杀菌剂螺环菌胺的气相色谱分析

张晓铭 黄红英（浙江省化工研究院有限公司，浙江 杭州 310023）

0 前言

螺环菌胺（Spiroxamine）是拜耳公司开发成功的取代胺类杀菌剂。

CAS登录号为［118134-30-8］，原药为棕色液体。纯品为淡黄色液体，熔点＜-170℃，沸点120℃（分解），相对密度0.930（20℃）。螺环菌胺是一种新型、内吸性的叶面杀菌剂，属于甾醇生物合成抑制剂，能抑制C-14脱甲基化酶的合成，主要用于防治小麦白粉病和各种锈病、大麦云纹病和条纹病，对白粉病特别有效。作用速度快而且持效期长，兼具保护和治疗作用。其生产工艺是以对叔丁基环己酮为起始原料，加氢还原后与氯甲基乙二醇或丙三醇反应，再经氯化（或与甲磺酰氯反应），最后胺化制得。

由于螺环菌胺是两个异构体A（49％～56％）和B（44％～51％）组成的混合物，用内标法定量测定其含量时，很多内标物重现性差，回收率不好，严重影响异构体的比例。为准确测定螺环菌胺的含量，因此选择以自制的N-乙基-N-正丙基十六胺为内标物进行气相色谱分析。

1 实验

1.1 主要仪器与试剂

气相色谱仪：科晓GC1690，氢火焰检测器；1μL微量进样器；色谱柱：OV-1701毛细管柱（30m×0.32mm×0.25μm）。

内标物：自制的N-乙基-N-正丙基十六胺（以下用代号N21），质量分数≥99.5％；溶剂：乙醇，分析纯；标准品：自制螺环菌胺，质量分数≥99.5％。

1.2 色谱分析条件

采用程序升温法，色谱柱的起始温度为170℃，停留2min，再以10℃/min的升速升至270℃，停留15min。进样器温度270℃，FID检测器温度300℃，氮气：柱前压0.08MPa，分流比：15：1，进样量0.4μL。进样器衬管中不应安装玻璃毛，即使用进口去活玻璃毛也会引起明显的样品吸附，降低重现性。

1.3 溶液配制

1）配制内标溶液。准确称取N21 8.1172g于100mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度，摇匀。

2）配制螺环菌胺标准储备溶液。称取螺环菌胺标样2.5041g于25mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度，摇匀。

3）配制螺环菌胺标准溶液。分别用移液管准确移取标准储备溶液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL于10mL容量瓶中，加入内标液2.0mL，用乙醇定容至刻度，摇匀，得标准溶液1#、2#、3#、4#、5#。

4）配制螺环菌胺样品溶液。分别称取样品0.1983g于10mL容量瓶中，加入内标物0.1501g，用乙醇定容至刻度，摇匀。

1.4 测定方法

设定上述分析条件，待基线稳定后，连续注入几针标准溶液，观察每次进样螺环菌胺相对响应值的重复性，直到相邻两次进样的相对响应值变化＜1.0％时，再按照标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进样。典型的螺环菌胺气相色谱图见图1：

图1 螺环菌胺气相色谱

2 结果与讨论

2.1 气相色谱柱的选择

样品各组分的分离效果取决于色谱柱的是否正确选择。采用了SE-30、SE-54、OV-1701、OV-101四种不同极性色谱柱，分别进行试验，仅选用OV-1701色谱柱时，样品才能够达到理想的分离效果，且色谱柱内对样品的吸附少，重现性好。

2.2 色谱分析条件的选择

为使螺环菌胺和内标物N21能够完全地分离，准确分析螺环菌胺样品的含量，经过试验，最终确定为上述的色谱分析条件，整个分离过程仅需要15min。

2.3 溶剂的选择

选用了几种溶剂试验，只有乙醇不影响内标峰与样品峰、杂质峰的分离，且样品和内标都不会沉淀析出，因此采用乙醇作溶剂。

2.4 定量方法的选择

如果采用外标法定量，则对仪器和分析人员的要求很高，且操作误差大，很难获得理想的回收率与重现性。

采用内标法定量，内标物应与被测组分的相对分子质量和沸点相近、结构相似、且保留时间相近，相互之间又能得到很好的分离。N21为高沸点三级胺，不与样品组分反应，保留时间适宜，与螺环菌胺分离效果好，完全符合内标物的要求，所以本实验最终选择N21作为内标物。

2.5 线性测定

将配好的5个螺环菌胺标准溶液进样测定，对标准溶液1#、2#、3#、4#、5#平均进样3次，取均值得到表1数据如下：

表1 质量比/峰面积比

然后以表1的质量比mi/ms为横坐标，峰面积比Ai/As为纵坐标，绘制内标标准曲线，见图2。

图2 内标标准曲线

由图2可以看出，曲线线性良好，相关系数为0.9995。

2.6 方法准确度及精密度测定

在已知含量的螺环菌胺样品中，加入4个不同质量的螺环菌胺标准品，在稳定的条件下测定其含量，并计算回收率。

表2 回收率测定结果

从表2可以看出，回收率范围在97.21％～101.15％之间，可见该方法满足定量分析要求。

在上述色谱分析条件下，对三批次样品分别5次重复进样，测定结果见表3。

从表3可以看出，最大标准偏差0.88％，变异系数0.91％。

表3 精密度测定结果

2.7 质量百分含量计算方法

根据3.5中得到的曲线拟合公式，得到螺环菌胺质量百分含量计算公式如下：

Wi％=mi×（Ai/As-0.0213）/（ms×0.8298）×100％

其中Wi为样品中螺环菌胺的质量百分含量；

mi为样品质量

ms为内标质量

Ai为样品峰面积

As为内标峰面积

3 结论

本研究方法选择OV-1701毛细管柱、以N-乙基-N-正丙基十六胺为内标物，对螺环菌胺进行定量分析，回收率范围在97.21％～101.15％，最大标准偏差为0.88％，变异系数为0.91％。

本实验所建立的气相色谱内标法测定螺环菌胺含量的分析法具有分离效果好、峰形对称，无拖尾，定量准确、重现性好等优点，不但能满足实验分析要求，而且能够应用于产品质量的监测。

［1］邵颖，李萍.气相色谱内标法测定1，1，1，3-四氯丙烷的含量［J］.化工生产与技术，2009，16（2）：53-54.

［2］孙伟，吴永芹，付越.气相色谱法分析1，1-二氯乙烷［J］.中国氯碱，2004，（9）：29-30.

［3］孙伟，王培建，王星.毛细管气相色谱法分析苯甲腈和间甲苯甲腈［J］.中国氯碱，2005，（9）：33-34.

［4］黄伟东.溴苯腈乳油气相色谱法分析研究［J］.现代农药，2004，3（6）：24-25.

［5］曾亚丽.气相色谱内标法测定动物油脂中的抗氧化剂［J］.现代食品科技，2010，26（8）：904-906.

［6］Ghammamy，Shahriare.Synthesis，characterization，X-ray structural analysis and study of oxidative properties of a chlorochromate（VI）complex with benzyltriphenylphosphonium cation［J］.Transition Metal Chemistry（Dordrecht，Netherlands），2009，34（5）：565-570.

［7］Mitsudome，Takato.Efficient aerobic oxidation of alcohols using ahydrotalcite-supported gold nanoparticle catalyst［J］.Advanced Synthesis＆Catalysis，2009，351：1890-1896.

［8］Roy，Marie Noelle.Tetraarylphosphonium Saltsas Soluble Supports for Oxidative Catalysts and Reagents［J］.Journal of Organic Chemistry，2009，74（22）：8510-8515.