大黄水提液防治小鼠癫痫的实验研究

张文风，杨 焱

(1.长春中医药大学，吉林 长春 130117；2.吉林省肿瘤医院，吉林 长春 130012)

大黄为蓼科植物掌叶大黄(RheumpalmatumL.)、唐古特大黄(RheumtanguticumMaxim.exBalf.)或药用大黄(RheumofficinaleBaill.)的干燥根及根茎，前两种习称“北大黄”,后一种习称“南大黄”[1]。2005版《中国药典》一部确定其有泻热通肠,凉血解毒，逐瘀通经功能。借助《普济方》数据库管理系统[2]，以大黄为关键词进行检索，发现大黄复方用于一切痫32方，由此推测，大黄单味药物可能对癫痫也有一定的治疗作用。国内学者[3-4]研究也提示大黄可减轻脑水肿，预防脑缺血，临床应用并对癫痫有防治作用。本研究通过MES、戊四唑、士的宁惊厥模型对大黄的抗癫痫作用进行初步研究。

1 材料与方法

1.1 药物 大黄水提液(大黄购于吉林大药房,由长春中医药大学药学院王淑敏教授鉴定。水提液制备方法：大黄100 g，水煎煮3次，第1次10倍量，煎煮2 h；第2次和第3次8倍量,煎煮2 h，合并煎液，滤过，浓缩至每毫升含生药1 g，备用。)

1.2 动物 昆明种小鼠，体质量20～26 g，雌雄各半(吉林大学实验动物中心提供,合格证号：SCXK(吉)2003-0007)。

1.3 试剂 戊四唑 (北京三博远志生物技术有限公司)；士的宁注射液(天津市人民制药厂)；苯妥英钠片(东北制药总厂)。

1.4 仪器 YSD-4G药理生理实验多用仪(安徽淮北正华生物仪器厂)。

1.5 方法

1.5.1 MES癫痫小鼠 采用YSD-4G药理生理实验多用仪，将齿状夹以生理盐水浸湿后,夹住小鼠双耳尖部，预实验确定95%以上动物产生强直性惊厥发作的参数为100 V，4 Hz，以后肢强直性伸直为惊厥指标，于实验前1天进行筛选。取符合惊厥标准的昆明种小鼠50只，随机分为模型对照组、大黄高、中、低剂量组和苯妥英钠组。按表1剂量灌胃给药,模型对照组给予等溶积的蒸馏水，给药30 min后，按上述参数，给予电刺激1次,计算各组小鼠发生惊厥的只数。结果见表1。

1.5.2 戊四唑癫痫小鼠 预实验确定95%以上动物出现阵发性抽搐的戊四唑剂量为93 mg/kg。小鼠50只，随机分为模型对照组，大黄高、中、低剂量组，苯妥英钠组,按表2剂量灌胃给药。模型对照组给予等体积的蒸馏水，给药后30 min，腹腔注射相应致惊剂量戊四唑，观察药物抗戊四唑致惊疗效，结果见表2。

1.5.3 士的宁癫痫小鼠 预实验确定95%以上动物出现阵发性抽搐的士的宁剂量为0.7 mg/kg。取健康小鼠50只，随机分为模型对照组，大黄高、中、低剂量组，苯妥英钠组,按表3剂量灌胃给药。模型对照组给予等体积的蒸馏水，给药后30 min,皮下注射相应致惊剂量士的宁，观察药物抗士的宁致惊疗效。结果见表3。

1.5.4 行为观察 癫痫发作的分级标准参照Racine标准[5]:0级：无反应；Ⅰ级：节律性嘴或面部抽动；Ⅱ级：点头或甩尾；Ⅲ级：单肢抽动；Ⅳ级：多肢抽动或强直；Ⅴ级：全面性强直——阵挛发作。连续观察30 min，记录小鼠癫痫发作潜伏期。

2 结果

2.1 大黄对MES所引起癫痫小鼠的影响 见表1。

表1 大黄对MES所引起小鼠惊厥发生率的影响

2.2 大黄对戊四唑癫痫小鼠的影响 见表2。

2.3 大黄对士的宁癫痫小鼠的影响 见表3。

表2 大黄对小鼠戊四唑惊厥模型的影响(±s)

表3 大黄对小鼠士的宁惊厥模型的影响(±s)

3 讨论

癫痫是最常见的神经系统疑难病症之一，是由于反复发作的神经元超同步放电所致的短暂发作性脑功能失调。临床上可见到运动、感觉、意识、行为和植物神经等功能障碍。无论是用其研究癫痫发病机制，还是开发抗癫痫药物以及探索新的治疗途径，都需要理想的癫痫动物模型，许多新的进展和突破亦多直接或间接来自动物模型的研究结果。一般认为，最大电休克发作模型是较好的癫痫大发作模型，若一药物对该实验具有强大对抗作用，则其临床上对癫闲大发作常有效；戊四唑主要作用于脑干和大脑，是癫痫小发作常用模型；士的宁模型常被认为是顽固性癫痫的良好模型。

现代药理研究[6]发现,大黄的有效成分主要集中在蒽醌类化合物，包括大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚等，具有泻下、抗炎、抗菌、保肝利胆、降血脂、抗肿瘤、抗免疫抑制等多方面的作用。

本研究选用几种癫痫模型从不同侧面对大黄抗痫作用进行研究,发现大黄可减少MES发作次数，延长戊四唑、士的宁所致小鼠惊厥的发作潜伏期、改善痫性发作程度，并缩短持续时间，提示大黄水提液对癫痫有一定的防治作用，并存在一定的量效关系，其防治机理有待于进一步研究。

[1]中华人民共和国药典委员会.中国药典[M].北京:化学工业出版社,2005:17-18.

[2]梁茂新,黄会生.数据库管理系统(计算机软件著作权登记证书软著登字第0002781号)[Z].北京:中华人民共和国国家版权局,1998.

[3]GU Jian-wen,HASUO H,TAKEYA M,et al.Effects of emodin on synaptic transmission in rat hippocampal CA1 pyramidal neurons in vitro[J].Neuropharmacology,2005,49(1): 103-111.

[4]GU Jian-wen,ZHENG Chong-xun,ZHANG Ai-hua,et al.Effects and wavelet spectral entropy analysis of rhubarb extracts rhein on synaptic transmission in rat hippocampal ca1 area in vitro[J].Chinese Medical Journal,2005,118(10):817-823.

[5]RACINE R.Modification of seizure activity by elecyrical stimula-tion:Ⅱ.Motor seizure[J].Electroencephalography and Clinical Neurophysiology,1972(3):281.

[6]李敏,李丽霞,刘渝,等.大黄研究进展[J].世界科学技术(中医药现代化),2006,8(4):34-39.