高效液相色谱法测定肾舒康胶囊淫羊藿苷含量

易廷平

（重庆市永川区人民医院，重庆 402160）

高效液相色谱法测定肾舒康胶囊淫羊藿苷含量

易廷平

（重庆市永川区人民医院，重庆 402160）

目的:测定肾舒康胶囊中淫羊藿苷的含量。方法:采用高效液相色谱法（HPLC法），色谱柱为C18柱（250mm×4.6mm，5μm），以乙腈-水（28∶72）为流动相，检测波长为270nm。结果:淫羊藿苷在0.24～2.40μg范围内线性关系良好，加样回收率为98.51%，RSD为0.47%。结论:HPLC法简便、准确，可用于质量控制。

淫羊藿苷;肾舒康胶囊;HPLC

肾舒康胶囊为我院院内制剂，由淫羊藿、川牛膝、车前草、地黄、王不留行等组成，具有益气补肾、通淋化瘀功效。临床主要用于肾脾两虚、气滞血瘀所致小腹坠胀、小便点滴不出。为有效控制产品质量，我们采用高效液相色谱法测定淫羊藿主要成分淫羊藿苷的含量，简便快速，结果准确，介绍如下。

1 仪器与试药

仪器:Waters Alliance 2695/2996型高效液相色谱仪，Empower色谱工作站（美国Waters公司），超声波提取器（昆山市超声仪器有限公司）。

试药:淫羊藿苷对照品（批号110756-200810，供含量测定用，中国药品生物制品检定所提供），乙腈为色谱纯、水为纯化水，肾舒康胶囊（本院自制，批号111101，111102，111103）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱为 Phenomenex C18柱（250mm ×4.6mm，5μm），流动相为乙腈 -水（28∶72），流速为 1.0mL/min，检测波长为270nm。理论塔板数按淫羊藿苷峰计算应不低于3000。

2.2 供试品溶液的制备

取本品装量差异项下的内容物，研细，取0.5g，精密称定，加甲醇40mL，称重，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3 方法学考察

线性关系考察:精密称取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.12mg的溶液，作为对照品溶液。精密吸取对照品溶液2、4、8、16、20μL，注入液相色谱仪，以淫羊藿苷进样量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐标（Y）进行回归分析。得回归方程 Y=130462.80X+10624.55（r=0.9999）。结果表明，淫羊藿苷进样量在0.24～2.40μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

方法专属性考察:按肾舒康胶囊制备工艺，制备缺淫羊藿的阴性样品，照供试品溶液制备方法制成阴性供试品溶液。照上述色谱条件，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液溶液各10μL，进样。供试品溶液色谱图中，在与淫羊藿苷对照品溶液色谱图相应位置上有相同色谱峰，阴性供试品溶液无相应色谱峰，表明阴性样品对测定无干扰，选择性较好。

精密度试验:精密吸取对照品溶液10μL，重复进样5次，测定淫羊藿苷峰面积，相对标准偏差为0.85%。

稳定性试验:取同一供试品溶液，分别于0、2、4、8、14h进样，结果淫羊藿苷峰面积值相对标准偏差为1.07%，表明供试品溶液稳定性至少在14 h内稳定。

重现性试验:按拟定的含量测定方法，取同一批样品6份，测定，计算淫羊藿苷的含量，结果样品中淫羊藿苷平均含量为2.20mg/粒，相对标准偏差为1.17%。

加样回收率试验:取已知含量的样品6份，分别加入淫羊藿苷对照品，按拟定的供试品溶液制备方法和测定条件，测定淫羊藿苷含量，计算回收率，结果见表1 。

表1 淫羊藿苷加样回收率试验结果

2.4 样品含量测定

按2.2项下制备方法制备供试品溶液，并按2.1项下测定方法测定样品中淫羊藿苷含量，结果见表2 。

表2 样品含量测定结果

3 讨论

本含量测定方法样品目标色谱峰与相邻色谱峰分离良好，参照药典方法［1］，选用乙腈-水系统作为流动相，基线平稳，经多次试验，以乙腈-水为流动相能使样品中淫羊藿苷峰与相邻色谱峰达到基线分离，淫羊藿苷与相邻色谱峰分离良好，峰形对称，阴性对照无干扰。

供试品溶液制备方法，参考文献报道［2-4］，分别考察:①甲醇回流提取后，加水使溶解，用乙酸乙酯提取，乙酸乙酯液蒸干，残渣加甲醇使溶解作为供试品溶液;②甲醇超声提取作为供试品溶液;③甲醇回流提取作为供试品溶液;④乙醇超声提取作为供试品溶液。实验结果表明，甲醇超声提取作为供试品溶液，方法快速、峰形对称。并对甲醇提取时间进行考察，分别超声处理20、30、40min，测定样品中淫羊藿苷含量，超声40min，供试品中淫羊藿苷含量无增加，故选用超声提取30min制备供试品溶液。另对甲醇用量进行试验，结果表明加入甲醇40mL能够使样品中淫羊藿苷提取完全，方法重复性好、操作性强，可用于肾舒康胶囊的质量控制。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［M］.北京:化学工业出版社，2010.306.

［2］李英莲，贾贵龙，车轩.HPLC测定净石灵片中淫羊藿苷的含量［J］.中国实用医药，2010，5（36）:49.

［3］黄耀广，陈秀英，陈小雪.RP-HPLC法测定补肾强身片中淫羊藿苷的含量［J］.中国药事，2010，24（12）:1226.

［4］杨春静.高效液相色谱法测定壮肾安神片中淫羊藿苷含量［J］.中国药业，2010，19（21）:31.

Objective:To determine the contents of Icariin in Shenshukang Capsules.Methods:HPLCmethod was adopted and a C18 column（250mm×4.6mm，5μm）was used.Themobile phase was acetonitrile-water（28∶72）.The detection wavelength was at270nm.Results:The calibration curve of Icariin was linear in the range of0.24 ～2.40μg（r=0.9999），the averge of recovery was98.51%，RSD=0.47%.Conclusion:Themethods is simple and accurate，It can be used for quality control of Shenshukang Capsules.

Icariin;Shenshukang Capsules;HPLC

R284.1

B

1004-2814（2012）06-514-02

2012-01-19

●综 述●