结缔组织生长因子和缺氧诱导因子1α在胰腺癌组织中的表达及意义

商迪 陈少夫

结缔组织生长因子和缺氧诱导因子1α在胰腺癌组织中的表达及意义

商迪 陈少夫

结缔组织生长因子(CTGF)属于一种即刻早基因CCN家族成员之一，位于人染色体6q23.1[1]，广泛存在于人类多种组织器官中，在介导细胞的增殖、迁移、分化、生存及血管生成中起重要作用[2-3]。缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是一个在缺氧状态下发挥活性的核转录因子，在多种肿瘤组织中高表达，在肿瘤的生长及浸润转移中具有重要意义。本实验检测胰腺癌的CTGF、HIF-1α蛋白表达，探讨二者在胰腺癌中的作用和相互关系。

一、资料与方法

1．临床资料：收集42例中国医科大学附属盛京医院病理科2005年至2008年间诊断为胰腺导管腺癌的组织蜡块。其中男性30例，女性12例，年龄43～79岁，平均60岁。按2002年国际抗癌协会(UICC)制定的TNM分期标准，Ⅰ期9例，Ⅱ期20例，Ⅲ期11例，Ⅳ期2例。高分化16例，中低分化26例。伴淋巴结转移者18例，无淋巴结转移者24例。选取十二指肠肿物切除术所获得的10例胰腺组织为正常对照组。

2．CTGF和HIF-1α蛋白检测：采用SP免疫组化方法。

以PBS作为阴性对照，用已知阳性组织切片做阳性对照。兔抗人CTGF和HIF-1α多克隆抗体购自北京博奥森生物技术有限公司。以胞质、胞膜或胞核有棕黄色颗粒为阳性，高倍镜下(400倍)每张切片随机选择5个视野，求阳性细胞的面积，≤10%为阴性，>10%为阳性。

3．统计学处理：采用SPSS13.0软件分析。阳性率的比较用χ2检验，相关性分析采用Spearman等级相关分析，检验水准α=0.05。

二、结果

1．CTGF和HIF-1α阳性表达率：CTGF主要表达于肿瘤细胞的胞质或胞膜(图1a)，间质细胞亦有表达。42例胰腺癌组织中，31例(73.8%)表达阳性，10例正常胰腺组织中,3例(30.0%)表达阳性，两者相差非常显著(P<0.05)。HIF-1α主要表达于肿瘤细胞的胞质和胞核(图1b)。42例胰腺癌组织中，30例(71.4%)HIF-1α表达阳性，10例正常胰腺组织中均未见HIF-1α的表达，两者差别有统计学意义(P<0.05)。癌组织中CTGF与HIF-1α表达呈正相关(r=0.392，P=0.010)。

2．CTGF和HIF-1α表达与胰腺癌临床病理特征的关系：CTGF蛋白表达与肿瘤病理特征均无相关；HIF-1α的表达与肿瘤的临床分期及淋巴结转移有关(表1)。

图1CTGF(a)和HIF-1α(b)在胰腺癌中的表达(免疫组化 ×400)

表1 CTGF和HIF-1α的表达与胰腺癌临床病理特征的关系

讨论近年来研究发现，CTGF在介导肿瘤与基质的交互行为中发挥突出的作用，如在脑胶质细胞瘤，肝细胞癌中高表达者较低表达者病情恶化快，肿瘤的浸润转移能力强，很可能是一种促肿瘤生长转移的因子[4-5]。但CTGF在胰腺癌中是促肿瘤因子还是抑制肿瘤因子存在争议。以往认为，胰腺癌中肿瘤周边的结缔组织纤维化反应是一种保护作用，有限制肿瘤的生长，诱导细胞外基质形成及抑制转移发生的作用[6-7]。但最近的证据表明，这种活化的基质具有致恶变的性质。在胰腺癌中，CTGF可增加成纤维细胞胶原Ⅰ、纤维结合蛋白和α5整合素的mRNA表达，促进基质的合成。胶原Ⅰ已经被证明有促进肿瘤细胞生长、药物抵抗和转移作用[8]。CTGF也可能通过异常的自分泌或旁分泌途径，促进胰腺癌细胞的生长、浸润、转移和血管生成[9]。本实验结果显示，CTGF在胰腺癌组织中的阳性表达率高于正常胰腺组织，提示它参与胰腺癌发生。

缺氧是所有实体瘤的特性，它与肿瘤的侵袭、血管生成及化疗耐药有关。HIF-1α是缺氧状态下最常见的调节因子。研究表明，HIF-1α在膀胱癌、乳腺癌、胰腺癌等实体肿瘤中均呈过度表达，且与肿瘤的临床分期及转移密切相关。本实验结果也表明，HIF-1α在胰腺癌组织中阳性表达率显著高于正常胰腺组织，且与临床分期、淋巴转移密切相关，与文献报道结果基本一致。说明HIF-1α可能在胰腺癌的发生发展及浸润转移过程中起着促进作用。

有文献报道，重组CTGF在常氧状态下及低氧状态下均可刺激HCS-2/8细胞HIF-1α mRNA的表达，且呈剂量依赖方式，提示在HCS-2/8细胞系中,CTGF可调节HIF-1α的表达[10]。胰腺癌细胞在低氧培养环境下，CTGF的表达和分泌量增加，并且与缺氧共区域化[11]，提示CTGF的功能部分由HIF-1α来调节。本结果显示，CTGF和HIF-1α在胰腺癌组织中的阳性表达率呈明显正相关性，推测在胰腺癌细胞中，CTGF促进肿瘤的发生发展及浸润转移的机制之一是通过上调HIF-1α的水平而实现的，两者相关的机制尚需进一步研究。

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2009-06-22)

(本文编辑：吕芳萍)

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2010.03.022

110004 沈阳，中国医科大学附属盛京医院消化内科

陈少夫，Email:csf196211@6ahoo.com.cn