高效液相色谱法分析甘草炮制前后化学成分的变化

石敏娟，高锦成，王卫峰，秦明莉，杨 柳

(1.陕西省中医药研究院，陕西 西安 710003; 2.陕西省西安市第四医院，陕西 西安 710003;3.陕西省西安冶金医院，陕西 西安 710003)

甘草是豆科植物甘草 Glycyrrhiza uraienxis Fisch的根及根状茎，性味甘平，能调和诸药，为常用中药[1]，始载于《神农本草经》，列为上品[2－4]。其主要有甘草、蜜炙甘草两种炮制品[3]，现代药理学研究表明，二者调节免疫的作用存在明显差异，蜜炙甘草作用显著强于甘草[5]。孙付军等[6]研究表明，甘草蜜炙后可增强补益功能。笔者用高效液相色谱法研究甘草炮制前后化学成分的变化，以探讨中药炮制的合理性、科学性。

1 仪器与试药

Waters 2690型高效液相色谱仪(DAD二极管阵列检测器，美国Waters公司);台式离心机(上海安亭科学仪器厂);电子天平(德国Sartorius);控温电热套(北京科伟电子仪器公司)。甘草、蜜炙甘草，均购自北京同仁堂西安店，经陕西省中医药研究院王卫峰副主任药师鉴定为豆科植物胀果甘草 Glycyrrhiza inflata Batal的干燥根及根茎;甲醇(fisher)，水(去离子水)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Diamond C18柱(200 mm × 4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇(A)－水(B)，梯度洗脱(表 1);柱温:30℃;流速:1 mL/min;检测波长:254 nm;进样量:30 μL。

2.2 供试品溶液制备

精密称取甘草、炙甘草各1.0 g，加入30倍蒸馏水回流提取60 min，过滤，提取液分别浓缩至1 mL。将制备好的两种药液3000 r/min离心10 min，即得供试品溶液，微孔滤膜过滤后测定。

2.3 高效液相色谱分析结果

结果见图1。可见，炙甘草的色谱图保留了甘草的大部分特征峰，但是23，24 min时甘草的2个特征峰消失，而在29 min出现1个新的特征峰。

3 讨论

生甘草性味甘、平，炙甘草甘、温。生用治疗咽喉肿痛、痈疽、解药毒或食物中毒，炙用治疗脾胃虚弱、食少、腹痛便溏、劳倦发热、肺痿咳嗽、心悸、脉结代[7]。传统中医理论认为，甘草蜜炙前后药效学存在一定变化，本研究结果从化学成分变化的角度解释了这种药效学的差异。

表1 流动相梯度洗脱表

图1 高效液相色谱图

蜂蜜的化学成分以还原糖为主[8]，能防止或减少药材中有效成分氧化变质。此外，甘草在蜜炙过程中需要加热，这两个因素可能是造成色谱图差异的主要原因。

今后，笔者将继续研究，从根本上阐明甘草蜜炙的原理，证明其科学性。

[1]孙 鹏.甘草化学成分研究[J].中国医药指南，2010，30(8):226－227.

[2]刘 磊，吕冬梅，杨 薇.炮制因素对甘草中有效成分甘草苷和甘草酸的影响[J].徐州医学院学报，2009，29(10):637－640.

[3]朱卫星，李爱光，陈 方，等.蜜炙甘草炮制工艺的研究进展[J].时珍国医国药，2005，16(10):967.

[4]王存琴，龙泉江.甘草炮制的文献研究[J].甘肃中医，2007，20(3):42－44.

[5]王明喜，石志强.生甘草炙甘草临证应用考辨[J].实用中医内科杂志，2005，19(4):383.

[6]孙付军，周 倩，王春芳，等.甘草炮制前后药效学比较[J].中国实验方剂学杂志，2010，16(14):115－118.

[7]黄泰康，丁志遵，赵守训.现代本草纲目[M].北京:中国医药科技出版社，2001:662.

[8]闫玲玲，杨秀芬.蜂蜜的化学组成及其药理作用[J].特种经济动植物，2005，2:40－41.