卡式配血在临床输血中的应用价值

杨 莹，谭雅玲，蒋永青

(江西省上饶市市立医院检验科，江西 上饶 334000)

交叉配血主要是检测红细胞与血清、血浆的相容性。不完全/不规则抗体可能引起输血反应，而传统配血方法不能检测出不完全抗体。传统抗人球配血可检出不完全抗体，但操作复杂，可出现假阴性。微柱凝胶法是建立在抗人球蛋白基础上的一种新方法，可用于抗体筛查、交叉配血。该方法标本用量少，灵敏度高，特异性强，操作简单，结果可较长时间保存[1]。我院检验科用微柱凝胶法对537例患者进行交叉配血，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 受血者 本院2010年6月至2010年11月需输血的住院患者共537例，其中男性患者293例，女性患者244例，年龄4岁～82岁，内科312例、外科175 例、妇产科32例、儿科5例、血液透析科13例。输用血液均由上饶市中心血站提供。

1.2 试剂与仪器 微柱凝胶血型卡，多特异抗人球配血卡，专用离心机和孵育箱(强生公司)；凝聚胺试剂(珠海贝索生物技术有限公司)，ABO标准红细胞，抗人球蛋白试剂(上海血液生物医药有限公司)。

1.3 方法

1.3 .1血型鉴定 每位受血者、供血者交叉配血前均先进行ABO血型正反定型及Rh血型复检。正定型及Rh血型：制备受血者、供血者1.5%红细胞悬液20μl加入血型卡内，直接用专用离心机离心5min判读结果。反定型：受血者、供血者血浆40μl加ABO标准红细胞20μl直接用专用离心机离心5min判读结果。

1.3 .2 交叉配血试验：制备同型受供血者血清和

1.5 %的红细胞悬液，标记抗人球卡。每孔滴加Liss液50μl，主侧：40μl受血者血清加1.5%供血者红细胞悬液20μl；次侧：40μl供血者血清加 1.5%受血者红细胞悬液20μL，37℃孵育10min后专用离心机离心5min，观察结果，红细胞沉积在凝胶管底部者为阴性，红细胞聚集在凝胶带上部为阳性。

1.3 .3凝聚胺介质法 主管供者2%红细胞悬液1滴加受者血清2滴，次管受者2%红细胞悬液1滴加供者血清2滴，混匀后加低离子溶液0.6ml，混匀再加凝聚胺溶液2滴，3000r/min离心15s，倒掉上清液，轻摇有凝集，再加悬浮液2滴，凝集在1min内散开为阴性，凝集不散开为阳性。

2 结果

用微柱凝胶卡氏法交叉配血537例，其中15例有凝集， 因为红细胞悬液浓度过高而引起3例，由于纤维蛋白的影响引起2例，因疾病原因引起8例(2例肾衰病人，1例白血病，3例消化道大出血病人，1例严重贫血，1例肿瘤病人)，此8例均为次侧凝集，用凝聚胺法检测均为阴性。以上8例患者红细胞直接Coombs试验抗体为阳性。后经输注洗涤红细胞后期观察，无不良反应。因冷凝集素引起1例。其中主侧管凝集(2+-3+)1例，为消化道大出血有输血史病人，用凝聚胺法复做交叉配血结果相符也为主管凝集。将上例患者的红细胞用盐水洗涤3次，用洗涤后的红细胞作抗人球试验和抗体筛检检测，发现患者血清中有不完全抗体，与临床联系，暂缓输血。

3 讨论

目前，微柱/管凝胶技术在一些先进国家已成为常规的红细胞血型血清学检测技术[2]。该方法为国际公认的安全输血的推荐方法。卡式检测法是生物化学凝胶过滤技术和免疫抗原抗体反应相结合的产物。通过调节凝胶的浓度来控制凝胶间隙大小，使其间隙只能允许游离的RBC通过，从而使游离RBC与聚集RBC分离。凝胶中已加好了各类血型抗体和抗人球蛋白，加入样本细胞即可定型，从而简化操作过程。强生的血型仪器采用柱凝集技术，在检查准确性和灵敏度方面有提高。全自动的操作方式减少了人工干预，很好避免人工操作产生的错误。在试剂卡方面，玻璃珠介质更加耐热耐压，常温保存。其加样、离心和孵育所需时间少，所采用的不同打孔器很好的避免了交叉污染。在结果读取方面，强生的双面读取也比较安全，更好杜绝输血安全隐患。其特有的急诊插入功能，使得操作很方便。

在交叉配血不合的标本中，抗人球试验阳性率为多数，血清中的不完全抗体是引起交叉配血不合的常见原因。配血次侧阳性发生的原因有二，一是供血者血浆中含有针对受血者的不规则抗体，还有一个就是受血者红细胞被致敏，导致次侧凝集，此外，我们还要考虑冷凝集素的影响。输血前对每一个受血者常规做抗体筛选，可进一步提高输血安全性。

引起卡式配血假阳性的有标本因素，如标本抗凝不充分，离心不充分，红细胞悬液的浓度不适或血浆与血细胞的比例不适；温度因素在微柱凝胶法中也会有影响，应充分注意，排除冷凝集素影响；疾病或药物因素在配血中发也被发现，一些肿瘤癌症、白血病、慢性肝病，上消化道出血，贫血患者，交叉配血过程中容易引起假阳性，这是由于反复的输血过程，导致了红细胞表面发生了变化，改变了正常的红细胞表面表达，使得在实验室配血过程中与试剂中含有的IgG，C3溶液发生反应。另外，大量抗生素、止血敏、肝素、云南白药等药物也会干扰配血结果[3]。

[1]陈燕萍,王长奇,朱 芳,等.微柱凝胶技术鉴定血型和筛检不规则抗体的临床应用[J].实验与检验医学,2008,26(6):719.

[2]雷国华,钟清兰,熊永萍,等.微柱凝胶免疫检测法在配血及血型鉴定中的应用[J].实验与检验医学,2010,28(2):202.

[3]唐长久,王 华,李瑞云,等.微柱凝胶配血次侧不和17例临床分析[J].中国输血杂志,2005,18(1):61.