557株大肠埃希菌耐药性分析

李晓云，梁立全（广西贺州市人民医院，贺州市 542800）

大肠埃希菌是肠杆菌中最常见的致病菌，尤其是产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的多重耐药性，给临床抗感染治疗带来很大困难。2007、2008、2009年我院大肠埃希菌的检出率分别为19.6%、20.0%、19.3%，占革兰阴性菌的31.1%、37.0%、36.9%，明显高于国内平均水平（28.0%）[1]。笔者对2007－2009年我院住院患者分离出的557株大肠埃希菌产ESBLs情况和对常用15种抗菌药物耐药率进行分析，为临床抗感染治疗提供用药依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本来源。取自于2007－2009年我院住院患者细菌培养的送检标本，包括痰、尿液、血液、脓液、分泌物及腹水等。

1.1.2 质控菌株。大肠埃希菌ATCC 25922。

1.1.3 培养基和试剂。MH培养基，购于杭州天和微生物试剂有限公司，细菌鉴定试剂购于法国生物梅里埃公司。

1.1.4 药敏纸片。氨苄青霉素、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南、环丙沙星、庆大霉素、阿米卡星、呋喃妥因、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、依诺沙星、左氧氟沙星，以上纸片和ESBLs检测试剂均购于杭州天和微生物试剂有限公司。

1.2 方法

1.2.1 操作方法。细菌分离与鉴定、标本接种按《全国临床检验操作规程》第三版操作。

1.2.2 菌种鉴定。采用常规方法及ATB细菌鉴定系统进行细菌鉴定。

1.2.3 药敏试验方法。采用纸片扩散法（K-B法），其方法及结果判断按美国临床实验室标准化协会（CLSI）最新标准进行。

1.2.4 ESBLs的检测。用双纸片法，在MH药敏平板上贴头孢他啶（30μg）、头孢他啶/克拉维酸（30μg/10μg）和头孢噻肟（30μg）、头孢噻肟/克拉维酸（30μg/10μg）。2组合中任何一组加克拉维酸比不加克拉维酸的药敏纸片抑菌环直径相差≥5mm即为产ESBLs。

2 结果

2.1 标本来源

大肠埃希菌的标本来源部位主要以呼吸道、皮肤创面和尿道为主，具体分布情况详见表1。

表1 大肠埃希菌标本来源分布情况Tab 1 Distribution of E.coli samples source

2.2 耐药率

大肠埃希菌对常用15种抗菌药物的耐药率以头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因、阿米卡星较低，其余抗菌药物的耐药率在52%以上，结果见表2。

表2 产ESBLs及不产ESBLs大肠埃希菌对常用15种抗菌药物药敏试验监测结果Tab 2 Results of susceptibility tests of E.coli producing ESBLs or not to 15 kinds of commonly used antibiotics

2.3 产ESBLs大肠埃希菌的检出率

在557株大肠埃希菌中，产ESBLs大肠埃希菌共242株，检出率为43.4%，其中头孢噻肟组217株，头孢他啶组25株，2组差异有统计学意义（P＜0.01）。2007、2008、2009年产ESBLs大肠埃希菌的检出率分别为35.9%、43.7%、46.9%。

3 讨论

3.1 病原菌标本来源及科室分布

大肠埃希菌所致感染，是最常见的革兰阴性菌感染，可波及肠道内及肠道外，包括肠炎、尿路感染、败血症、胆道感染、腹腔感染及新生儿脑膜炎[2]。而我院大肠埃希菌主要来源于痰、尿液和皮肤（创面、手术切口）分泌物，三者占总标本的73.1%，与文献[3]报道有所差异。

大肠埃希菌可以是存在于呼吸道的常居菌，也可以是感染的病原菌。从表1可见，痰液是大肠埃希菌来源的主要标本之一，占26.2%，大部分来自于ICU和呼吸内科的病人，并以病情危重、且伴有多种基础性疾病的老年患者为常见，这可能与老年患者长期使用抗菌药物和机体抵抗力下降等各种因素有关。而手术切口感染，在此次调查中亦占一定的比例（9.2%）。谢育光等报道[4]，手术切口感染的细菌以大肠埃希菌检出率最高（16.00%）。切口感染原因复杂，围手术期应尽量减少可能引起感染的各种因素，以降低术后并发症的发生。

3.2 大肠埃希菌耐药性分析

由表2可见，大肠埃希菌对大多数抗菌药物的耐药率在52%以上，仅对哌拉西林/他唑巴坦（4.7%）和头孢哌酮/舒巴坦（2.0%）表现为高度敏感，低于国内平均水平（7.6%、6.1%）；对头孢吡肟的耐药率（54.4%）明显高于国内平均水平（28.8%）[1]；对第3代头孢菌素的耐药率也高于有关文献报道[5]；对氟喹诺酮类药表现为中度耐药，略低于文献报道和国内平均水平[1，6]；对阿米卡星和庆大霉素的耐药率分别为16.0%和56.9%，均高于同期文献报道[7]；产ESBLs组对哌拉西林和第3代头孢菌素、氨曲南及氟喹诺酮类药的耐药率，明显高于不产ESBLs组。因此，对于呼吸道感染合并有各种基础疾病的老年患者和怀疑ESBLs感染的危重患者，临床上经验性抗菌药物治疗时可首选哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦；对于肾功能正常的泌尿系统感染患者可选择阿米卡星作为临床经验治疗；第3代头孢菌素可作为不产ESBLs菌株感染的首选。

3.3 产ESBLs大肠埃希菌监测情况

产ESBLs大肠埃希菌的检出率为43.4%，明显高于国内的报道（33.4%）[5]。产ESBLs大肠埃希菌对头孢噻肟的耐药率明显高于头孢他啶（P＜0.01），说明本院产ESBLs大肠埃希菌主要为头孢噻肟型，与国内、外报道相符[8，9]。药敏试验结果显示，产ESBLs大肠埃希菌对青霉素类、第3代头孢菌素、氨曲南和氟喹诺酮类药的耐药率都很高，对头孢吡肟的耐药率2009年高达100.0%。目前对其最有效的抗生素是碳青霉烯类抗生素，如亚胺培南、美罗培南等。感染产ESBLs大肠埃希菌的老年患者和危重患者应首选碳青霉烯类治疗，或根据病情选用哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦等其他抗菌药物，同时对检出产ESBLs菌感染的患者加强消毒隔离，防止交叉感染。

综上所述，我院大肠埃希菌的耐药形势严峻，抗菌药物的选择具有明显压力。近几年来，第3代头孢菌素的品种增多及消耗量逐年增长、氟喹诺酮类药的广泛应用和临床不合理使用抗菌药物的现象，是直接导致产ESBLs大肠埃希菌的检出率呈逐年上升的原因。因此，医院应加强抗菌药物的使用管理和监控措施，建立抗菌药物临床应用预警机制，并采取相应的干预措施，对耐药率高的药物暂停使用或控制使用，及时做病原学检查和药敏试验，根据药敏试验结果选择有效的抗菌药物是提高细菌感染治愈率和控制院内感染、降低细菌耐药性的重要手段。

[1]卫生部办公厅.卫生部办公厅关于进一步加强抗菌药物临床应用管理的通知（卫办医发[2008]48号）附件2卫生部全国细菌耐药监测2006－2007年度报告[R].2008-03-24.

[2]斯崇文，贾辅忠，李家泰.感染病学[M].第1版.北京:人民卫生出版社，2004:515.

[3]陈文光，蒋景华，王宗欣.大肠埃希菌的科室分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志，2008，18（1）:120.

[4]谢育光，谭雪梅，林运贤，等.手术切口感染的细菌分布和耐药性研究[J].河北医学，2010，16（7）:826.

[5]唐 简.422株大肠埃希菌耐药性分析[J].南华大学学报（医学版），2008，36（4）:495.

[6]陈贤华，梁思群.2003－2007年大肠埃希菌耐药性监测分析[J].现代医药卫生，2008，24（15）:2270.

[7]曾春芳，韩兴平.我院2001－2008年临床分离革兰阴性杆菌构成及其耐药性分析[J].中国药房，2010，21（2）:139.

[8]周建党，彭怀燕，陈 颖.超广谱β-内酰胺酶菌耐药性的探讨[J].实用预防医学，2001，8（1）:38.

[9]Oteo J，Campos J，Baquero F，et al.Antibiotic resistance in 1962 invasive isolates of Escherichia coli in 27 Spanish hospitals participating in the European Antimicrobial Resistance Surveillance System（2001）[J].J Antimicrob Chemother，2002，50（6）:945.