胶质瘤组织中NLK蛋白的表达变化及意义

李 震,于志华,崔 岗

(苏州大学附属第一医院,江苏苏州 215006)

神经白细胞素(NLK)是一种促分裂原活化蛋白激酶类似性的激酶,其对神经的形成和维持起重要作用[1,2]。2000年 1月 ～2009年 12月,我们观察了观察胶质瘤组织中NLK蛋白的表达变化,并探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 胶质瘤70例,男 39例,女 31例;年龄 17～79岁,平均 40.3岁;肿瘤位于额叶26例,顶叶 6例,枕叶 3例,颞叶 15例,不确定 20例;肿瘤直径＜4 cm 36例,≥4 cm 34例;肿瘤组织分级(WHO,2007年)Ⅱ级34例,Ⅲ级24例,Ⅳ级12例;患者术前均未行放化疗,于 2000年 1月 ～2006年12月行手术切除,并留取胶质瘤组织。术后随访 3～60个月,末次随访时间为 2009年 12月,其间死亡28例。

1.2 NLK蛋白检测方法 采用免疫组化SP法,实验步骤按说明书进行。NLK阳性细胞为细胞质或细胞核中含有棕黄色颗粒的肿瘤细胞。高倍镜下对每张切片随机选择 5个视野,计算每张切片阳性细胞百分比,取均值;阳性细胞≥10%为阳性。将阳性细胞数≥30.2%判为高表达,＜30.2%判为低表达。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件。率的比较采用Fisher检验,生存分析采用Kaplan-Meier方法。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

本组中65例NLK蛋白表达阳性,其中高表达39例,低表达 26例。NLK蛋白高表达与胶质瘤临床病理参数的关系见表1,由表可见,NLK蛋白高表达与胶质瘤组织分级有关(P＜0.01)。

表1 NLK蛋白表达与胶质瘤临床病理参数的关系

3 讨论

NLK是人们在研究红鳍东水魨神经纤维瘤病1型(NF1)基因时,在其5′非编码区发现的一个新基因,因为其与 Nemo基因类似而命名的[3]。由于NLK与促分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)和细胞周期依赖激酶(CDKs)都有一定的同源性[4],人们对NLK在肿瘤形成中的作用在分子和细胞水平进行了大量的研究。在分子水平的研究发现,NLK能够通过上调TAK1-NLK而对经典的Wnt/β-catenin信号通路起到抑制作用,而Wnt/β-catenin信号通路被认为在人的肿瘤形成中起到重要作用,这就说明NLK可能是一种抑癌分子。在乳腺癌和结肠癌细胞株中的研究表明其能够通过诱导肿瘤细胞的凋亡而起到抗肿瘤作用。另有研究表明,NLK在乳腺癌组织中是抑癌基因,可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,发挥抑制肿瘤发生发展的作用[5]。

恶性胶质瘤是一种高侵袭性、生长迅速的肿瘤,其预后很差[6]。研究表明,对低级别的恶性胶质瘤患者经过正规的手术及放化疗,能够明显改善预后[7]。因此,在胶质瘤的治疗中,寻找能一种够预测患者预后的指标十分重要[8]。我们采用免疫组化法检测了70例胶质瘤组织中的NLK。结果显示,本组阳性率为92.9%;而且,NLK蛋白高表达与胶质瘤组织分级有关(P＜0.01),与年龄、性别、KPS评分、肿瘤位置、肿瘤直径、坏死等都无明显相关性,提示NLK和胶质瘤的恶性程度相关,有可能作为预测恶性胶质瘤患者预后的一个新的指标。然而,恶性胶质瘤的形成过程十分复杂,但我们可以肯定NLK在这一过程中起到了重要作用,但具体机制尚有待进一步研究。

[1]Harada H,Yoshida S,Nobe Y.Genom ic structure of the human NLK (nemo-like kinase)geneand analysis of its promoter region[J]. Gene,2002,285(1-2):175-182.

[2]Ishitani T,Ishitani S.Nemo-Like kinase is involved in NGF-induced neurite outgrowth via phosphorylating MAP1B and paxillin[J].J Neurochem,2009,10(5):1471-4159.

[3]Thorpe CJ,Moon RT.Nemo-like kinase isan essential coactivator of Wnt signaling during early zebrafish development[J].Development, 2004,131(12):2899-2909.

[4]Ishitani T,Ninom iya-Tsuji J,Nagai SM.The TAK 1-NLK-MAPK-related pathway antagonizes signalling between beta-catenin and transcription factor TCF[J].Nature,1999,399(6738):798-802.

[5]Ishitani T,Kishida S,Hyodo-Miura J.The TAK 1-NLK mitogen-activated protein kinase cascade functions in theWnt-5a/Ca2+pathway to antagonizeWnt/beta-catenin signaling[J].Cell Biol,2003,23 (1):131-139.

[6]Kirla RM,Haapasalo HK,Kalimo H.Low expression of p27 indicates a poor prognosis in patients with high-grade astrocytomas[J]. Cancer,2003,97(3):644-648.

[7]刘泰福.肿瘤放射治疗学[M].上海:复旦大学出版社,2001:475.

[8]BerensME,RiefMD,Loo MA.The roleofextracellularmatrix in human astrocytoma m igration and proliferation studied in a microliter scale assay[J].Metastasis,1994,12(6):405-415.