“生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验改进

毛文艳　李岩　史慧玲

生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的鉴定实验，是学生进入高中后的第一个生化实验。高一新生的思维活动正以形象思维为主向抽象思维为主过渡，通过教师对实验原理的讲解，他们迫切希望通过自己的实际操作进一步认识生命的本质。但在实际操作过程中却遇到很多问题，而且整个实验过程需要的仪器和药品也较多，操作步骤较为复杂，所需时间长，一节课完成本实验的难度较大，所以下面探索用新的方法来做该实验，以便提高实验效率，缩短实验时间，达到良好的实验效果。

1 还原糖的鉴定

1.1 原实验的不足

（1）教材实验材料选取苹果或梨，但是苹果组织液必须临时制备，不能长时间保存。因苹果多酚氧化酶含量较高，组织液很易被氧化成褐色，将反应产生的颜色掩盖。如果选择梨，我校共20多个班级，每班60人左右，成本太高。

（2）需要水浴加热，如果教师实验之前不准备好热水会使实验所需要的时间更长。

（3）没有对照实验，没有对照怎么能证明水浴加热后的砖红色沉淀就是还原糖还原而成，而不可能是Cu（OH）₂自身分解产生的呢？

（4）很多学生对斐林试剂要求“等量混匀，现用现配”存在疑问。

1.2 实验改进

（1）材料改进：选择廉价易得的白洋葱，用其制备的组织样液如果当天用不完可以储备起来第二天使用，不变色而且仍然能取得良好的实验效果。

（2）操作改进：将白洋葱老皮去掉，将鳞片叶切成小块放人研钵中并加入少量石英砂直接挤汁制备组织样液，一般一组只需一片白洋葱鳞片叶，一节课15个实验小组只需2-3个白洋葱，而且要求每组学生自己动手制备组织样液，提高了学生的动手能力和合作能力。

（3）增加对照组：A组：5%葡萄糖2mL+斐林试剂2mL；B组：白洋葱组织样液2mL+斐林试剂2mL；C组：5%葡萄糖2mL+斐林试剂甲液1mL+斐林试剂乙液1mL；D组：5%葡萄糖2mL+斐林试剂乙液1mL+斐林试剂甲液1mL；

（4）水浴温度为90℃，实验现象可较快出现，节约时间，和沸水浴相比，危险性较小。

1.3 实验结果

A、B组对照说明白色洋葱中富含可溶性还原糖，A和C、D对照说明斐林试剂中甲乙液的先后加入顺序不影响实验结果，只要保证等量加入即可，所以我们实验过程中可以不用单独拿出来一个试管做等量混匀用，节省了时间。

2 脂肪的鉴定

2.1 原实验的不足

（1）需要手工切片和利用显微镜观察，在实验过程中存在着花生子叶不容易切薄、酒精容易使脂肪滴溶解、实验效果差的问题。

（2）广大基层中学显微镜缺少或仅有的显微镜显像性能较差，进行该实验有困难。

（3）在学生对生物染色剂的染色特性了解不深的情况下，很难指出显微镜下哪些黄色或红色的东西就是脂肪。

2.2 实验改进

（1）实验材料：清水、植物油、花生、松子。

（2）仪器用具：定性滤纸、胶头滴管。

（3）试剂：质量分数为0.2%的苏丹Ⅲ染液。

（4）实验操作程序：

①在滤纸上等距分组编号A（清水）、B（植物油）、C（花生）、D（松子）；

②分别滴加一滴水、食用油于相应处，花生子叶和松子在相应处反复擦；

③分别滴加一滴苏丹Ⅲ于4处染色3min；

④对比观察实验现象，得出结论。

2.3 实验结果

A处只有红色，B处出现橘黄色的油滴，C、D都有橘黄色出现，证明花生含有脂肪，松子的脂肪含量要比花生还丰富，实验现象更明显，可供有条件的学校选择使用。

3 蛋白质的鉴定

3.1 原实验的不足

教材中叙述的制备黄豆组织样液的方法非常麻烦，如果用鸡蛋清，必须按要求稀释，否则影响实验效果，而且实验后易粘住试管壁不易洗刷。

3.2 实验改进

将实验材料改为熟鸡蛋清（蛋白质变性后虽然空间结构被破坏了，但是肽链问的肽键依然存在，使学生进一步理解双缩脲试剂实质是与肽键发生反应），为了使反应充分，可对熟鸡蛋清进行研磨，白色的蛋清与实验后的紫色形成鲜明对照，大大节省实验时间和操作难度，并留有原来实验材料作为对照组。

3.3 实验结果

证明熟鸡蛋清中含有蛋白质。

通过学生实验结果和操作过程表明，改进后的实验效果从总体来讲是优于原实验设计的，减少了实验器材的使用，缩短了实验时间，使实验操作更加简便易行，体现了实验的科学性与实用性。改进后由于实验时间充足，还可以让学生自己探究生活中感兴趣想探究的材料。经过以上改进实验，不仅使学生学习了实验的原理与方法，更重要得是打破了学生认识过程中的思维定势，培养了学生的动手能力和合作探究能力。同时，也实践了教师不是教材的执行者，而是教学方案的开发者与学生求知的引导者的新课程理念。