吗替麦考酚酯对重型颅脑损伤兔血清ABAb水平的影响

李志涛,闫 华,薛 静,刘 暌,只达石

(天津市环湖医院,天津 300060)

研究证明,颅脑损伤后免疫功能会受到不同程度的影响[1,2]。抗脑抗体(ABAb)是由免疫系统针对脑组织抗原产生的自身抗体。2009年 11月 ～2010年 5月,我们观察了吗替麦考酚酯(MMF)对重型颅脑损伤大白兔血清ABAb水平的影响,并探讨其意义。

1 材料与方法

1.1 材料 健康、成年新西兰大白兔16只,雌雄不限,体质量(2.5±0.1)kg;20%氨基甲酸乙酯, MMF,兔ABAb试剂盒,动物立体定位头架(DY-1型),电动磨钻,液压冲击装置。

1.2 造模与分组 经耳缘静脉注入超滤的 20%氨基甲酸乙酯生理盐水溶液 15～20 ml,动物麻醉后,俯卧位固定于动物立体定位头架,保持顶骨左右位水平、前后位切线水平,采用液压打击法建立重症颅脑损伤模型[3]。造模成功后随即分为观察组和对照组,各 8只。观察组经胃管注入吗替麦考酚酯 1 mg/kg、1次/d,连用3周;对照组经胃管注入等量生理盐水,待其复苏后放回笼内饲养。

1.3 兔血清ABAb检测方法 两组分别于造模前2 d及造模后3、7、14、21、28 d耳缘静脉取血 4 ml,分离血清,-20℃保存。采用ELISA法检测血清中的ABAb,按试剂盒说明书操作。

1.4 统计学方法 采用SPSS11.5软件。组间比较采用t检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

两组大白兔各时点血清ABAb水平比较见表1。观察组造模后7 d达峰值(9.1 ng/ml),对照组造模后3 d达峰值(13.6 ng/ml)。两组比较,P＜0.05。

表1 两组大白兔各时点血清中ABAb水平比较(±s)

表1 两组大白兔各时点血清中ABAb水平比较(±s)

注:与伤前2 d比较,＊P＜0.05;与对照组比较,#P＜0.05

组别ABAb(ng/ml)前2 d伤后3 d 7 d 14 d 21 d 28 d观察组 10.0±3.2 7.1±1.8＊# 9.1±2.9＊# 5.5±1.4＊# 4.6±0.3＊# 4.2±0.5＊#对照组 10.0±3.2 13.6±0.2＊ 13.4±1.5＊ 12.1±0.3＊ 11.8±0.7＊ 11.5±1.5＊

3 讨论

正常人血清ABAb浓度较低,机体不出现异常改变。ABAB的产生有以下途径:①各种中枢神经系统疾病使脑组织及血脑屏障遭到破坏,脑组织抗原进入血循环,暴露于机体免疫系统,即可成为异常抗原而启动免疫反应,产生 ABAb[4]。②呼吸道及消化道黏膜表面sIgA缺陷,使机体局部抗体的屏障作用减弱或消失,外界大量的异种蛋白有可能未经处理而进入机体,此时导致机体的自身免疫反应启动,产生ABAb[5]。③A组 β溶血性链球菌感染导致机体自身免疫反应启动,产生ABAb[6]。

本实验证实,颅脑损伤后大白兔血清中ABAb水平明显升高,增高的ABAb可通过已经破坏的血脑屏障攻击脑组织,从而形成颅脑损伤后的自身免疫病。其可能的损伤机制有以下几点:①脑脊液和血液中的ABAb可能与脑组织细胞上的自身抗原结合,形成免疫复合物后激活补体。补体活性片段可引起炎症细胞趋化、血管通透性增高、及局部充血、水肿[7]。②ABAb可能参与脑组织的自身免疫过程,并使脑组织受到免疫性损伤;从而导致神经胶质细胞或神经元释放S100b蛋白增加,刺激自身和小胶质细胞产生大量致炎因子和 NO,导致神经元功能障碍或死亡[7]。③ABAb可能参与脑组织的自身免疫过程,并使脑组织外伤后炎性反应加重,产生大量炎症因子,其中的TNF、IL-2、IL-6可促进脑细胞凋亡。④ABAb可刺激小胶质细胞过表达IL-1。IL-1可促进谷氨酸(兴奋性神经递质)表达,同时抑制γ-氨基丁酸(抑制性神经递质)表达,从而诱发癫痫。

MMF是一种选择性抑制T、B淋巴细胞增生的新型免疫抑制剂,具有较独特的免疫抑制效应,是次黄嘌呤单核苷酸脱氧酶非竞争性、选择性和可逆性的抑制剂,在体内代谢成霉酚酸(MPA)。MPA抑制鸟嘌呤从头合成途径的限速酶次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶(IMP-DH)的活性,阻断鸟嘌呤核苷酸的从头合成,使鸟嘌呤核苷酸耗竭,进而阻断DNA合成[8]。本实验结果显示,免疫抑制治疗MMF能有效延缓颅脑损伤后大白兔血清中ABAb升高的时间,并能有效降低血清中ABAb水平。其可能机制为:①MMF不但可以抑制T、B淋巴细胞因受有丝分裂原和同种异体抗原刺激所引起的增生,而且可抑制淋巴细胞活化抗原的表达,诱导其凋亡;还通过消耗鸟嘌呤核苷,抑制糖基化作用和一些黏附分子的表达,减少淋巴细胞及单核细胞的再循环[9],可抑制 B淋巴细胞产生抗体,从而在一定程度上抑制ABAb的产生。②体内实验表明,MMF除显著减少细胞浸润及免疫复合物沉积外,还能强烈抑制细胞黏附分子的合成、表达,具有较强的抗炎作用。伤后给予MMF治疗,可完全抑制脑组织伤灶中炎症介质IL-6的产生,减少自由基生成,从而减轻凋亡脑细胞对脑组织及免疫系统的刺激,最终减少ABAb产生。

综上所述,在颅脑损伤的早期应用免疫抑制治疗,可减少ABAb的产生,从而减轻其对自身脑组织的攻击作用,延缓病情恶化,为临床救治重型颅脑损伤患者争取时间。

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