GC 法测定香茅中香叶醇的含量

陈妙芬，冯静仪，刘秋琼，林秋晓，肖志杏（.广东省人民医院药学部/广东省医学科学院，广州市50080；.南方医科大学，广州市 5005）

香茅Cymbopogon citratus（DC.）Strapf为多年生禾本科植物，别名大风茅、柠檬茅、柠檬草、茅草茶、姜巴茅、姜草、香巴茅、香茅草、风茅草、姜巴草。它广泛种植于全世界的热带地区，在我国南方地区作为经济作物栽培。从其叶中提取的香茅油是重要的香料原料，也可作药用，具有抗菌[1]、抗炎、降压[2]、免疫调节和肿瘤抑制作用[3]。

香茅挥发油的成分随香茅具体品种不同而不同。程必强等[4]对西双版纳热带植物园中种植的6种香茅属植物精油成分进行了分析，从亚香茅中分到38种化合物，主含香茅醛（36.055%）、香叶醇（21.33%）；从爪哇香茅中分到30种化合物，主含香茅醛（25.75%）、香叶醇（19.01%）、榄香树脂（10.64%）。陈集双等[5]对香茅叶挥发油成分进行分析，其主要成分是香叶醛和橙花醛，其次是β-香叶烯、香叶醇、乙酸香叶酯、香叶酸等。可见，香叶醇是香茅油的主要成分，可作为其质量控制的重要指标，故本试验通过气相色谱（GC）法测定香茅中香叶醇的含量。

1 仪器与试药

SHIMADZU-2010型GC仪、氢火焰离子化检测器（FID）、色谱工作站（日本岛津公司）；gh-300c氢气发生器（北京中兴汇利科技发展有限公司）；QL型纯净空气泵（济南应用化工科技开发有限公司）；KH-500型超声波清洗器（昆山市禾创超声仪器有限公司）；CP2245电子天平（德国Sartorius公司）。

高纯度氮气（广州气体厂，含量≥99.999%，压力（20℃）≥13.6 MPa）；乙醇（分析纯，广州化学试剂厂）；香茅药材采自广州从化，由广东省药品检验所林惠容主任中药师鉴定为香茅C.citratus（DC.）Strapf，存放于广东省药品检验所，编号为01、02、03、04、05、06）；香叶醇对照品（中国药品生物制品检定所，批号：111643-200301）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Agilent Technologies DB-WAX（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；固定相：聚乙二醇（PEG-20M），涂布质量浓度：20%；柱温：130℃；检测器：FID；进样口温度：230℃；检测器温度：250℃；分流进样，分流比：20∶1；程序升温：初始80℃，保持2 min，以7℃·min-1升至200℃，保持5 min；载气：氮气，流量为1.0 mL·min-1；燃气：氢气，流量为40 mL·min-1；助燃气：空气，流量为400 mL·min-1。色谱见图1。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取香叶醇对照品适量，加乙醇制成每1 mL含0.015 3 mg的对照品溶液，摇匀，即得。

图1 气相色谱图Fig 1 GC chromatograms

2.3 供试品溶液的制备

精密称取香茅样品粗粉5 g，置具塞三角烧瓶中，精密加入25 mL乙醇，称重，超声振荡（频率：40 kHz，功率：500 W）20 min后再称重，用乙醇补足失重，过滤，取续滤液作为供试品溶液。

2.4 线性关系考察

精密吸取对照品溶液1、2、3、4、5、6、7 µL，按上述色谱条件分别进样，测定峰面积。以浓度（X）为横坐标，峰面积积分值（Y）为纵坐标，进行线性回归，得回归方程为Y＝2 129.2X+1 091（r＝0.997 3，n＝7）。结果表明，香叶醇进样量在0.015 3～0.107 1µg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。

2.5 精密度试验

精密吸取对照品溶液5µL，重复进样6次，测定峰面积。结果，RSD＝0.83%（n＝6），表明仪器精密度良好。

2.6 稳定性试验

取同一批供试品溶液适量，连续在0、1、2、4、8、12、24 h分别进样，考察其稳定性。结果，香叶醇峰面积的RSD＝1.4%（n＝7），表明供试品溶液在24 h内稳定。

2.7 重复性试验

精密称取香茅样品粗粉适量，共6份，分别按“2.3”项下方法制成供试品溶液，按上述色谱条件测定峰面积。结果，RSD＝1.55%（n＝6），表明方法重复性良好。

2.8 加样回收率试验

取已知香叶醇含量（0.037 6%）的样品6份，每份约2.5 g，精密称定，分别添加已知浓度的香叶醇对照品溶液（0.945 mg·mL-1）1 mL，按“2.3”项下方法制成供试品溶液，按上述色谱条件测定，计算加样回收率，结果见表1。

2.9 样品含量测定

取6批香茅样品各适量，分别按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件测定样品中香草醇的含量，结果见表2。

表1 加样回收率试验结果（n＝6）Tab 1Results of recovery test（n＝6）

表2 样品含量测定结果（n＝3）Tab 2Results of content determination of samples（n＝3）

3 讨论

笔者曾考察超声时间对提取效果的影响。精密称取香茅样品3份，每份5 g，置具塞三角烧瓶中，精密加入25 mL乙醇，称重，分别超声10、20、30 min进行提取后再称重，补充溶媒至原重量，摇匀，过滤，取续滤液，按上述色谱条件进行测定，结果见表3。

表3 超声时间对提取结果的影响Tab 3 Effect of ultrasonic time on the results of extraction

由表3可知，超声提取20、30 min的提取效果较超声10 min的效果更好，而超声20 min与30 min的提取效果无显著性差异，故选择超声提取20 min为较佳方案。

综上，本方法简便、快速、准确、重复性好，可用于香茅的质量控制。

[1] 杨森艳，姚 雷.柠檬草精油抗菌性研究[J].上海交通大学学报（农业科学版），2005，23（4）：374.

[2] 廉晓红，李德山，窦玉琴，等.香茅草提取物的免疫调节作用与肿瘤抑制作用[J].沈阳药科大学学报，2005，22（4）：295.

[3] 刘昌孝.香茅叶的药理研究[J].国外医药·植物药分册，1989，1：29.

[4] 程必强，许 勇，喻学俭，等.六种香茅属植物资源及精油成分[J].香料香精化妆品，1994，3：6.

[5] 陈集双，彭崇胜，杜琪珍，等.香茅叶挥发油化学成分的研究[J].中国药学杂志，2000，35（7）：462.