肝纤维化血清标志物的临床应用评价

李晓霞 李彬 李林(等）

[摘要] 目的 评价肝纤维化血清标志物透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原N端肽（PⅢNP）、Ⅳ型胶原（CⅣ）、层粘连蛋白（LN）对肝纤维化诊断的应用价值。 方法 以肝穿病理学组织检查为金标准，采用化学发光法肝纤维化血清标志物定量检测试剂检测70例患者样本，计算血清标志物的灵敏度、特异性和准确性。 结果 与金标准相比，HA、PⅢNP、CⅣ、LN的灵敏度分别为83.3%、58.3%、66.7%、50.0%，特异性分别为77.3%、81.8%、72.7%、81.8%，诊断肝纤维化的准确性分别为81.4%、65.7%、68.6%、60.0%。 结论 血清HA、LN、PⅢNP、CⅣ水平与肝组织纤维化有良好的相关性，能较好地反映肝病的慢性化程度和肝纤维化活动水平及程度，在肝纤维化诊断中具有重要的应用价值。

[关键词] 肝纤维化；化学发光；透明质酸；Ⅲ型前胶原；Ⅳ型胶原；层粘连蛋白

[中图分类号] R575.2[文献标识码] B[文章编号] 1673—9701（2012）25—0075—02

Clinical evaluation of serum markers of liver fibrosis

LI Xiaoxia1 LI Bin2LI Lin1 LI Zhongxin1 FU Guangyu2 WU Xuewei1

1.Zhengzhou Autobio Diagnostics Co. Ltd. R&D， Zhengzhou 450016， China； 2.National Local Joint Engineering Laboratory of Immunoassay Automation， Zhengzhou 450016，China

[Abstract] Objective To evaluate serum markers Hyaluronic Acid（HA）， Amino—terminal Propeptide of Type III Collagen （PⅢNP）， Type Ⅳ Collagen（CⅣ） and Laminin（LN） of liver fibrosis， which is a practical application for the diagnosis of liver fibrosis. Methods Histopathological examination of liver puncture be defined as golden standard， Seventy patients which were determined by golden standard were detected， which adopting by chmiluminescence reagent of Quantitative detection to Serum markers of liver fibrosis. Then， Sensitivity， specificity and accuracy were calculated and analysed to serum markers. Results Compared with golden standard， the sensitivity of HA， PⅢNP， CⅣ and LN was 83.3%， 58.3%， 66.7 and 50.0%； the specificity was 77.3%， 81.8%， 72.7% and 81.8%； the accuracy was 81.4%， 65.7%， 68.6% and 60.0%， respectively. Conclusion The levels of HA， PⅢNP， CⅣ and LN in serum is well in correlation with liver fibrosis， which would well reflect the level of chronic patients and liver fibrosis. There is importantly actual application value on diagnosis of liver fibrosis.

[Key words] Liver Fibrosis； Chemiluminescence； Hyaluronic acid； Amino—terminal Propeptide of Type Ⅲ Collagen； Type Ⅳ Collagen； Laminin

肝纤维化是由各种致病因子所致肝内纤维组织异常增生的病理过程，轻者纤维化，重者使肝小叶结构改建，假小叶及结节形成，成为肝硬化。肝纤维化的病理生理过程非常复杂，主要表现为胶原蛋白为主的细胞外基质（ECM）大量增生和异常沉积，引起肝纤维化发生[1]。因此肝纤维化是肝硬化发生、发展进程中的一个重要环节，如能早期发现并及时治疗将有助于病情控制及逆转。本文通过对70例经肝穿病理学组织检查的患者肝纤维化血清标志物的检测，评价透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原N端肽（PⅢNP）、Ⅳ型胶原（CⅣ）、层粘连蛋白（LN）的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2007～2009年间解放军153中心医院经肝穿病理学检查确诊的患者共70例作为观察组，其中男55例，女15例，年龄32～55岁。按照2000年全国传染病与寄生虫病学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》诊断标准进行临床分级：慢性肝炎轻度者20例，其中男13例，女7例，年龄32～50岁；慢性肝炎中度者25例，其中男22例，女3例，年龄33～48岁；慢性肝炎重度者15例，其中男10例，女5例，年龄36～51岁；肝硬化患者10例，均为男性，年龄50～55岁。同时选取健康人群60例作为对照组，其中男43例，女17例，年龄30～58岁。

1.2 检测方法

空腹抽取所选患者血5 mL，分离血清后—20℃保存。化学发光法HA、PⅢNP、CⅣ、LN定量检测试剂盒及化学发光检测仪由郑州安图绿科生物工程有限公司提供，按照说明书操作。

1.3 观察指标

将HA、PⅢNP、CⅣ、LN的检测结果及金标准结果进行统计，根据公式计算灵敏度、特异性及准确性：灵敏度（%）=真阳性/（真阳性+假阴性）×100%；特异性（%）=真阴性/（假阳性+真阴性）×100%；准确性（%）=（真阳性+真阴性）/（真阳性+假阳性+假阴性+真阴性） ×100%

1.4 统计学方法

采用SPSS 13.0统计学软件进行分析，计量资料以（x±s）表示，组间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析。

2 结果

2.1 HA、PⅢNP、CⅣ、LN检测结果

见表1。轻度组与正常对照组相比， HA、PⅢNP、CⅣ、LN含量差异有统计学意义（t=—12.2～—4.2，P < 0.05），慢肝中度、重度及肝硬化组HA、PⅢNP、CⅣ、LN含量与正常对照组相比，差异均有统计学意义（t = —16～—5.7，P < 0.01），表明慢肝轻度时血清HA、PⅢNP、CⅣ和LN含量升高，且随着肝脏损伤程度的加重呈上升趋势，尤其是在重度时明显升高，与肝功能损伤严重、强烈的炎症反应及纤维化程度一致。

表1 各组慢性肝病患者肝纤维化血清标志物测定结果（x±s，ng/mL）

2.2 观察组四种肝纤维化血清标志物阳性检出率

见表2。HA、PⅢNP、LN三项阳性率随着肝病程度加重逐渐升高，中度患者CⅣ阳性率为40%，比轻度低，但重度和肝硬化的阳性率明显升高。肝硬化组四种标志物的阳性率均超过70%。

表2 观察组四种肝纤维化血清标志物阳性检出率[n（%）]

2.3 四种血清标志物检测灵敏度、特异性和准确性分析

表3、4为四项血清学指标与金标准对比检测肝纤维化的结果。如表5所示，HA检测肝纤维化的灵敏度最高（83.3%），其余三项的灵敏度均超过70%；各指标的特异性均较好，其中PⅢNP和LN达到81.8%；检测肝纤维化的准确性方面HA较好（81.4%），其余三项均较低。

3 讨论

目前，肝纤维化的诊断方法主要有组织病理学、影像学和血清标志物检测三种。组织病理学即肝穿刺活检是一种创伤性诊断方法，虽然是金标准，但患者难以承受，且不能进行动态观察[2，3]；影像学诊断虽然方便、快捷，但特异性差，无法做出早期诊断[3，4]；血清标志物检测因其无创性，利于动态监测且准确性较高而逐步受到重视并应用于临床。

HA主要由组织中纤维母细胞合成，通过淋巴系统进入血循环，并由肝脏快速清除。肝纤维化时，肝星状细胞合成HA能力大大升高，同时内皮细胞清除HA能力下降，双重原因导致肝脏中HA水平上升，HA亦成为检测肝纤维化的最灵敏的指标之一[5，6]。PⅢNP是Ⅲ型前胶原经氨基端内切肽酶的作用脱下多肽，测定慢性肝炎患者血清中的PⅢNP含量可反映Ⅲ型胶原的代谢及肝纤维化的程度[7]。LN 是肝细胞基底成分中的主要黏蛋白，肝纤维化时肝窦中 LN 的合成大量增加并过度沉积，血清 LN 升高一定程度反映肝窦毛细血管化的程度及门脉区纤维化范围，与肝组织的病理程度显著相关[7]。CⅣ是基底膜网状结构的主要组成部分，在纤维化早期增生且转化率较快，最后与持续沉积的 LN 形成完整的基底膜，是反映胶原合成的血清学指标，CⅣ的含量与肝组织病理纤维化程度正相关[8]。

许多研究已证实，血清肝纤维化指标HA、PⅢNP、CⅣ、LN的含量可反映慢性肝病肝脏病理损害的程度，是判断慢性肝炎患者肝纤维化程度的可靠指标[9]，肝病患者肝组织的炎症活动度与肝纤维化程度呈正相关，其中 HA 反映炎症程度较敏感，而PⅢNP在反映肝纤维化积蓄程度上较敏感，LN、CⅣ与肝组织汇管区和小叶内炎症相关，亦能很好地反映肝纤维化程度。本研究通过对70例确诊肝病患者肝纤维化血清标志物的测定，结果显示血清HA、LN、PⅢNP、CⅣ水平与肝组织纤维化有良好的相关性，能较好地反映肝病的慢性化程度和肝纤维化活动水平及程度，在肝纤维化诊断中具有重要的应用价值。

[参考文献]

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[9]孙宇，姜美凤. “肝纤四项”检测在肝纤维化诊断中的价值[J]. 实用临床医药杂志，2011，15（7）：140—141.

（收稿日期：2012—04—01）