不同炮制方法对党参中党参炔苷含量的影响

黄 健 李 洋 庄志宏 陈志峰 何晓东 曹艳楠 毛克臣

(1首都医科大学附属北京中医医院，北京市东城区美术馆后街23号，100010;2北京杏林药业有限责任公司)

党参为桔梗科植物党参Codonopsis pilosula(Franch)Nannf.素花党参 Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta(Nannf)L.T.Shen或川党参Codonopsis tangshen Oliv.的干燥根，始载于《本草从新》。党参性味甘、平，归脾、肺经，具有健脾益气，养血生津的功能，用于脾肺气虚，食少倦怠，咳嗽虚喘，气血不足，面色萎黄，心悸气短，津伤口渴，内热消渴［1］。党参的化学成分主要有多糖，党参苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，正己基－B－D－葡萄糖苷，a－D－果糖乙醇苷等。三萜类化合物木栓酮、蒲公英萜醇乙酸酯，苍术内酯Ⅱ、Ⅲ，丁香醛，香草酸等。我们在本实验采用高效液相色谱法(RP－HPLC)法，选取山西、甘肃、辽宁3个不同产地的党参，对其中的定性成分党参炔苷进行含量测定［2］。考察党参在加工过程中经过硫磺熏蒸与未经过硫磺熏蒸党参炔苷的含量变化，以了解硫磺熏蒸对党参中党参炔苷含量的影响。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 1200高效液相色谱仪，包括Agilent G1311A四元泵(Quatpump)，Agilent G1322A真空在线脱气机(Degasser)，Agilent G1329A自动进样器(ALS)，Agilent G1315D DAD 检测器，Agilent 1200化学工作站，Agilent G1316A(TCC)柱温箱，色谱柱Agilent Eclipse XDB －C18(150mm ×4.6mm，5μm)，AL204型电子天平(METTLER TOLEDO)。

1.2 试药 党参炔苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号111732－200904)，乙腈、甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯。党参为山西党参、辽宁党参、甘肃党参。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱:Agilent Eclipse XDB－C18(150mm ×4.6mm，5μm);流动相:乙腈 － 水(28∶72)，流速:1.0mL/min;柱温:室温;检测波长:267nm。进样量为10μL。色谱柱的理论板塔数不低于5000nm。按党参炔苷峰计算为在此条件下，党参炔苷与其他组分均能达到基线分离。

2.2 对照品溶液制备 精密称取党参炔苷对照品5.0mg，置于10mL量瓶中，加无水乙醇溶液并稀释至刻度，摇匀得到0.5mg·mL－1对照品储备液。用微量注射器精密吸取对照品储备液100μL，置1mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀得到0.05mg·mL－1对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 取党参对照药材适量，捣碎，过40目筛，粉末于40℃干燥5h，置于干燥器中备用。精密称取已干燥的党参粉末0.5g，置量瓶中，加无水乙醇10mL，超声25min，滤过量瓶中残渣再加无水乙醇8mL，超声15min，滤过，残渣再加无水乙醇8mL，超声10min，滤过，合并3次滤液。滤液置水浴上挥去无水醇近干后，残渣加甲醇溶液，并转移至5mL量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm微孔过滤，弃去初滤液，收集。

2.4 线性关系考察 分别吸取以配好的0.05mg·mL－1党参炔苷对照品溶液 0.1、0.3、0.5、1、2、3mL 进样，以峰面积(Y)对进样量(X)做工作曲线，得党参炔苷的回归方程为r=0.9985，y=316.14x+8.724。

图1 党参炔苷标准曲线

2.5 精密度和稳定性考察 精密吸取同一样品溶液10μL进样，连续5次，测得峰面积，计算 RSD值为0.04%。

2.6 重复性考察 精密称取同一样品5份，每份0.5g，按“2.3”项下方法操作制得样品溶液，吸取10μL进样，色谱条件同上，RSD=1.83%。

2.7 回收率试验 采用加样回收，精密称取以测定含量的同一样品 6 份各0.2567、0.2549、0.2543、0.2579、0.2524、0.2518分别加党参炔苷对照品，按供试液的制备方法制备供试液，进样，记录色谱，计算回收率。平均回收率为87.76﹪，RSD=0.09%，结果见表1。

表1 加样回收率实验结果(n=6)

2.8 样品测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品(样品1～6)溶液各10μL，注入液相色谱仪，按“2.1”项下色谱条件测定，样品含量按干燥品计算，结果见表2。

表2 党参炔苷含量测定结果

3 讨论

通过实验观察，在党参加工过程中，经过硫磺熏蒸的党参中党参炔苷的含量为 7.67%、0.892%、1.814%，未经过硫磺熏蒸的党参中党参炔苷含量为10.62%、2.249%、2.489%。实验证明:未经过硫磺熏蒸的党参中党参炔苷含量高。

在药材加工过程中，使用硫磺熏蒸既可以使药材保鲜、防虫、防霉变，又易于切制、干燥，且饮片成品的形状整齐、颜色美观。但是经实验证明硫磺熏蒸方法对党参中党参炔苷的含量影响较大。熏药材所用的天然硫磺主含98.0%以上的单质硫，尚有少量钙、铁、铝、镁、铅、砷等近二十种元素［3］。在熏蒸过程中药材容易被污染，药材或饮片中的重金属残留物对人体是有害的，尤其是肝肾功能不全的患者更为严重。因此在加工生产中，禁止使用硫磺熏蒸药材。

同时作为中药学专业技术人员，要提高对硫磺熏蒸过药材或饮片的鉴别能力，不使用硫磺熏蒸过的品种。在饮片质量评价层面上，不能仅凭借外观去评价药材或饮片的优劣，更要注重药品的内在品质。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部).北京:中国医药科技出版社，2010:264－265.

［2］王润生，刘养清.山西党参药材中党参炔苷的含量分析.药物分析杂志，2007，27(8).

［3］张贵军.现代中药材商品通鉴.北京:中国中医药出版社，2001:887－9083.