LABSTAR 50全自动血液细菌培养仪性能评价

庞 超 周俊杰 刘 玮 梅振玉 张 敏 张丽君

目前，随着医疗卫生事业的发展，医疗技术水平不断提高。然而，随着各种诊断治疗手段与日俱增(如器官移植、抗肿瘤药物、广谱抗生素、免疫抑制剂的广泛使用，各种介入性检查治疗、静脉内高营养及其他导管留置等)，与此同时，也增加了菌血症、败血症等病症的发生。菌血症和败血症发病时间迅速，病死率较高。近20年来，血液感染的发生率明显增加，Maki等[1]研究显示，已由70年代的6%上升至目前的13%(不包括相当一部分由厌氧菌感染所导致的菌血症和败血症)。由于菌血症和败血症是临床上严重危及患者生命的疾病，病死率高达17.9%～27.8%[2-3]，而血液细菌培养是确立菌血症和败血症诊断的重要依据，对于严重感染性疾病的患者能否有效的治愈，很大程度上决定于及时准确的细菌培养报告。而过去传统的手工细菌培养方法，时间长(8 d甚至更长)、效率低、准确性差，远不能适应现代临床医疗诊治的需要，因此先进的全自动培养系统在医院的使用，对之前常采用的人工细菌培养阳性率低、培养时间长及严重耽误临床冶疗的现象得到了很大的改观。

LABSTAR 50全自动血液细菌培养仪是安徽省“十五”科技攻关项目，此项目开创了该类产品填补国内空白及可替代进口产品的新局面。同时，应用了最新的科技成果，使Labstar 50的综合性能得到了全新的提高。标本培养所需时间和提高阳性率等都有了新的突破，阳性标本在24 h即可获得报告，阳性标本最快发现时间≤6 h，极大缩短了患者的诊治时间，提高病床周转率，提高医院的经济效益。

1 LABSTAR 50全自动血液细菌培养仪基本原理

LABSTAR 50全自动血液细菌培养仪采用连续荧光法和显色法在临床上快速检测血液中细菌与真菌的全自动血液培养系统，采用连续荧光法和显色法在临床上快速检测血液中细菌与真菌的全自动血液培养系统，其基本原理是微生物在培养基中消耗其中的养分并释放出代谢物质NADH、NADPH等，激发培养基内含有的荧光指示剂发光，通过仪器内的荧光探测器检测，并经过电脑的分析和运算得出培养结果，并作出相应的分析报告。同时瓶底显色技术的应用更大程度上避免了标本的假阳性和假阴性。

2 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 标本来源

临床标本菌株由安徽医科大学第一附属医院检验科提供，并经西门子 Microscan Walkaway-40全自动细菌鉴定仪鉴定确认：大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、脑膜炎奈瑟菌、A群化脓性链球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、白色念珠菌；标准菌株：ATCC25922大肠埃希氏菌、ATCC25923金黄色葡萄球菌、ATCC27853铜绿假单胞菌，购买自卫生部临检中心。

2.1.2 仪器

LABSTAR 50全自动血液细菌培养仪由山东鑫科生物科技股份有限公司生产，配套专用培养瓶(成人瓶、儿童瓶、厌氧瓶)；BACTEC 9120全自动血液细菌培养仪[4，9-10](美国BD公司生产)，配套专用培养瓶(成人瓶、儿童瓶、厌氧瓶)用标准菌株和已知临床菌株按不同的浓度接种培养瓶比较最低检测灵敏度、最短报警时间，并对其结果进行比较，评价LABSTAR 50全自动血培养仪性能及临床适用性。

2.2 方法

2.2.1 菌液制备

(1)每种细菌均先以无菌生理盐水，用比浊仪调制成1.0麦氏单位的菌悬液，再制成不同稀释度(5 cfu、30 cfu)的测试样品。同时以平皿琼脂法进行菌落计数。

(2)按照血培养操作规范[5]、血培养的原则和规程[6]，将不同稀释度的测试样品1 ml与5 ml新鲜无菌羊血混合后加入待测血培养瓶。同时用无菌生理盐水1 ml与5 ml新鲜无菌羊血混合后加入血培养瓶，作为阴性对照同时培养5 d；阳性瓶需转种血平板和巧克力平板确认原始菌株[7]。

2.2.2 结果判读

检测最低灵敏度(最低检测细菌数)≤5 cfu；阳性报警时间符合率(在3 h内)≥90%。

3 结果

3.1 检测最低灵敏度

接种量在10～30 cfu的菌株14种，分别以标准瓶、儿童瓶、成人瓶测试，LABSTAR 50与BACTEC 9120均能阳性报警，符合率为100%。

接种量在1～5 cfu的菌株14种，分别以标准瓶、儿童瓶、成人瓶测试，共接种42瓶，其中Labstar 50标准瓶报警12例、儿童瓶报警13例、成人瓶报警13例；BACTEC 9120标准瓶报警13例、儿童瓶报警13例、成人瓶报警12例，两者不符合2例，符合率为95.24%。总符合率为97.62%(见表1)。

表1 检测时间的符合率

3.2 检测时间

4 讨论

各种血培养瓶对常见于血液的细菌均能够培养出并报警；未发现假阳性、假阴性。多数细菌种类的最低检测灵敏度可达1～5 cfu，与相关文献报道的菌血症病人血液中含菌量基本一致[8]。

部分菌株接种量≤5 cfu时不生长，且与BACTEC 9120对照的结果并不完全一致，分析原因：由于稀释至10-8后，菌液相对浓度非常低，在菌液取样为1 ml时，可能由于菌液不均匀和取样异常而没取到细菌(或细菌死亡)。

LABSTAR50阳性报警时间与BACTEC 9120对照，没有显著差异。

LABSTAR50全自动培养仪在安徽医科大学第一附属医院检验科经过与BACTEC 9120全自动血培养仪的性能对照试验表明，LABSTAR50全自动血培养仪在主要性能方面上达到了进口同类产品的技术指标，实现了全封闭在线自动培养和检测，降低了污染率，提高了检测阳性率，缩短了培养时间，具有较好的灵敏度和阳性率；培养瓶种类齐全(标准瓶、儿童抗生素中和瓶、成人儿童抗生素中和瓶、厌氧瓶)能够满足我国临床血液细菌培养对自动化快速培养的要求。

[1]Maki DG , Weise CE, Sarafin HW. A semiquantitative culture method for identifying intravenous-catheter related infection[J]. N Eng J Med,1977,296(23):1305-1309.

[2]Martin GS , Mannino DM, Eaton S , et al.The epidemiology of sepsis in the United States from 1979 through 2000[J]. N Engl J Med,2003,348(16):1546-1554.

[3]王瑶,徐英春,谢秀丽,等.两种血培养系统的需氧与厌氧瓶对模拟菌血症标本检测能力的对比研究[J].中华检验医学杂志,2007,30(5):582-587.

[4]许淑珍,张淑兰,陈力.Bactec9120血培养系统检测细菌影响因素的探讨[J].中华检验医学杂志,1997,20(5):272-274.

[5]徐英春,倪语星.血培养操作规范[M].上海:上海科技出版社,2002.

[6]CLSI临床检验标准编译小组.CLSI M47-A,血培养的原则和规程[M].北京:中华检验医学杂志,2010:10.

[7]童明庆,沈然,王辉,等.YY/T 0656-2008自动化血液培养系统[M].北京：中国标准出版社,2009:6.

[8]Haimi-Cohen Y, Vellozzi EM, Rubin LG. Initial concentration of Staphylococcus epidermidis in simulated pediatric blood cultures correlates with time to positive results with the automated,continuously monitored BACTEC blood culture system[J]. J Clin Microbiol,2002,40(3):898-901.

[9]席云,肖刚,吴坚,等.BACTEC 9120全自动血培养系统应用评价[J].国际医药卫生导报,2004,10(22):90-91.

[10]伍海英.BD BACTEC9120全自动血培养仪阳性结果分析[J].检验医学与临床,2010,7(2):128-129.