狭叶栀子茎化学成分研究

郑丽花，李小宝，2，宋鑫明，2*，李仲北，董力玮，单彦波

1海南师范大学化学与化工学院;2海南师范大学省部共建-热带药用植物化学教育部重点实验室，海口571158

狭叶栀子茎化学成分研究

郑丽花1，李小宝1，2，宋鑫明1，2*，李仲北1，董力玮1，单彦波1

1海南师范大学化学与化工学院;2海南师范大学省部共建-热带药用植物化学教育部重点实验室，海口571158

从狭叶栀子(Gardenia stenophylla Merr.)茎乙醇提取物中分离得到11个化合物，通过理化性质及波谱分析鉴定为桦木酸(betulinic acid，1)、香草酸(vanillic acid，2)、丁香醛(syringaldehyde，3)、丁香酸(syringic acid，4)、对羟基苯甲醛(parahydroxybenzaldehyde，5)、邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate，6)、邻羟基苯甲酸(2-hydroxy-benzoic acid，7)、琥珀酸(succinic acid，8)、D-甘露醇(D-mannitol，9)、β-谷甾醇(β-sitosterol，10)、β-胡萝卜苷(β-daucosterol，11)。所有化合物为首次从该植物中分离得到。

狭叶栀子;化学成分;结构鉴定

狭叶栀子茎是茜草科(Rubiaceae)栀子属(Gardenia)植物狭叶栀子(Gardenia stenophylla Merr.)的干燥茎。其原植物是一种灌木，生于山野间，适应性强，主要分布于海南、广西、广东等地区［1］，民间主要用于清热利尿、凉血、解毒等功效。国内外学者从栀子属中分离得到环烯醚萜类、单贴苷类、二萜类、三萜类、黄酮类等多种类型化合物［2］。到目前为止，狭叶栀子化学成分未见报道。为了阐明狭叶栀子药理作用的物质基础，作者对其进行了化学成分研究。从狭叶栀子茎的氯仿部位分离得到了11个化合物单体，分别为桦木酸(betulinic acid，1)、香草酸(vanillic acid，2)、丁香醛(syringaldehyde，3)、丁香酸(syringic acid，4)、对羟基苯甲醛(parahydroxybenzaldehyde，5)、邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate，6)、邻羟基苯甲酸(2-hydroxy-benzoic acid， 7)、琥珀酸(succinic acid，8)、D-甘露醇(D-mannitol，9)、β-谷甾醇(β-sitosterol，10)、β-胡萝卜苷(β-daucosterol，11)。所有化合物均为首次从狭叶栀子中分离得到。

1 仪器和材料

Bruck AV-400型核磁共振仪;Agilent HCT-1200液质联用;Sephadex LH-20(Pharmacia公司生产);薄层硅胶GF254，柱色谱硅胶100～200、200～300目(青岛海洋化工厂生产);XT5-10显微熔点测定仪，温度未校正。

狭叶栀子采于海南省霸王岭自然保护区，由海南师范大学生命科学学院钟琼芯教授鉴定为Gardenia stenophylla Merr.，标本保存于海南师范大学省部共建-热带药用植物化学教育部重点实验室。

2 提取与分离

将阴干的狭叶栀子茎磨成粗粉(10 kg)，用75%的乙醇回流提取4次。提取液合并，减压蒸馏除去乙醇，干燥得浸膏(600 g)。将此浸膏分散在水中，依次分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯进行萃取。减压回收溶剂，得到石油醚浸膏120 g，氯仿部分浸膏180 g，乙酸乙酯93 g。氯仿部位(180 g)用层析硅胶干法拌样上柱(拌样硅胶200 g)，采用硅胶柱色谱分离，依次用石油醚-乙酸乙酯(1∶0—0∶1，V/ V)进行梯度洗脱。经TLC检测后合并相似流分后分成10个组分(a-j)。组分b经石油醚-氯仿(3∶1，V/V)洗脱，经制备薄层色谱纯化得到化合物1 (11.5 mg)、3(5.4 mg)，组分c经石油醚-丙酮(25∶1-1∶1，V/V)洗脱，经制备薄层色谱纯化得到化合物5 (4.6 mg)、6(6.7 mg)、10(15.6 mg)，组分d经氯仿-乙酸乙酯(1∶0-0∶1，V/V)洗脱，经制备薄层色谱纯化得到化合物11(12.3 mg)、2(4.3 mg)，组分f经氯仿-甲醇(1∶0-0∶1，V/V)洗脱，经制备薄层色谱纯化得到化合物4(8.3 mg)、7(3.3 mg)、8(2.6 mg)、9(6.2 mg)。

3 结构鉴定

化合物1 白色针状晶体;mp:285～288℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:0.68，0.75，0.86，0.89，0.90，1.60(18H，6×CH3)，4.65，4.53(2H，d，J= 7.2 Hz，29-CH2)，3.11(1H，m，H-3);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:38.6(C-1)，27.3(C-2)，77.9(C-3)，38.7(C-4)，55.2(C-5)，18.1(C-6)，34.2(C-7)，40.5(C-8)，50.3(C-9)，36.8(C-10)，20.7 (C-11)，25.3(C-12)，38.3(C-13)，42.3(C-14)，30.5(C-15)，32.0(C-16)，56.2(C-17)，46.8(C-18)，49.1(C-19)，150.3(C-20)，29.6(C-21)，37.1(C-22)，27.8(C-23)，15.2(C-24)，16.0(C-25)，15.9(C-26)，14.6(C-27)，181.1(C-28)，109.6(C-29)，19.1(C-30)。上述的NMR数据与文献［3］报道的桦木酸谱学数据基本一致，故鉴定为化合物1为桦木酸(betulinic acid)。

化合物2 白色针晶;mp:202～206℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:6.72(1H，d，J=8.4 Hz)，7.42(1H，dd，J=8.4，2.0 Hz)，7.41(1H，d，J=2.0 Hz)为ABX耦合系统的3个质子信号，3.77(3H，s，-OCH3)为一个甲氧基质子信号;13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:170.0(COOH)，152.6 (C-4)，148.6(C-3)，125.3(C-6)，123.2(C-1)，115.3(C-2)，113.8(C-5)，56.4(OCH3)。以上数据与文献［4］报道的香草酸谱学数据基本一致，故鉴定化合物2为香草酸(vanillic acid)。

化合物3 白色粉末;mp:111～113℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:9.82(1H，s，-CHO)，7.15(2H，s，H-2，6)，6.28(1H，s，C4-OH)，3.97 (6H，s，C3-OCH3，C5-OCH3);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:192.6(C-7)，149.3(C-3，5)，143.5(C-4)，128.8(C-1)，108.0(C-2，6)，56.6(C3-OCH3，C5-OCH3)。上述的NMR数据与文献［5］报道的丁香醛谱学数据基本一致，故鉴定为化合物3为丁香醛(syringaldehyde)。

化合物4 白色粉末;mp:207～209℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:7.18(2H，s，H-2，5) 3.78(6H，s，H-8，9);13C NMR(100 MHz，CDCl3) δ:167.1(C-7)，147.2(C-3，5)，140.0(C-4)，120.3(C-1)，106.9(C-2，6)，56.0(C-8，9)。上述的NMR数据与文献［6］报道的丁香酸谱学数据基本一致，故鉴定为化合物4为丁香酸(syringic acid)。

化合物5 白色粉末;mp:104～105℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:9.86(1H，s，CHO)，7.83 (2H，d，H-2，6)，6.71(2H，d，H-3，5);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:191.4(CHO)，163.3(C-4)，132.0(C-2，6)，127.7(C-1)，115.5(C-3，5)。上述的NMR数据与文献［7］报道的对羟基苯甲醛谱学数据基本一致，故鉴定为化合物5为对羟基苯甲醛(parahydroxybenzaldehyde)。

化合物6 白色膏状固体;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:7.65(4H，dd，J=8.8，4.4 Hz，H-3，6)，7.45(2H，dd，J=8.8，4.4 Hz，H-4，5)，4.30(4H，t，J=6.4 Hz，H-8，8')，1.71(4H，m，H-9，9')，1.43 (4H，m，H-10，10')，1.06(6H，t，J=7.6 Hz，H-11，11');13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:167.8(C-1'，1")，132.3(C-1，6)，130.8(C-3，4)，128.7(C-2，5)，65.5(C-3'，3")，30.5(C-4'，4")，19.2(C-5'，5")，13.6(C-6'，6")。以上数据与文献对照一致［8］，故鉴定化合物6为邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate)。

化合物7 粉红色针状结晶;mp:253～255℃;1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ:7.88(1H，dd，J =8.0，1.6 Hz，H-6)，7.45(1H，dt，J=8.4，1.6 Hz，H-4)，6.92(1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-3)，6.88(1H，dt，J=8.0，1.6 Hz，H-5);13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ:173.6(COOH)，163.2(C-2)，136.6(C-4)，131.6(C-6)，120.1(C-5)，118.2(C-3)，113.9(C-1)。以上数据与文献报道一致［9］，鉴定化合物 7为邻羟基苯甲酸(2-hydroxy-benzoic acid)。

化合物8 白色粉末;mp:182～185℃;1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ:2.56(4H，s，H-2，3);13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ:176.0(C-1，4)，29.7(C-2，3)。以上数据与文献报道一致［10］，鉴定化合物8为琥珀酸(succinic acid)。

化合物9 白色粉末;mp:166～167℃;1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ:3.39(2H，m，H-1a，6a)，3.62(2H，m，H-1b，6b)，4.35(2H，t，J=5.2 Hz，OH-1，6)，4.15(2H，d，J=6.8 Hz，OH-2，5)，4.44(2H，d，J=5.2 Hz，OH-3，4)，3.55(2H，t，J =7.6 Hz，H-3，4);13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ: 71.0(C-2，5)，67.0(C-3，4)，61.8(C-1，6)。以上数据与文献报道一致［11］，鉴定化合物9为D-甘露醇(D-mannitol)。

化合物10 白色针状晶体;mp:134～135℃;用薄层色谱分析，在紫外灯254 nm和365 nm均不显荧光，I2熏显色呈黄棕色，5%硫酸乙醇溶液显色为紫红色，该化合物性质与已知化合物β-谷甾醇的物化性质相近;取该化合物与β-谷甾醇标准品进行薄层色谱展开对照，二者的Rf值相同;取该化合物与β-谷甾醇标准品混合后测熔点，混合熔点不下降，故确定为β-谷甾醇(β-Sitosterol)。

化合物11 白色粉末;mp:268～270℃;5%硫酸乙醇溶液显色，该化合物性质与已知化合物β-胡萝卜苷的物化性质相近;取该化合物与β-胡萝卜苷标准品进行薄层色谱展开对照，二者的Rf值相同;取该化合物与β-胡萝卜苷标准品混合后测熔点，混合熔点不下降，故确定为β-胡萝卜苷(β-Daucosterol)。

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Study on Chemical Constituents from Stems of Gardenia stenophylla Merr.

ZHENG Li-hua1，LI Xiao-bao1，2，SONG Xin-ming1，2*，LI Zhong-bei1，DONG Li-wei1，SHAN Yan-bo11College of chemistry and chemical engineering，Hainan Normal University;2Key Laboratory of Tropical Medicinal Plant Chemistry of Ministry of Education，Haikou 571158，China

Eleven compounds were isolated from the stems of Gardenia stenophylla Merr..The chemical structures of these 11 compounds were identified as:betulinic acid(1)，vanillic acid(2)，syringaldehyde(3)，syringic acid(4)，parahydroxybenzaldehyde(5)，dibutyl phthalate(6)，2-hydroxy-benzoic acid(7)，succinic acid(8)，D-mannitol(9)，β-sitosterol(10)，daucosterol(11)by comparing physicochemical and NMR properties with the reported data.All compounds were isolated from this plant for the first time.

Gardenia stenophylla Merr.;chemical constituents;structural determination

1001-6880(2012)10-1382-03

2012-05-30 接受日期:2012-08-21

海南师范大学青年教师科研启动项目(QN1128)

*通讯作者 Tel:86-013648681687;E-mail:sxm8646@163.com

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