MCM7及MMP-7蛋白在胃癌组织中的表达

阳诚柏，赵景志，庞 超，和志强，尹 磊，冯天平

(河南省军区直属医院，河南郑州450003)

胃癌是临床常见恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率近年来逐渐升高，且患者有年轻化趋势。胃癌发病机制的研究是目前关注的热点，但其具体机制尚未完全阐明。有关研究表明，微小染色体维持蛋白7(minichromosome maintenance protein 7，MCM7)及基质金属蛋白酶 －7(matrix metalloproteinases-7，MMP-7)与多种消化系统恶性肿瘤的发生发展关系密切［1－2］。作者应用免疫组化S-P法检测MCM7及MMP-7蛋白在胃癌组织中的表达，并探讨两者与胃癌临床病理学特征的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择郑州大学第二附属医院2008年1月至2010年12月收治的具有完整临床资料的85例胃癌、30例癌旁不典型增生及30例正常胃黏膜组织石蜡标本。85例胃癌患者的年龄35～65岁，中位年龄52岁;男性58例，女性27例;根据TNM分期标准，Ⅰ期18例，Ⅱ期20例，Ⅲ期30例，Ⅳ期17例;无浆膜浸润45例，有浆膜浸润40例;无淋巴结转移42例，有淋巴结转移43例;高分化30例，中分化19例，低分化25例，未分化11例;取材前均未接受过抗肿瘤治疗。30例癌旁不典型增生患者的年龄28～63岁，中位年龄49岁;男性18例，女性12例。30例正常胃黏膜患者的年龄20～59岁，中位年龄44岁;男性17例，女性13例。3组患者的年龄、性别构成具有可比性(P＞0.05)。

1.2 主要试剂 兔抗人MCM7抗体、兔抗人MMP-7抗体、S-P免疫组化试剂盒及DAB显色剂均购至福州迈新生物技术有限公司。

1.3 检测方法 所有石蜡标本切成4～5 μm切片。采用免疫组化S-P法检测MCM7及MMP-7蛋白在85例宫颈鳞癌、30例癌旁不典型增生、30例正常胃黏膜组织中的表达。用已知MCM7或MMP-7蛋白阳性表达的切片作为阳性对照，以磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照。

1.4 结果判定 MCM7蛋白阳性信号位于细胞核，MMP-7蛋白阳性信号位于细胞膜或细胞质，两者无染色为阴性(－)，淡黄色为(+)，黄色为(++)，棕黄色为(+++)，(+)～(+++)记为阳性。

1.5 统计学处理 采用SPSS 17.0进行统计学分析，计数资料比较采用χ2检验，相关性检验采用Spearman相关分析，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 MCM7及MMP-7蛋白在不同胃黏膜组织中的表达 MCM7蛋白在胃癌组织(82.4%)中的表达高于癌旁不典型增生组织(50.0%)和正常胃黏膜组织(43.3%)，差异有统计学意义(P=0.001，P ＜0.001)。MMP-7蛋白在胃癌组织(74.1%)中的表达高于癌旁不典型增生组织(50.0%)和正常胃黏膜组织(36.7%)，差异有统计学意义(P=0.015，P ＜0.001)。

2.2 MCM7及MMP-7蛋白的表达与各临床病理学特征的关系 MCM7及MMP-7蛋白的表达与胃癌患者各临床病理学特征的关系见表1。

2.3 MCM7蛋白与MMP-7蛋白的关系 胃癌组织中MCM7蛋白表达与MMP-7蛋白表达呈正相关关系(r=0.642，P ＜0.001)，见表2。

表1 MCM7及MMP-7蛋白的表达与各临床病理学特征的关系

表2 MCM7蛋白与MMP-7蛋白的关系

3 讨论

胃癌的侵袭和转移是其预后较差的主要原因，也是胃癌患者的主要死因，而对于胃癌而言，主要表现为侵及浆膜层和周围淋巴结发生转移，因此，这两个方面的研究对胃癌进展机制的探讨和治疗方案的选择具有重要意义［3］。

MCMs是由cdc基因编码的一组能够启动DNA复制的关键因子，包括MCM2～7等6个亚单位，不但参与DNA的复制和合成延伸，而且还与肿瘤细胞的增殖关系密切，其中MCM7蛋白作为家族成员之一，其表达水平能够代表家族蛋白的水平，可用于肿瘤癌变及进展的评估，已经发现其在前列腺癌、甲状腺癌等多种肿瘤组织中存在高表达［4－5］。本文研究结果显示:MCM7蛋白在胃癌组织中的表达高于癌旁不典型增生组织和正常胃黏膜组织，提示其在肿瘤的发生中可能起一定的作用;MCM7蛋白的表达还与TNM分期、浆膜浸润、淋巴结转移有关，提示其参与了胃癌的进展，这与有关的研究一致［5－6］。

MMPs是一组锌依赖性的内源性蛋白水解酶，是降解细胞外基质的主要酶类，至今已发现28种，该家族中MMP-7蛋白相对分子质量最小，但其具有较广泛的底物特异性和强大的基质降解功能，且能激活MMPs的其他成员以及表皮生长因子等，进而促进肿瘤的生长和进展。本研究发现，在胃癌组织中MMP-7蛋白呈高表达，且其在TNM分期的晚期高于早期，有浆膜浸润组织高于无浆膜浸润者，有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者，分化程度低者高于分化程度高者，提示MMP-7参与了胃癌的发生、发展，这与有关研究一致［2，7］。

通过相关性分析发现，胃癌组织中MCM7蛋白表达与MMP-7蛋白表达呈正相关关系，提示两者可能具有协同作用，在胃癌的癌变和进展过程中相互影响或受同一因素的影响而表达升高，从而参与胃癌的进展过程。

综上所述，MCM7及MMP-7蛋白在胃癌组织中均高表达，且呈正相关关系，两者的表达与胃癌的癌变及进展关系密切。

［1］刘娟，殷飞，姚树坤.细胞周期素D1、视网膜母细胞瘤样蛋白2及微小染色体维持蛋白7在干细胞癌中的表达及对预后的意义［J］.中国病理生理杂志，2011，27(2):304 －309.

［2］谭学军，李晓东.COX-2、MMP-7的表达与胃癌组织生物学行为的关系［J］.中国现代普通外科进展，2010，13(11):858 －860.

［3］周官保，张乐鸣.基质金属蛋白酶及抑制剂与胃癌侵袭、转移的关系［J］.现代实用医学，2011，23(2):234 －236.

［4］史琳，张安文，罗宇，等.甲状腺癌中MCM7和p27的表达及临床意义［J］.实用肿瘤杂志，2011，26(4):390 －393.

［5］陈军，曹骥，覃思繁.胃癌组织MCM7和p27蛋白表达及其临床意义的探讨［J］.中华肿瘤防治杂志，2010，17(21):1755 －1757.

［6］陈军，曹骥，覃思繁.MCM7和Rb蛋白在胃癌中的表达及临床意义［J］.实用医学杂志，2010，26(20):3707 －3709.

［7］李德艳，刘爱东，高峰.MMP-7和E-cad在胃癌组织中表达的临床价值［J］.中国老年学杂志，2011，31(2):185 －186.