雏鸡喹乙醇中毒血液生化指标测定

2012-06-29刘沫飞徐世文吴发兴曲志娜

动物医学进展 2012年9期

刘沫飞，徐世文，吴发兴，李蕾，，吴宪，曲志娜＊

（1.东北农业大学，黑龙江哈尔滨 150036；2.中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266000；3.齐齐哈尔市动物医院，黑龙江齐齐哈尔 161000）

喹乙醇（olaquindox）属喹啉类药物，因其具有抗菌促生长作用且价格低廉，曾经在养殖业中作为饲料添加剂被广泛应用[1]。但鸡对喹乙醇敏感，易发生中毒，并造成鸡只死亡或禽产品喹乙醇残留过量而危及公共卫生健康[2]。目前，有关中毒症状及组织残留方面的报道较多，胡小权等[3]报道喹乙醇急性中毒的临床症状主要有，病禽突然精神不振，不愿活动，羽毛松乱，采食减少或废绝，成半瘫痪或全瘫状态；流涎，排黄色水样稀粪；鸡喙、冠、颜面及鸡趾呈紫黑色，呼吸困难，蛋鸡产蛋量急剧下降。孙永学等[4]报道剖检可见消化道尤其是十二指肠弥漫性出血，肝肿大，质脆，心冠脂肪及心外膜有出血点，泄殖腔严重出血。王涛等[5]报道剖检可见，输尿管有尿酸盐沉积。腺胃充血肿胀，乳头呈褐色，黏膜呈黄色，部分脱落。肌胃角膜下有出血小点及局灶性溃疡。急性中毒时对其血液生化指标的影响却报道较少，曾振灵[6]用高效液相色谱法证实喹乙醇在中毒鸡的肝肾组织中有残留。本文通过检测雏鸡喹乙醇急性中毒时血清无机离子（Ca2＋、PO43－、Na＋、K＋）和肝功能等生化指标，探讨喹乙醇急性中毒对其的影响，为研究喹乙醇中毒机理及其安全评价提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验用动物健康且体重相近的5日龄伊莎公鸡雏200只。

1.1.2 试剂喹乙醇，含量＞98%，购自湖北广济制药有限公司；钙离子（Ca2＋）检测试剂盒、磷离子（PO43－）检测试剂盒、钠离子（Na＋）检测试剂盒、钾离子（K＋）检测试剂盒、谷草转氨酶（AST／GOT）测定试剂盒和谷丙转氨酶（ALT／GPT）测定试剂盒，均购于南京建成科技有限公司；总蛋白（TP）试剂盒、白蛋白（ALB）试剂盒和碱性磷酸酶（ALP）试剂盒，购于长春汇力生物技术有限公司。

1.2 方法

1.2.1 动物分组与采样将健康且体重相近的5日龄伊莎公鸡雏200只，随机分为试验组和对照组，对照组饲喂基础饲粮，试验组饲喂基础饲粮＋喹乙醇150mg／kg。在染毒后的第5、10、15天进行心脏采血，常规分离血清，置于4℃冰箱，待用。

1.2.2 测定方法使用钙离子（Ca2＋）检测试剂盒、磷离子（PO43－）检测试剂盒、钠离子（Na＋）检测试剂盒、钾离子（K＋）检测试剂盒、谷草转氨酶（AST／GOT）测定试剂盒和谷丙转氨酶（ALT／GPT）测定试剂盒，总蛋白（TP）试剂盒、白蛋白（ALB）试剂盒和碱性磷酸酶（ALP）试剂盒对血清进行检测。测定方法均按照试剂盒说明书操作来测定它们的浓度。

1.2.3 数据处理所有数据用SPSS15.0进行统计分析。用单因素方差分析方法（ANOVA）对三个生长阶段，不同组别鸡血清中各离子含量进行组间差异的统计学分析，各组数据均以¯x±SD表示。

2 结果

2.1 血清Ca2＋、PO43－、Na＋、K＋含量测定结果

由表1可以看出，Ca2＋在各时间点，试验组含量都低于对照组，15d差异显著（P＜0.05）。PO43－含量在第5d，试验组高于对照组，差异不显著（P＞0.05），10d和15d，试验组含量低于对照组，15d差异显著（P＜0.05）。Na＋在各时间点，试验组含量都低于对照组，15d差异显著（P＜0.05）。K＋在各时间点，试验组含量都高于对照组，15d差异显著（P＜0.05）。

2.2 血清ALB、TP、ALP、GOT、GPT含量测定结果

由表2可以看出，ALB在各时间点，试验组含量都低于对照组，15d差异显著（P＜0.05）。TP在各时间点，试验组含量都低于对照组，10d和15 d，试验组与对照组差异显著（P＜0.05）。ALP在各时间点，试验组含量都高于对照组，差异都不显著（P＞0.05）。GOT、GPT在各时间点，试验组含量都高于对照组，15d差异显著（P＜0.05）。

表1 血清Ca2＋、PO43－、Na＋、K＋离子含量测定结果Table1 The determination result of Ca2＋，PO43－，Na＋，K＋in serum

表2 血清 ALB、TP、ALP、GOT、GPT含量测定Table2 The determination results of ALB，TP，ALP，GOT，GPT in serum

3 讨论

据有关文献报道[7]，喹乙醇中毒的发生有两种情况，一种是一次性大量摄入而产生的急性中毒；另一种是按常规剂量饲喂，因饲喂时间过长而产生的蓄积性中毒。据董漓波报道[8]，鸡内服喹乙醇的半数致死量（LD50）为304mg／kg，故本文中应用的一次内服150mg／kg，已达到鸡中毒水平。据孙永学报道[9]，喹乙醇的吸收半衰期为0.63h±0.26h，分布半衰期为1.12h±0.34h，消除半衰期为2.26h±3.02h，说明药物的吸收分布比较快，但清除比较慢，从而延长了喹乙醇在机体内的滞留时间。喹乙醇易产生蓄积性中毒，本试验结果显示，在染毒后5 d和10d，试验组血清中Ca2＋、PO43－、Na＋、ALB、TP、ALP、GOT、GPT含量与对照组差异不显著，在染毒后15d，试验组与对照组差异显著，从而证实喹乙醇的蓄积毒性。

正常情况下，体内的各种微量元素之间保持着一定的比例关系和浓度范围，各种微量元素之间有协同、颉颃作用，微量元素之间的协同与颉颃关系，直接影响着微量元素乃至整体营养素的代谢与利用。喹乙醇中毒作用主要是损伤肾上腺[10－11]，中毒畜禽因肾上腺受损，皮质激素（醛固酮类激素）分泌紊乱，导致体内电解质代谢障碍[12]，从而引起组织器官出血、变性、坏死等。本试验结果显示，喹乙醇中毒时，血清Ca2＋、PO43－含量降低，可能是喹乙醇中毒损害肾脏，继发于肾小管的损伤所致；血清中Na＋含量降低，K＋含量升高，可能是喹乙醇中毒导致肾上腺皮质损伤使醛固酮分泌减少[12]，从而导致低血钠和高血钾。

谷草转氨酶和谷丙转氨酶是对肝脏疾病的诊断、病变程度的估计和疾病治疗前后对比的一向较为重要的检验项目。它们存在于各个脏器，主要在肝脏。正常时血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶的含量很少，当肝脏患有疾病而处于病理状态时，肝细胞受到破坏，肝细胞中的谷草转氨酶和谷丙转氨酶则大量释放至血清中，因而使血清中的谷草转氨酶和谷丙转氨酶含量升高[13]。汪开毓等[14]试验结果显示，鲤鱼喹乙醇中毒时GOT和GPT含量都升高，本试验结果显示雏鸡喹乙醇中毒时，GOT和GPT含量都升高，与其试验结果一致，推测可能是因为喹乙醇中毒对肝脏造成损伤，导致这两种酶进入血液，引起血清中GOT和GPT含量升高。

碱性磷酸酶（ALP）的活性测定是临床上最常见的测定项目之一。血液中的ALP主要来自于肝脏和骨骼，因此在这些器官发生病变时血清ALP活力会明显增高。ALP活力测定可作为诊断某些疾病的辅助指标。郭小权等报道[15]，崇仁麻鸡喹乙醇中毒时鸡体内的血清碱性磷酸酶活性有上升趋势，本试验采用伊莎公鸡雏所得结果与郭小权等试验结果相一致。喹乙醇中毒能引起肝脏损伤[16]，导致碱性磷酸酶进入血液，引起碱性磷酸酶含量升高。

李文平等[17]试验结果显示，喹乙醇中毒时鸡的血清中总蛋白、白蛋白含量有降低趋势，本试验结果与其一致。肝脏疾病时肝脏合成蛋白质的功能发生障碍，从而引起血清中蛋白含量的改变；而炎症、肝细胞破坏和抗原性改变，刺激免疫系统而使血清中球蛋白含量改变，以及由此引起的血清中白蛋白／球蛋白比率的改变。喹乙醇中毒时肝肾功能损害，机体蛋白质合成出现障碍和蛋白质从肾脏排出发生紊乱，从而导致血清中蛋白质含量降低。

[1]邓云波，段苏华，陈启友.喹乙醇的特性及其规范合理使用[J].湖南畜牧兽医，2004（1）：14－16.

[2]谢麟.喹乙醇的安全性毒理学评价与合理应用[J].兽药与饲料添加剂，1999（4）：25－27.

[3]郭小权，胡国良，刘明生.喹乙醇及其在畜禽养殖中的应用[J].江西饲料，2000（6）：13－15.

[4]孙永学，曾振玲.家禽常见中毒病及其防治[J].养禽与禽病防治，2000（12）：10.

[5]王涛，陈广仁.鸡喹乙醇中毒[J].中国家禽，2000，22（1）：24.

[6]曾振灵.高效液相色谱法证实鸡喹乙醇中毒[J].中国兽医学报，1994（12）：394－397.

[7]Food and Agriculture of the Unition Nations.Residues of veterinary drugs in animals and foods[J].FAO Food and Nutrition Paper，1999（4）：25－27.

[8]董漓波.喹乙醇对鸡的急性毒性试验[J].动物毒物学，1989，4（1）：30－31.

[9]孙永学，冯淇辉，董漓波.喹乙醇在鸡体内的毒物动力学及其生化毒性研究[A].中国畜牧兽医学会第十届全国会员代表大会暨学术年会论文集：兽医卷，北京：中国农业大学出版社，1996：330－334.

[10]向兰.实验性肉用雏鸡喹乙醇急性、亚急性中毒的病理形态学研究[J].西南民族学院学报，1996（2）：169－174.

[11]孙永学.喹乙醇在鸡体内的毒物动力学及其生化毒性和病理学研究[J].畜牧兽医学报，1998（5）：438.

[12]叶继丹，刘红柏，赵吉伟，等.喹乙醇对鲤腮组织Na＋，K＋，－ATP酶活性及血浆生化指标的影响[J].华中农业大学学报，2005（4）：197－201.