百令胶囊对早期糖尿病肾病氧化应激的影响

杨 磊 郭 娟 (南方医科大学附属郑州人民医院肾病移植科，河南 郑州 450000)

百令胶囊对早期糖尿病肾病氧化应激的影响

杨 磊 郭 娟1(南方医科大学附属郑州人民医院肾病移植科，河南 郑州 450000)

百令胶囊;氧化应激;糖尿病肾病

糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)的常见并发症之一，在DM病人发生率约为20% ～40%〔1，2〕，最终导致肾衰竭。由于DM肾脏病变为慢性进行性损害，症状出现较晚，一般出现尿蛋白时病程多在10年以上，一旦出现持续性蛋白尿，肾功能将不可遏制地进行性下降〔3〕。因此，早期治疗可以延缓DN进展，减少医疗费用。目前越来越多的证据表明氧化应激在DN发病中起重要作用〔4〕。本文旨在观察百灵胶囊对氧化应激的影响以及氧化应激与DN早期尿白蛋白排泄率的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 入选病例为2007年1月至2011年1月在我院肾病移植科入院的早期DN患者72例，随机分为实验组36例和对照组36例，其中男48例，女34例，年龄54～72〔平均(64.8±10.2)〕岁。

1.2 方法

1.2.1 纳入标准 入选患者均符合1997年美国糖尿病协会/世界卫生组织(ADA/WHO)糖尿病诊断标准和分类标准，同时符合下列条件:根据 Mogensen的 DN分期，UAER水平20～200μg/min为早期DN患者。各组治疗前后肝功、肾功、血脂指标比较均无统计学差异(均P＞0.05)。另选择30例正常人为健康组，排除急、慢性感染，急性心脏、肝脏、胃肠道及血液系统疾病，各种肾病、自身免疫性疾病，有毒物接触史、辐射史、酗酒史及服用免疫抑制剂者。

1.2.2 治疗方案 全部患者使用胰岛素控制血糖，同时给予降压、降血脂、抗血小板聚集、血管紧张素转化酶受体拮抗剂等糖尿病综合治疗。实验组在常规治疗的基础上加用百令胶囊(杭州中美华东制药有限公司)每次5粒，3次/d口服。

1.2.3 检测方法 用羟胺法检测超氧化物歧化酶(SOD)，硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛(MDA)，试剂盒均由南京建成生物研究所提供，用酶联免疫吸附法检测血清晚期蛋白氧化产物(AOPPs)，试剂由武汉中美科技公司提供，用固相三明治免疫法、挪威Axis-shield公司提供的试剂盒检测UEAR。分别测定对照组和实验组治疗前和治疗3个月后血浆MDA、AOPPs、SOD和24 h UAER。另选择30例正常人为健康组，测定健康组的 MDA、AOPPs、SOD 和24 h UAER。

1.3 统计学方法 应用SPSS13.0统计软件进行分析，所有数据均采用±s表示，治疗前后及两组间数据比较采用t检验，组间比较用单因素方差分析。

2 结果

2.1 百令胶囊对早期DN氧化应激的影响 对照组和实验组治疗前较健康组血浆MDA、AOPPs显著升高(P＜0.01)，SOD较健康组显著降低(P＜0.01);实验组治疗后3个月MDA、AOPPs较治疗前下降(P＜0.05)，SOD较治疗前升高(P＜0.05)。对照组治疗后3个月MDA、AOPPs较治疗前下降，但差异无显著意义(P＞0.05)，SOD较治疗前有所升高，差异无显著意义(P＞0.05)。见表1。

2.2 百令胶囊对24 h UAER的影响 对照组和实验组治疗前24 h UAER较健康组显著升高(P＜0.01);实验组治疗后3个月24 h UAER较治疗前下降(P＜0.05);对照组治疗后3个月，24 h UAER较治疗前下降，但差异无显著意义(P＞0.05)。见表1。

2.3 血清氧化应激指标与UAER的相关性分析 相关分析发现，血清中MDA、AOPPs与24 hUAER的相关系数分别为0.84、0.75(P＜0.05)，均呈显著正相关;而SOD与24 h UAER的相关系数为－0.76，P＜0.05，呈显著负相关。

表1 治疗前后各组MDA、AOPPs、SOD、24 h UAER变化情况(±s)

表1 治疗前后各组MDA、AOPPs、SOD、24 h UAER变化情况(±s)

组别 n MDA(nmol/ml) AOPPs(μmol/L) SOD(U/ml) 24 h UAER(mg/d)健康组 30 3.899±0.545 21.678±3.093 108.750±8.610 13.8±1.4对照组 治疗前 36 4.823±0.526 70.797±12.401 80.465±5.371 276.5±13.2治疗后3个月 36 4.435±0.347 68.372±12.538 82.123±5.746 235.5±29.4实验组 治疗前 36 4.853±0.493 70.629±11.814 81.426±4.346 279.3±30.4治疗后3个月 36 3.738±0.513 62.974±12.516 86.850±4.936 135.8±26.6

3 讨论

目前关于DN的发病机制尚未完全明了。普遍认为反应性氧化物过多是造成DN各种损害的共同机制〔1〕。生理情况下，组织细胞内活性氧(ROS)的产生和清除保持平衡，氧化应激是指机体活性氧(ROS)的产生增加和清除(ROS)的能力降低，由此导致ROS的生成和清除失衡。糖尿病时，高糖环境可诱导细胞多种代谢紊乱，包括多元醇途径、己糖胺代谢途径、蛋白激酶C(PKC)激活等;而且，还有次生的AOPPs和糖基化蛋白产物(AGEs)的继发作用，引起肾脏严重而持久的细胞氧化应激。近年研究发现，高糖刺激肾脏肾素血管紧张素系统活化、进而促进肾脏严重氧化应激反应，可能发挥了更为重要的病理作用〔2～4〕。

长期的高血糖环境引起蛋白的糖基化反应增强和抗氧化应激功能减低，同时长期的高氧化应激水平引起体内氧化应激产物过多，导致难以控制的脂质过氧化作用，引起肾皮质脂质过氧化产物MDA生成增多〔5〕。MDA可与含游离氨基酸的蛋白质发生交联，使血管基膜增厚〔6〕。AOPPs是在氧化应激过程血清白蛋白氧化生成的蛋白交连物，是各种蛋白质氧化终末产物的总称，Soliman〔7〕指出，DM及DN患者的血清AOPPs高于健康人群，张蕾〔8〕报道，终末期DN患者血清AOPPs明显高于DM患者。氧自由基的增加可能会致肾小球滤过膜上的负电荷丢失，肾小球的滤过屏障受损，使带有负电荷的白蛋白易于从肾小球滤过膜溢出，尿蛋白排出量增加，在早期表现为尿微量白蛋白的升高。SOD特异性地清除氧自由基，是防御内外环境中超氧离子损伤的重要酶，构成机体对自由基损伤的第一道防线，糖尿病患者体内SOD活性明显下降。

百令胶囊为冬虫夏草菌丝经生物工程方法精制而成的发酵虫草菌糖，主要成分有腺苷、多种氨基酸、甘露醇、糖及多种维生素、微量元素等。其中腺苷可使SOD升高，清除自由基，降低脂质过氧化物，保护患者肾脏免受损害，改善肾血流，抑制血小板聚集，稳定溶酶体膜，并促进肾细胞的修复，对抑制DN的发生发展，改善微循环，阻断和减轻肾微细血管病变，减少尿白蛋白的排泄，改善肾功能起着非常重要的作用。多种维生素和微量元素是人体必需的，可供DN患者补充所需或直接参与调节机体血糖、蛋白质、脂肪、SOD等的代谢〔9〕。

本文资料发现，DN患者血清中MDA和AOPPs含量显著高于对照组，SOD活性显著低于对照组，表明DN患者氧化应激明显增强。而使用百令胶囊治疗3个月后，患者血清中氧化应激指标如MDA、AOPP明显降低，SOD升高，同时尿白蛋白排泄率明显减少，提示百灵胶囊可有效抑制DN患者的氧化应激，减少尿蛋白的排泄，值得临床推广使用。

1 郭 芳，周国英.中西医结合治疗早期糖尿病肾病进展〔J〕.实用中医药杂志，2006;22(3):186-7.

2 Wei XF，Zhou QG，Hou FF，etal.Advanced oxidation protein products induce mesangial cell perturbation through PKC-dependent activation of NADPH oxidase〔J〕.Am J Physiol Renal Physiol，2009;296(2):427-37.

3 Shi XY，Hou FF，Niu HX，et al.Advanced oxidation protein products promote inflammation in diabetic kidney through activation of renal nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase〔J〕.Endocrinology，2008;149(4):1829-39.

4 Li HY，Hou FF，Zhang X，et al.Advanced oxidation protein products accelerate renal fibrosis in a remnant kidneymodel〔J〕.JAm Soc Nephrol，2007;18(2):528-38.

5 Cetinkaya A，Kurutas EB，Buyukbese MA，et al.Levels of malondialdehyde and superoxide dismutase in subclinical hyper-thyroidism〔J〕Mediators Inflamm，2005;20(1):57-9.

6 Descamps-Lalscha B，Jungers P，Witko-Sarsat V.Immune system dysregulation in uremia:role of oxidative stress〔J〕.Blood Purif，2002;20(5):481-4.

7 Soliman GZ.Blood lipid peroxidation(superoxide dismutase，malondialdehyde，glutathione)levels in egyptian type 2 diabetic patients〔J〕.Singapore Med J，2008;49(2):129-36.

8 张 蕾.糖尿病肾病患者晚期氧化蛋白产物与超氧化物歧化酶检测的临床意义〔J〕.中华实用诊断与治疗杂志，2008;22(12):898-9.

9 潘慧娟.百令胶囊治疗慢性肾衰竭临床观察〔J〕.现代医药卫生，2007;20(3):345-6.

R589.1

A

1005-9202(2012)16-3518-02;

10.3969/j.issn.1005-9202.2012.16.082

1 南方医科大学附属郑州人民医院检验科

杨 磊(1969-)，女，副主任医师，硕士，主要从事肾小球疾病诊治研究。

〔2011-11-17收稿 2011-12-10修回〕

(编辑 袁左鸣)