细胞密度为5×108／L，备用。

1.2.2 MTT法检测猴头菇多糖对TGF－β1抑制下T淋巴细胞增殖的作用 设对照组、TGF-β1组、猴头菇多糖组。取密度为5×108／L的备用细胞，接种于96孔培养板，每孔100μl（含细胞数为5×104）。然后，对照组加100μl含100ml／L胎牛血清的RPMI1640培养液，TGF-β1组加入100μl含 TGF－β1的培养液，猴头菇多糖组加入100μl含TGF-β1和含猴头菇多糖的培养液，每组均设3个复孔，定容为200 μl，置CO2培养箱中分别培养24h、48h、72h，之后各组加PHA（终浓度5mg／L）继续孵育42h。于实验终止前每孔加入5g／L MTT10μl，继续培养6h，弃上清液，每孔加入100μl DMSO，充分震荡后，37℃孵育1h，用酶标仪于570nm波长测定A值。

细胞增殖率＝ （实验组平均A值／对照组平均A值）×100%。

1.2.3 统计学分析 实验数据用SPSS软件进行方差分析两两比较，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

经TGF－β1作用不同时间后，T淋巴细胞的增殖受到抑制，猴头菇多糖与TGF－β1共同作用后，T淋巴细胞的增殖率有了不同程度的回升（P＜0.01），但仍低于正常（图1）。

图1 猴头菇多糖对TGF-β1抑制的T细胞增殖的影响

3 讨论

多糖类成分抑制肿瘤生长已越来越受到人们重视。多糖作为药物其细胞毒性小，在肿瘤治疗时，它不像一般化学药物直接杀伤肿瘤细胞，而是作为一种生物反应调节剂，促进细胞和体液免疫反应，达到抑制和消灭肿瘤细胞的效果。所以寻找高效生物反应调节剂是当今肿瘤免疫治疗的主要方向之一［4］。本实验结果显示，猴头菇多糖可使TGF-β1抑制的人T淋巴细胞功能有所恢复，增强机体的细胞免疫。

TGF-β1是介导肿瘤免疫逃逸最有效的免疫抑制分子，可明显抑制T淋巴细胞增殖。T淋巴细胞介导的细胞免疫在抗肿瘤方面中起到很重要的作用，肿瘤细胞分泌的TGF－β1对T淋巴细胞的抑制成为肿瘤免疫逃逸的机制之一，如果能够打破肿瘤对T淋巴细胞的这方面的抑制，就可以重新恢复机体一定的T淋巴细胞免疫功能，增强对肿瘤的杀伤作用［5，6］。

本研究结果可为猴头菇多糖临床辅助治疗肿瘤的应用提供理论依据。

［1］樊伟伟，黄惠华.猴头菇多糖研究进展［J］.食品科学，2008，29（1）：355.

［2］徐杭民，谢志慧，张蔚羽，等.猴头菇多糖的免疫调节作用［J］.中国中西医结合杂志.1994，14（7）：427.

［3］成 静，祝寿芬.大刺猴头（88）多糖的免疫调节功能［J］.卫生毒理学杂志，2001，15（3）：165.

［4］聂继盛，祝寿芬.猴头多糖抗肿瘤及对免疫功能的影响［J］.山西医药杂志，2003，32（2）：107.

［5］刘晓霞，陈剑华，陈育民，等.八珍汤对TGF－β1抑制的T淋巴细胞增殖及其活化影响［J］.细胞与分子免疫学杂志，2009，25（11）：1053.

［6］Kemeny DM，Macary PA.The growiong comp lexity of TGF2beta as aTcell regulator［J］.Immunology，2005，114 （4）：459.

1007－4287（2012）01－0048－02

2010－07－24）