火炭母化学成分的研究

任恒春，万定荣，谷 婧，邹忠梅*

1中国医学科学院＆北京协和医学院药用植物研究所，北京100193;2中南民族大学，武汉430074

火炭母化学成分的研究

任恒春1，万定荣2，谷 婧1，邹忠梅1*

1中国医学科学院＆北京协和医学院药用植物研究所，北京100193;2中南民族大学，武汉430074

本文对火炭母的化学成分进行研究，为选择控制其质量的指标性成分提供依据。运用硅胶、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20等手段进行分离纯化得到9个化合物，并通过NMR、MS等波谱方法鉴定其结构分别为:正三十二烷醇(1)、β-谷甾醇(2)、没食子酸甲酯(3)、胡萝卜苷(4)、没食子酸(5)、槲皮素(6)、槲皮苷(7)、金丝桃苷(8)和3-甲氧基-4-鼠李糖鞣花酸(9)，其中化合物1和9首次从该属植物中分得，4和8首次从该植物中分得。关键词:火炭母;蓼属;黄酮类;鞣花酸苷

火炭母，又名火炭毛，乌炭子等，为蓼科蓼属植物火炭母(Polygonum chinese L.)的地上部分，夏、秋间采收，鲜用或晒干。主要分布于广东、广西、福建、浙江、湖北、海南等地。味辛、苦，性凉，有清热利湿，凉血解毒，平肝明目，活血舒筋的功效。用于治疗痢疾、泄泻、咽喉肿痛、跌打损伤等病症［1］。火炭母为由广东凉茶开发而制的广东凉茶颗粒的主要组成，在方中起到凉血、化瘀的功效［2］。但是，火炭母药材在市场上使用比较混乱，有必要全面、客观、科学地制定其质量标准，以便更好地利用资源。火炭母中化学成分较多，但活性成分尚不明确。迄今为止，从火炭母全草中共分离得到20多种化合物，主要为黄酮及其苷类、酚酸类和甾体类［3-6］。国内外学者对火炭母药材的质量控制也进行了大量研究，但所选用的对照品主要是专属性较差的槲皮素、槲皮苷和没食子酸［7-9］。为进一步明确火炭母的药效物质，选择合适的质量评价标准，笔者对火炭母的化学成分进行了研究，从乙酸乙酯部分分离得到9个化合物，经理化和光谱分析分别鉴定为正三十二烷醇(1)，β-谷甾醇(2)，没食子酸甲酯(3)，胡萝卜苷(4)，没食子酸(5)，槲皮素(6)，槲皮苷(7)，金丝桃苷(8)和3-甲氧基-4-鼠李糖鞣花酸(9)。其中，化合物1和9首次从该属植物中分离得到，4和8首次从该植物中分离得到。

1 仪器和材料

Fisher-Johns熔点仪(温度计未校正);Esquire-LC 00054型质谱仪;LTQ-OrbitrapXLTM型质谱仪; Bruker AM500核磁共振仪(TMS做内标);硅胶(薄层色谱和柱色谱)为青岛海洋化工厂产品;Sephadex LH-20为瑞典Pharmacia公司生产。火炭母药材于2008年6月购自云南文山，经中南民族大学万定荣教授鉴定为蓼科植物火炭母Polygonum chinensis L.的地上部分。

2 提取分离

火炭母全草1.5 kg，用95%工业乙醇回流提取2次，每次2 h，药渣用50%工业乙醇回流提取2次，每次1 h，合并提取液，经浓缩干燥后得到170 g浸膏，将浸膏溶于少量乙醇，悬浮于水中，分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压回收后得到乙酸乙酯部分(35.7 g)和正丁醇部分(85.2 g)。取乙酸乙酯部分经硅胶柱色谱层析，用二氯甲烷(甲醇∶10∶0～1∶5)梯度洗脱，薄层检查合并得6个组分(Ⅰ-Ⅵ)，组分Ⅰ(2.4 g)，经硅胶柱色谱纯化，用石油醚∶乙酸乙酯(10∶1)洗脱，收集流份，流份5～10及18～23有晶体出现，后用乙酸乙酯重结晶，分别得到化合物1 (15 mg)和2(20 mg);组分Ⅱ(1.4 g)，经硅胶柱色谱层析，用石油醚∶乙酸乙酯(5∶1)洗脱，收集流份，流份7～9有白色粉末状固体出现，抽滤，用石油醚重结晶，得到化合物3(30 mg);组分Ⅲ(2.8 g)，经硅胶柱色谱层析，用氯仿∶甲醇(15∶1～8∶1)梯度洗脱，收集流份，流份6～11经硅胶柱色谱层析，用氯仿∶甲醇(15∶1)洗脱，得到化合物4(40 mg)，流份17～19经硅胶柱色谱层析，用氯仿∶甲醇(10∶1)洗脱，得到化合物5(12 mg)，流份28～32经硅胶柱色谱层析，用氯仿∶甲醇(10∶1)洗脱，经葡聚糖凝胶Sephadex LH-20(氯仿∶甲醇1∶1)纯化，得到化合物6(13 mg);组分Ⅳ(23.5 g)，经硅胶柱色谱层析，用氯仿∶甲醇(5∶1)洗脱，收集流份，流份12～15及21～25经葡聚糖凝胶Sephadex LH-20(氯仿∶甲醇1∶1)反复纯化，分别得到化合物7(15 mg)和8(10 mg);组分Ⅴ(5.6g)，经硅胶柱色谱层析，用氯仿∶甲醇(3∶1～1∶3)梯度洗脱，收集流份，流份15～25经葡聚糖凝胶Sephadex LH-20(氯仿∶甲醇1∶1)反复纯化，得到化合物9(25 mg)。

3 结构鉴定

化合物1 白色无定形粉末，mp.82～84℃;EIMS m/z:448［M-H2O］+，420，392，376，362，334，125，111，97;1H NMR CDCl3，500 MHz)δ:3.62(2H，t，J=6.7 Hz，CH2OH)，1.54(7H，m)，1.23(60H，m，CH2)，0.86(3H，t，J=6.7 Hz，末端CH3)。以上数据与文献报道的正三十二烷醇基本一致［10］。

化合物2 无色针晶 (丙酮)，mp.137～139℃;EI-MS m/z:414［M］+，396［M-H2O］+，381，329，303，273，255，231，199，161，145，107，95，57;与 β-谷甾醇对照品混合熔点不下降，二者共薄层Rf值一致，故鉴定为β-谷甾醇。

化合物3 白色粉末，mp.129～131℃，FeCl3反应呈阳性(蓝色)。Molish反应呈阴性。EI-MS m/z:184［M］+，153［M-OCH3］+，125［MOCH3CO］+，107，97，79;1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ:7.03(2H，s，H-2，6)，3.80(3H，s，-OCH3);13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ:169.5 (COOCH3)，146.7(C-3，5)，140.8(C-4)，121.8(C-1)，110.2(C-2，6)，53.3(OCH3)。以上数据与文献报道的没食子酸甲酯基本一致［11］。

化合物4 白色粉末，mp.297～299℃，与胡萝卜苷对照品混合熔点不下降，二者共薄层，Rf值一致。

化合物5 白色粉末，mp.258～260℃，FeCl3反应呈阳性(蓝色)，Molish反应呈阴性。EI-MS m/z :170［M］+，153［M-OH］+，125［M-COOH］+;1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ:9.13(3H，s，OH)，6.90(2H，s，H-2，6);13C NMR(DMSO-d6，125 MHz) δ:108.7(C-2，6)，145.3(C-3，5)，121.1(C-1)，138.3(C-4)，167.3(COOH)。以上数据与文献报道的没食子酸基本一致［11］。

化合物6 淡黄色粉末，mp.＞300℃，盐酸-镁粉反应阳性(紫红色)。Molish反应呈阴性。EI-MS m/z:302［M］+;1H NMR CD3OD，500 MHz)δ:7.71 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2')，7.59(1H，dd，J=2.0，8.5 Hz，H-6')，6.87(1H，d，J=8.5 Hz，H-5')，6.37 (1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.17(1H，d，J=2.0 Hz，H-6);13C NMR CD3OD，125 MHz)δ:147.8(C-2)，137.6(C-3)，177.8(C-4)，163.5(C-5)，99.5(C-6)，165.4(C-7)，93.5(C-8)，157.8(C-9)，104.2(C-10)，123.8(C-1')，116.2(C-2')，145.8(C-3')，149.7(C-4')，115.9(C-5')，122.3(C-6')。以上数据与文献报道的槲皮素基本一致［12］。

化合物7 黄色粉末，mp.176～178℃，盐酸-镁粉反应阳性(紫红色)，Molish反应呈阳性。(+) HRESI-MS m/z:471.0233［M+Na］+，325.5436［M-146+Na］+;1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ:12.64 (4-OH)，10.85(7-OH)，9.68(4'-OH)，9.32(3'-OH)，以上均为单峰。7.29(1H，s，H-2')，7.24(1H，d，J=8.5 Hz，H-6')，6.85(1H，d，J=8.5 Hz，H-5')，6.38(1H，d，J=1.5 Hz，H-8)，6.20(1H，d，J =2.0 Hz，H-6)，5.24(1H，s，H-1'')，0.80(3H，d，J =6.0 Hz，H-6'')，4.92(1H，d，J=4.0 Hz)，4.69 (1H，d，J=4.5 Hz)，4.58(1H，d，J=5.5 Hz)，以上三个为2''，3''，4''位羟基;3.2～4.0(3H，br.s)为糖链上质子信号;13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ: 177.7(C-4)，164.1(C-7)，161.2(C-5)，157.2(C-2)，148.4(C-4')，145.2(C-3')，134.2(C-3)，121.1 (C-6')，120.7(C-1')，115.6(C-5')，115.4(C-2')，104.0(C-10)，101.8(C-1'')，98.6(C-6)，93.6(C-8)，71.1(C-5'')，70.5(C-3'')，70.3(C-2'')，70.0 (C-4'')，17.4(C-6'')。以上数据与文献报道的槲皮苷基本一致［12］。

化合物8 黄色针晶(甲醇)，mp.226～228℃，盐酸-镁粉反应阳性(紫红色)，Molish反应呈阳性。(+)HRESI-MSm/z:487.1254［M+Na］+，325.0951［M-162+Na］+;1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ:12.62(4-OH，s)，10.83(7-OH，s)，9.69(4'-OH，s)，9.12(3'-OH，s)，7.66(1H，d，J=9.0 Hz，H-6')，7.52(1H，br.s，H-2')，6.80(1H，d，J=8.5 Hz，H-5')，6.39(1H，d，J=1.5 Hz，H-8)，6.19 (1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，5.36(1H，d，J=8.5 Hz，H-1'')，5.09(1H，d，J=4.5 Hz)，4.81(1H，d，J =5.5 Hz)，4.40(1H，br.s)，以上三个为2''，3''，4''位羟基质子;4.01(1H，m，H-6''a)，1.12(1H，m，H-6''b)，3.2～4.0(4H，br.s)为糖链中质子信号;13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ:177.4(C-4)，164.1 (C-7)，161.2(C-5)，156.2(C-2)，148.4(C-4')，144.8(C-3')，133.4(C-3)，122.0(C-6')，121.1(C-1')，115.9(C-5')，115.1(C-2')，103.9(C-10)，101.8(C-1'')，98.6(C-6)，93.4(C-8)，75.8(C-5'')，73.1(C-3'')，71.7(C-2'')，71.2(C-4'')，60.1 (C-6'')。以上数据与文献报道的金丝桃苷基本一致［12］。

化合物9 白色针状结晶(甲醇)，mp.246～248℃，盐酸-镁粉反应阴性。Molish反应呈阳性。(-)HRESI-MS m/z:461.0833［M-H］-，315.0833［M-H-146］-;1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ: 11.08(1H，s，4-OH)，10.77(1H，s，4'-OH)，7.74 (1H，s，H-5')，7.54(1H，s，H-5)，5.47(1H，s，H-1'')，4.90(1H，d，J=5.5Hz，2''-OH)4.67(1H，d，J =6.0Hz，3''-OH)，4.03(3H，s，3-OCH3)，3.16～4.42(多个H，m，糖链中环上质子信号)，1.13(3H，d，J=6.5 Hz，6''-CH3)。13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ:158.6(C-7，C-7')，152.6(C-4)，146.4(C-4')，141.8(C-3')，140.1(C-3)，136.2(C-2，C-2')，114.3(C-1')，113.0(C-1，C-6')，111.7(C-5)，111.4 (C-6，C-5')，100.1(C-1'')，71.7(C-4'')，70.0(C-2'')，69.9(C-3'')，69.8(C-5'')，60.9(3-OCH3)，17.8(C-6'')，以上数据与文献报道的3-甲氧基-4'-鼠李糖鞣花酸基本一致［13］。

4 讨论

本文通过对火炭母药材醇提物乙酸乙酯部分化学成分研究，发现黄酮类和酚酸类化合物为其主要成分类别，从量上看，两者基本相当。黄酮类和酚酸类化合物在抗氧化、抗炎和免疫等方面存在相似的药理活性，但是两者的作用机理和作用靶点也存在较大差别［14，15］。因此，建议用黄酮类和酚酸类共同作为质量控制的指标性成分。

1 Editorial Committee of Chinese Herbal Medicine(中华本草编委会).Chinese Herbal Medicine(中华本草).Shanghai: Shanghai Science and Technology press，1999，Edition 1: 1291.

2 Tan TM(谭天明).The sales volume of‘Wang LaoJi’breakthrough 20 millions packets in the first quarter.J Chin Med Mater(中药材)，1989，(05):30.

3 Xie XQ(谢贤强)，Wu P(吴萍)，Lin LD(林立东)，et al.I-dentification ofChemicalConstituentsfrom Polygonum chinense Linn.J Trop Subtrop Bot(热带亚热带植物学报)，2007，15:450-454.

4Wang YG(王永刚)，Xie SW(谢仕伟)，Su WW(苏薇薇).I-dentification of Chemical Constituents from Polygonum chinense Linn.J Chin Med Mater(中药材)，2005，28:1000-1001.

5 Joshi B，Bisht G，Bisht D.Chemical constituents and antifungal activity of Polygonum chinense.Chem Pharm Bull，1997，14:7-10.

6 Ahmed M，Hassan MA.5，6，7，4'-Tetrahydroxy-3'-methoxyflavone(batatifolin)from Polygonum chinense.Pharmazie，1990，45:225.

7 Zhu H(朱华)，Gao Y(高雅)，Zhang KF(张可锋)，et al.Content Determination of Quercetin in Polygonum chinense L.from Different Growing Areas.Trad Chin Drug Res＆Clin Pharm(中药新药与临床药理)，2009，20:557-559.

8 Lin HZ(林焕泽)，Wu XR(吴秀荣).Determination of quercitrin in Polygonum chinense L.by HPLC.Chin J Hosp Pharm(中国医院药学杂志)，2006，26:1032-1033.

9 Lai FE(赖飞蛾)，Gao Y(高雅)，Zhang KF(张可锋).Tannins content determination of Polygonum chinense L.from different growing areas.J Anhui Agri Sci(安徽农业科学)，2009，37:13596-13599.

10 Xie T(谢韬)，Liu J(刘净)，Liang JY(梁敬钰)，et al.Studies on thechemicalconstituentsofArtemisia scoparia Waldst.et kit..Chin J Chin Mater Med(中国中药杂志)，2005，30:1390-1391.

11 Li N(李宁)，Li X(李铣)，Feng ZG(冯志国)，et al.Chemical constituents from Canavalia gladiata.J Shenyang Pharm Univ(沈阳药科大学学报)，2007，24:676-677.

12 Wang J(王静)，Peng SL(彭树林)，Wang MK(王明奎)，et al.Chemical Constituents of Hyper ricum monogynum.China J Chin Mater Med(中国中药杂志)，2002，27:120-122.

13 Ye G，Fan MS，Huang CG.Ellagic acid glycosides from the stem bark of Aphananthe aspera.Chem Nat Compd，2007，40: 558-560.

14 Li YX(李云霞)，He WZ(贺文智)，Suo QL(索全伶)，et al.A review of study on the relationships between structure and activity of flavonoids compounds.Inner Mongu Petrochem Indu.(内蒙古石油化工)，2004，30(2):10-12.

15 Zhang N(张囡)，Du LL(杜丽丽)，Wang D(王东)，et al.Advances in phenol acids in Chinese herbs.Modern Chin Med.(中国现代中药)，2006，8(2):25-28.

Chemical Constituents from Polygonum chinensis L.

REN Heng-chun1，WAN Ding-rong2，GU Jing1，ZOU Zhong-mei1*1Institute of Medicinal Plant Development，Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College，Beijing 100193，China;2South-Central University For Nationalities，Wuhan 430073，China

To control the quality，the chemical constituents of the aerial part of Polygonum chinensis L.were studied.Nine compounds were isolated and purified by silica gel and Sephadex LH-20 chromatography，and their structures were identified as n-heptacosanol(1)，β-sitosterol(2)，methyl gallate(3)，daucosterol(4)，gallic acid(5)，quercetin(6)，quercitrin(7)，hyperoside(8)and 3-O-methy-lellagic acid 4-O-rhamnopyranoside(9)by spectroscopic analysis，respectively.Among them，compounds 1 and 9 were isolated from genus Polygonum for the first time，while 4 and 8 were isolated from this plant for the first time.

Polygonum chinensis L.;Polygonum;flavonoids;ellagic acid glycoside

1001-6880(2012)10-1387-04

2011-11-21 接受日期:2012-03-16

重大新药创制专项(2011ZX09307-002-01)

*通讯作者 Tel:86-10-57833292;E-mail:zmzou@implad.ac.cn

R284.2

A