单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠LN及HA含量的影响

陈悦　乔春凤

【摘要】 目的 探讨分析单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠层粘连蛋白（LN）及透明质酸（HA）含量的影响。方法 50只无特定病原体（SPF）级Wistar大鼠， 依照寒饮射肺证模型进行造模， 随机分成对照组和观察组， 各25只。对照组采用生理盐水灌胃， 观察组采用单叶细辛灌胃。比较两组大鼠肺泡灌洗液与血清中的HA、LN水平。结果 4周后， 观察组大鼠肺泡灌洗液与血清中的HA、LN水平低于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 单叶细辛在寒饮射肺证模型大鼠的治疗中发挥出较好的治疗作用， 可显著降低大鼠体内LN及HA含量。

【关键词】 寒饮射肺证模型大鼠；单叶细辛；层粘连蛋白；透明质酸；影响

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.13.218

单叶细辛性温， 可归心、肺、肾经， 具有温肺化饮、通窍止痛以及祛风散寒的功效。《本经疏证》中记载到单叶细辛入肺、温肺散寒， 说明单叶细辛可温肺化痰饮、止咳逆。临床上有关于单叶细辛改善寒饮射肺证模型大鼠磷脂、血栓素以及内皮素水平的报道[1]， 但是关于单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠LN及HA含量的影响并不多见。故本研究主要探讨分析了单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠LN及HA含量的影响。现报告如下。

1 材料与方法

1. 1 材料 50只SPF级Wistar大鼠由当地医学院实验动物中心提供， 周龄6～8周， 平均周龄（7.1±0.7）周， 体重178～223 g， 平均体重（202±19）g。将大鼠随机分成对照组和观察组， 各25只。HA、LN放免试剂盒由上海信裕生物科技有限公司提供， 乌拉坦由上海恒远生物科技有限公司提供， 单叶细辛由当地中草药房提供， 制成浓度为1g/ml的溶液待用。超速离心机由上海乔跃电子有限公司提供， 放射免疫自动记数器由北京科普顺科技有限公司提供， 数显恒温水浴锅由匡贝实业（上海）有限公司提供， Bio-RAD680酶标仪电脑分析系统由美国进口。

1. 2 方法

1. 2. 1 建模 腹腔注射适量的乌拉坦进行麻醉， 大鼠仰卧并固定， 消毒后于颈部正中切开皮肤， 充分显露正中气管与颈总动脉， 在环状软骨下方0.5 cm部位切开气管前壁， 并作一个纵向切口， 插入“Y”型气管并固定， 将血液吸净；将左侧的颈总动脉分离备用， 套管针穿刺置管， 然后结扎固定；大鼠呼吸恢复平稳后， 左侧管插入软塑料内套管， 将6℃的生理盐水按2.5 ml/kg的剂量灌注进大鼠肺内， 0.5 min后抽出， 间隔5 min后重复灌洗， 共操作5次。

1. 2. 2 用药与检测 对照组采用浓度为0.9%生理盐水灌胃， 剂量为1 ml/kg。观察组采用单叶细辛灌胃， 单叶细辛中药水提取液按1 ml/kg的剂量灌胃， 两组大鼠均灌胃4周。采集大鼠的颈总动脉血液进行检测， 应用放射免疫分析法检测大鼠肺泡灌洗液与血清中的HA、LN水平， 严格按照说明书步骤执行。

1. 3 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

4周后， 观察组大鼠肺泡灌洗液与血清中的HA、LN水平低于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1， 表2。

3 讨论

寒饮射肺证是呼吸系统多发病证， 西医认为该病的发生与受寒引起的炎性细胞因子释放有关， 中医则认为该病的发生与宿罹痰饮、复感寒邪有关[2]。寒饮射肺的病情进展缓慢， 通常会并发阻塞性肺气肿、支气管炎以及哮喘， 甚至可能出现肺源性心脏病、肺动脉高压而诱发死亡， 具有十分大的临床危害性[3]。

HA主要由间质细胞合成， 属于一种糖胺多糖， 是基质的重要组成成分， 其能够介导成纤维细胞、炎性因子的迁移、黏附， 是机体炎症反应的重要标志物[4]。有学者研究发现HA会积聚于损伤的肺间质中， 影响血液与气体间的交换， 同时肺间质细胞受到损伤后会促进HA的产生。LN由上皮、内皮、平滑肌等细胞合成， 主要分布在细胞基底膜基质中， 其水平上升会引起肺细胞炎性反应， 对肺组织产生损伤作用。

中医药理学研究显示单叶细辛具有解热、抗炎、降温、镇痛以及抗惊厥的功效， 并且具有抑制LN和HA分泌的功效， 能够显著减轻机体的炎症反应， 从而缓解病情[5]。本次研究结果显示， 4周后观察组大鼠肺泡灌洗液与血清中的HA、LN水平低于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。表明单叶细辛在寒饮射肺证模型大鼠的治疗中发挥出较好的治疗作用， 可显著减轻肺组织损伤， 促进预后。

综上所述， 单叶细辛在寒饮射肺证模型大鼠的治疗中发挥出较好的治疗作用， 可显著降低大鼠体内LN及HA含量。

参考文献

[1] 李杨， 明海霞.单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠HYP、IL-17及IL-6动态表达的实验研究.中医研究， 2015， 28（6）：58-60.

[2] 李杨， 明海霞， 耿广琴.单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠 LN、HA影响的实验研究.中医药学报， 2015， 43（2）：52-54.

[3] 王平， 邱继云， 陶功定.肺气虚加寒湿外邪大鼠复合模型建立的实验研究.世界中西医结合杂志， 2012， 7（11）：938-940.

[4] 李杨， 明海霞.单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠TGF-β1、PC-Ⅲ影响的实验研究.中医研究， 2015， 28（10）：63-64.

[5] 李杨， 明海霞.单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠氧自由基代谢及肺组织病理变化的实验研究.中医药学报， 2015， 43（5）：35-37.

[收稿日期：2015-12-21]