高效液相色谱法测定硫酸罗通定注射液中罗通定的含量

邵雪力

（河南省周口市食品药品检验所，河南 周口 466000）

硫酸罗通定注射液，本品为淡黄色至黄色的澄明液体，遇光受热色泽加深。本品具有镇痛、镇静、催眠及安定作用。本品的作用机制尚待阐明，可能与通过抑制脑干网状结构上行激活系统、阻滞脑内多巴胺受体的功能有关。治疗量无成瘾性。适用于消化系统疾病引起的内脏痛（如胃溃疡及十二指肠溃疡的疼痛）、一般性头痛、月经痛、分娩后宫缩痛。适用于紧张性疼痛或因疼痛所致的失眠患者。国家药品标准采用紫外-可见分光光度法测定含量，本文采用HPLC法，对硫酸罗通定注射液进行含量测定。实验结果表明，本法专属性强、稳定性好，可作为含量测定的质控指标之一。

1 仪器及工作条件

岛津LC-2010C型全自动高效液相色谱仪，SCL-10AVP型紫外检测器，N2000液相色谱数据工作站；92sM-202ADR电子分析天平；PHS-3C酸度计；AS5150A型超声波振荡器。罗通定对照品（批号：100452-200301，中国药品生物制品检定所），硫酸罗通定注射液，规格：2mL∶60mg（市售品，天津药业焦作有限公司，批号：100506；广西河丰药业有限公司，批号：091001与批号：100803），磷酸二氢钾溶液、庚烷磺酸钠溶液及三乙胺均为分析纯；甲醇为色谱纯；水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：KromasilC18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：磷酸盐缓冲液（0.05mol/L磷酸二氢钾溶液和0.05mol/L庚烷磺酸钠溶液（1∶1），含0.2%三乙胺，用磷酸调pH至6.55）-甲醇（40∶60），检测波长为280nm，流速为1mL/min。柱温：30℃；进样量：20μL。在此条件下，罗通定保留时间为：12.7min。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取罗通定对照品0.0278g，置于100mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取滤液10mL于100mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，取20μL进样测定，记录色谱图。

2.3 供试品溶液的制备

精密量取本品1mL（约相当罗通定30mg），置于100mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取滤液10mL于100mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，取20μL进样测定，记录色谱图。

2.4 线性关系的考察

精密称取罗通定对照品0.0278g，置于100mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。精密量取储备液1.0、2.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0mL分别置于50mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀；按上述色谱条件，各取20μL进样，记录色谱图，以峰面积Y为纵坐标，对照品进样量（mg/mL）为横，进行线性回归。得回归方程（n=6）为：Y=45.912X-6.8502 r=0.9997，线性范围为：5.56～139μg/mL。

2.5 重复性实验

精密量取同一批号样品1mL（约相当于罗通定30mg）3份，按样品测定项下的方法测定罗通定的含量，分别为：99.8%、100.2%、100.5%，RSD为0.35%。

2.6 稳定性实验

取重复性实验中的第一份溶液，室温下在0、1、2、3、4h测定，记录各峰面积并计算RSD，计算得RSD=0.41%，n=5，结果表明，本品的供试品溶液在室温4h内基本稳定。

2.7 精密度试验

取同一份对照品溶液，连续进样5次，每次20μL，计算各成分的峰面积并计算RSD，结果RSD为0.35%，表明该系统的精密度较好。

2.8 加样回收率实验

精密称取已知含量的样品（批号：091001）1mL（约相当于罗通定30mg）5份，分别置于100mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取10mL于100mL容量瓶中，分别精密加入罗通定对照品储备液27.8μg，加流动相稀释至刻度，照样品测定项下的方法测定，结果见表1。

表1 回收率测定结果表（n=5）

2.9 样品含量的测定

按上述“2.1”色谱条件，从“2.2”、“2.3”中，各取20μL进样测定，记录色谱图；按外标法以峰面积计算，测得结果与国家药品标准[1]方法比较，结果见图1、2和表2。

图1 对照品图谱

图2 样品图谱

表2 用本法和标准法测定罗通定含量结果（n=3）

3 讨 论

3.1 流动相的选择

参考同品种国家药品标准的流动相[1]，以磷酸盐缓冲液（0.05mol/L磷酸二氢钾溶液和0.05mol/L庚烷磺酸钠溶液（1∶1），含0.2%三乙胺，用磷酸调pH至6.55-甲醇（40∶60）较合适，且保留时间适宜；加入0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，能提高柱效，加入三乙胺可改善拖尾。

3.2 本法与国家药品方法相比较，二者结果无明显差别，且该方法简便快捷，用来作为注射液的含量控制其准确度已足够，为药品标准的制定提供了一定的参考。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010.