HPLC法测定冠心舒通胶囊中没食子酸的含量

马久太 单 娜 卢新义 王晓梅 刘 峰 南景一

(1陕西步长制药有限公司，陕西咸阳，712000;2陕西省中药制药工程技术研究中心)

冠心舒通胶囊是以蒙医理论为依据研制而成的一种新药，由广枣、天竺黄、丹参等5味药制备而成，具有活血化瘀、通经活络、行气止痛的功能，用于胸痹心血瘀阻导致的冠心病、心绞痛等疾病的治疗［1］。为更好地控制产品质量，本研究在其原质量标准基础上，对君药广枣中的没食子酸进行含量测定，并对方法学进行了研究，现报道如下。

1 仪器与试药

3400A型高效液相色谱仪;二极管阵列检测器;AR1140电子天平;KQ·250TB超声波清洗器;ΜPT－1－10高纯水机。没食子酸对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号831－9501);冠心舒通胶囊(陕西步长制药有限公司生产，批号 090411、090621、090814、091011、091210、100321、100521、100812、101015、101215);甲醇为色谱纯，水为高纯水，其他均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验［2－3］以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(250mm×4.6mm，5μm);以甲醇－0.1%磷酸水(10∶90)为流动相;流速1.0mL·min－1;检测波长273nm;柱温30℃。理论塔板数按没食子酸峰计算不得低于3000。

2.2 供试品溶液制备 取本品内容物适量，研细，约取2.0g，精密称定，精密加入70%甲醇20mL，称定重量，加热回流30min，放冷，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。

2.3 对照品溶液制备 精密称取没食子酸对照品适量，加甲醇制成每1mL含50.87μg的溶液，即得。

2.4 干扰性试验 依据处方制备不含广枣的样品，按照供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液，分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液与阴性对照溶液各10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果在对照品相应位置处，供试品有吸收峰，阴性没有吸收峰，表明无干扰，且基线分离良好。

2.5 线性关系考察 精密吸取对照品溶液(50.87μg·mL－1)2、4、6、8、10μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件进行测定，记录峰面积。以进样量(X)为横坐标，峰面积值(Y)为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程式:Y=3 ×106X+14845，r=0.9999，结果表明，没食子酸进样量在0.1017～0.5087μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。见图1。

图1 没食子酸标准曲线

2.6 精密度试验 取冠心舒通胶囊(批号100521)，按上述供试品溶液制备方法制备供试品溶液，并按上述色谱条件操作，重复进样6次，记录峰面积，结果见表1。结果没食子酸峰面积积分值RSD为1.28%，表明本方法精密度良好。

表1 精密度试验结果

表2 稳定性试验结果

2.7 稳定性试验 取冠心舒通胶囊(批号100521)供试品溶液，按上述色谱条件操作，分别在 0、1、2、4、8、12h进样，记录峰面积，结果见表2。结果没食子酸峰面积积分值RSD为0.79%，表明供试品溶液在12h内稳定性良好。

2.8 重复性试验 取冠心舒通胶囊(批号100521)样品6份，按上述方法制备供试品溶液，并按上述色谱条件操作，记录峰面积，计算，结果见表3。结果RSD为1.39%，没食子酸含量为0.264mg·g－1，表明本方法重复性良好。

表3 重复性试验结果

2.9 加样回收率试验 取冠心舒通胶囊(批号100521)6份，各约1.0g，精密称定，加入一定量的没食子酸对照溶液(100.87μg·mL－1)，按上述方法制备供试品溶液，并按上述色谱条件操作，记录峰面积，计算回收率，结果见表4。结果平均回收率为99.44%，RSD为0.66%，表明回收率良好。

表4 加样回收率试验结果

2.10 样品含量测定及限度确定 随机抽取近2年内生产的10个批次的冠心舒通胶囊，按照上述方法测定没食子酸含量，结果见表5。结果10批样品的含量测定数值在78.6～106.8μg/粒之间，平均值为92.5μg/粒，故拟定本品每粒含没食子酸不得少于75μg。

表5 冠心舒通胶囊中没食子酸含量测定结果

3 讨论

广枣为蒙医和藏医习用药材之一，临床主要用于气滞血瘀引起的胸痹作痛的治疗，现代药理学研究表明广枣有明显的抗心肌缺血的作用［4］，没食子酸为其主要成分，因此我们对冠心舒通胶囊君药广枣中的没食子酸进行了含量测定。没食子酸含量测定方法目前有比色法、薄层分光光度法、高效液相色谱法、反相高效液相色谱法等，本次试验采用高效液相色谱法对冠心舒通胶囊进行含量测定，平均回收率99.44%，RSD 0.66%，方法灵敏、准确、重现性好。试验研究［5－7］中曾考察了没食子酸的不同提取方法，结果以回流提取法＞冷浸过夜法＞超声提取法，说明温度较高条件下没食子酸容易提取;同时回流提取30min，能够将冠心舒通胶囊中没食子酸提取完全。

［1］国家药典委员会.冠心舒通胶囊质量标准［S］［标准号WS3－155(Z－025)－2005(Z)］.

［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版一部［S］.北京:化学工业出版社:41.

［3］龙海燕，彭飞成，姚蓉.高效液相色谱法测定复方青果颗粒中没食子酸含量.中南药学，2010，8(6):416 －419.

［4］王平.民族药广枣有效部位药代动力学研究［D］.成都中医药大学，2004.

［5］冶平.HPLC测定藏药五味麝香片中没食子酸的含量.中国执业药师，2011，8(1):38 －39.

［6］苏孝共，郑国平，蔡进章.高效液相色谱法测定泌淋胶囊中没食子酸的含量.浙江中医药大学学报，2010，34(2):273－274.

［7］戚重恒，倪观锋.高效液相法测定地稔中没食子酸的含量.浙江中医杂志，2010，45(3):220 －221.