乳腺癌中人表皮生长因子受体-2的表达与血管生成的相关性*

王 刚 赵三平 朱海燕 邹玉环 王明军 吴禹铮 徐卫国

乳腺癌的生长和转移依赖于新生血管生成,肿瘤微血管密度（MVD）是评价肿瘤血管生成的重要指标之一。HER-2是乳腺癌重要的分子标志物，有关HER-2与MVD及乳腺癌临床病理学特征之间关系一直存在争议[1-2]。本研究旨在探讨HER-2在乳腺癌中的表达及其与血管生成之间的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2006年1月—2007年1月于我院就诊的具有完整临床及病理资料的乳腺癌标本（乳腺癌组）98例，患者平均年龄（48.8±11.2）岁；同时取乳腺根治术标本中癌旁乳腺组织56例为对照组，患者平均年龄（50.8±13.6）岁。患者均为女性，术前均未行抗肿瘤治疗。组织学类型：浸润性导管癌81例，黏液癌、小管癌及乳头状癌等其他共17例。临床分期:Ⅰ~Ⅱ期62例，Ⅲ期36例。组织学分级:高分化17例，中分化58例，低分化23例。腋窝淋巴结状态:淋巴结转移阳性（淋巴转移组）63例，淋巴结未转移（淋巴未转移组）35例。

1.2 方法 标本经10%福尔马林固定，石蜡包埋，4 μm连续切片4张，行HE染色，HER-2、MVD免疫组化染色，PBS代替一抗做空白对照,实验步骤按试剂盒说明书进行。HER-2主要为细胞膜着色，阳性肿瘤细胞数<10%（-），10%~30%（+），>30%且<50%（++），>50%（+++），其中-、+、++记为阴性表达，+++记为阳性表达。MVD计数标准：CD105阳性染色主要定位于血管内皮细胞的细胞膜和细胞质，先在100倍显微镜下寻找微血管密集的5个区域作为热点，再在200倍镜下计数MVD值，5个区域的均值为MVD值。

1.3 统计学方法 采用SPSS 11.5统计软件处理。计量资料以±s表示，2组间均数比较行t检验，计数资料组间比较行χ2检验，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 各组乳腺组织中HER-2阳性表达情况及MVD值比较 HER-2阳性率及MVD在乳腺癌组与癌旁组、淋巴转移组与淋巴未转移组中比较，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 不同临床特征的HER-2阳性表达情况及MVD值比较 不同肿瘤大小、组织学分级、TNM分期乳腺癌患者组织中的HER-2阳性率比较，差异有统计学意义（P<0.05）。MVD值在不同组织学分级乳腺癌患者中差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

表2 不同临床特征的HER-2阳性表达情况及MVD值比较

3 讨论

HER-2基因定位于染色体17q21，编码分子质量为185 ku的跨膜蛋白，与表皮生长因子受体（EG⁃FR）具有高度同源性，正常情况下处于非激活状态，参与细胞生长、分化的调节。当受到体内外某些因素的作用而激活时具有肿瘤转化活性。其主要是通过基因扩增和蛋白过度表达，在细胞信号传递系统中起桥梁作用，能刺激细胞增生、浸润和转移，与乳腺癌等多种肿瘤的生物学行为有关。研究显示乳腺癌中HER-2/neu蛋白的过度表达约占15%~30%[1]。本研究显示HER-2在乳腺癌组织中阳性率为20.4%，高于癌旁组织，与上述文献报道一致。

临床TNM分期和肿瘤组织学分级一直是临床评估肿瘤恶性程度和患者预后的常用指标，尤其是腋窝淋巴结状态更为重要。本研究结果显示，HER-2阳性表达率在不同临床TNM分期、组织学分级和淋巴结转移中差异均有统计学意义，提示HER-2与肿瘤的恶性增殖、进展有关，其表达水平可作为反映乳腺癌生物学行为和判断乳腺癌预后的重要指标之一。

目前已有多种血管内皮标志物用于标记肿瘤微血管进行MVD计数，其中CD105对血管内皮细胞增生和活性具有高选择性。有关MVD与乳腺癌临床病理学特征及预后关系一直存在争议。本研究应用CD105标记MVD，结果显示乳腺癌组织中MVD值高于癌旁组织，腋窝淋巴结转移阳性组中MVD值高于淋巴结未转移组，低分化组中MVD值高于中、高分化组，表明MVD与乳腺癌临床病理学特征及预后关系密切。张春玲等[2]亦得出类似结果，但Shivakumar等[3]研究认为MVD可能与早期乳腺癌存在关联，当肿瘤进展出现坏死和出血后，MVD与乳腺癌临床病理学特征无相关性；Kanjana⁃panjapol等[4]用CD34标记MVD，亦发现MVD与乳腺癌复发和转移没有相关性，且认为MVD不能作为预测预后不良的指标。结合本文及相关研究[5]，笔者推测选用不同的血管标志物（F-VIII、CD34、CD31、CD105）、肿瘤病理类型不同、切片选择的差异及计数方法各异可能是造成研究结果不统一的主要原因。

“肿瘤生长依赖于血管生成”这一观点已为广大学者所公认。HER-2可能通过促进肿瘤血管生成而促进肿瘤细胞进展。Alicia等[6]用突变的HER-2转化N1H3T3成纤维细胞以诱导VEGF/血管通透因子（VPF），发现其因缺氧而进一步增强；用抗HER-2抗体处理HER-2过表达的乳腺癌细胞株SKBR-3，结果显示VEGF/VPF蛋白表达随剂量增加而降低，且认为HER-2至少部分通过对VEGF/VPF强烈的上调作用，刺激了肿瘤新生血管生成。

[1]Shin SJ,Hyjek E,Early E,et al.Intratumoral heterogeneity of her-2/neu in invasive mammary carcinomas using fluorescenceinsitu hy⁃bridization and tissue microarray[J].Int J Surg Pathol,2006,14(4):279-284.

[2]张春玲,马鸿达,白冬雨,等.乳腺浸润性导管癌微血管生成与转录因子Ets1表达之间的关系[J].天津医药,2009,37(2):94-97.

[3]Shivakumar S,Prabhakar BT,Jayashree K,et al.Evaluation of se⁃rum vascular endothelial growth factor(VEGF)and microvessel den⁃sity(MVD)as prognostic indicators in carcinoma breast[J].J Can⁃cer Res Clin Oncol,2009,135(4):627-636.

[4]Kanjanapanjapol S,Wongwaisayawan S,Phuwapraisirisan S,et al.Prognostic significance of microvessel density in breast cancer of Thai women[J].J Med Assoc Thai,2007,90(2):282-290.

[5]王刚,徐卫国,邹玉环.肿瘤微血管密度研究现状及进展[J].中国医药,2008,3(2):117-118.

[6]Alicia ZS,Blanca OS,Mariana GH,et al.RaPid Production of candi⁃da albicans chlamydosPores in liquid media under various incuba⁃tion conditions[J].NiPPon Ishinkin Gakkai Zasshi,2006,47(3):231-234.